锌制剂辅助益生菌对腹泻患儿肠道菌群平衡、肠屏障功能和免疫功能的影响

田斌斌 郭小凤 申永霞 李 婕

1.开封市儿童医院急诊科 (河南 开封 475000)

2.开封市儿童医院新生儿科 (河南 开封 475000)

3.开封市儿童医院内科门诊 (河南 开封 475000)

腹泻是儿科高发的消化系统疾病，其致病因素多与细菌感染、肠道菌群失衡以及患儿免疫力低下等有关[1]。临床主要症状为腹痛、大便次数增多及大便形状的改变，如治疗不及时，会导致患儿严重脱水，给患儿生长发育带来不良影响[2]。现阶段临床治疗小儿腹泻多采用益生菌纠正患儿肠道菌群失衡状态，重建肠屏障功能，但对于病毒性肠炎其缓解临床症状欠佳[3]。据相关报道锌制剂可有效保护肠粘膜细胞，用于辅助治疗小儿腹泻效果良好[4]。本研究特探讨锌制剂辅助益生菌对腹泻患儿肠道菌群平衡、肠屏障功能和免疫功能的影响，报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料选取2018年03月至2020年11月在我院接收治疗的86例腹泻患儿，按照随机信封法分为2组，对照组(n=43例，接受双歧杆菌三联活菌散治疗)，观察组(n=43例，接受双歧杆菌三联活菌散+葡萄糖酸锌颗粒治疗)。

纳入标准：确诊为小儿急性腹泻[5]；生化检查为病毒感染；年龄≥1岁，≤6岁；自患儿家属发现患儿腹泻起3d之内来我院就诊；治疗前患儿8h空腹，且家属未自行应用药物治疗。排除标准：肝肾功能不全；免疫缺陷；对锌制剂过敏；肠道畸形。终止标准：患儿病情恶化。

1.2 方法2组腹泻患儿均给予调整电解质紊乱、营养支持与补液等临床基础治疗。对照组给予益生菌治疗。餐后30 min温水冲服双歧杆菌三联活菌散(国药准字S10970105，规格1g/包)，1～5岁儿童，1g/次；6岁2g/次，3次/d。观察组则给予益生菌+锌制剂治疗。餐后30 min温水冲服葡萄糖酸锌颗粒(国药准字H20083652，规格规格70 mg/包)，10～21 kg，35mg/日，22～27 kg，70 mg/日。2组患儿均干预7d。

1.3 观察指标肠道菌群平衡[6]。分别取2组患儿腹泻起病时3d、7d自然排出未经污染的新鲜大便通过粪便涂片与革兰染色，进行菌群分析，并根据显微镜下观察到的细菌总数、球菌/杆菌比例与形态特点对肠道菌群失调程度进行分度。Ⅰ度：粪便中细菌总数与球菌/杆菌比例有轻微改变，其中革兰阳性杆菌数量低于正常大便中的值，但革兰阴性杆菌数量稍高于正常值，革兰阳性球菌数量与正常值相比有增加或不变，酵母样菌、梭菌数量稍高于正常值。Ⅱ度：粪便中细菌总数与球菌/杆菌比例明显改变，其中革兰阳性杆菌数量明显减少，革兰阴性杆菌数量明显增多≥90%，革兰阳性球菌数量增多，球菌/杆菌比例产生倒置，酵母样菌与梭菌数量则明显升高。Ⅲ度：粪便中细菌总数量显著降低，其中仅有一种真菌或细菌数量占绝对优势。肠屏障功能[7]。治疗前、治疗7d后抽取患者清晨时空腹静脉血3mL，3000 r离心10分钟，取上清液利用分光光度法测定内毒素、D-乳酸及二胺氧化酶水平。免疫功能。将上述分离出的血清，利用免疫比浊法测定免疫球蛋白M(IgM)、免疫球蛋白G(IgG)水平，CD4/CD8利用免疫荧光标记法检测。以上操作严格按照试剂盒说明书进行，试剂盒均购于中拓生物。

1.4 统计学方法本次涉及到的数据分析选用统计学软件SPSS 19.0，计数资料(n)用(%)表示，2组间计数资料χ2检验；等级资料用秩和检验；计量资料如满足正态分布则用(±s)表示，2组间计量资料进行t检验；当P<0.05，则说明对比数据有统计学意义。

2 结 果

2.1 2组患儿一般资料对比2组患儿一般资料无差别(P>0.05)，见表1。

表1 2组患儿一般资料对比(n)

2.2 2组患儿菌群平衡情况对比2组患儿治疗前菌群平衡情况无差别(P>0.05)，治疗7d观察组菌群平衡情况好于对照组(P<0.05)，见表2。

表2 2组患儿菌群平衡情况对比(n，%)

2.3 2组患儿肠屏障功能对比2组患儿治疗前内毒素、D-乳酸与二胺氧化酶无差别(P>0.05)，治疗7d观察组内毒素、D-乳酸与二胺氧化酶水平低于对照组(P<0.05)，见表3。

表3 2组患儿肠屏障功能对比

2.3 2组患儿免疫功能对比2组患儿治疗前 IgM、 IgG与CD4/CD8无差别(P>0.05)，治疗7d观察组IgM、IgG与CD4/CD8水平高于对照组(P<0.05)，见表4。

表4 2组患儿免疫功能对比

3 讨 论

吴用等[8]研究发现，锌制剂联合益生菌可以使轮状病毒感染患儿的临床症状消失，平衡胃肠道菌群的同时，且能改善胃肠激素水平，提高临床疗效。本研究显示，观察组治疗后菌群平衡情况好于对照组，说明锌制剂辅助益生菌治疗小儿腹泻有助于调节患儿肠道菌群平衡。分析原因可能为葡萄糖酸锌含有人体必需微量元素锌(Zn)，Zn为体内多种酶的重要组成成分，可提高DNA 聚合酶、胸腺嘧啶核苷酸激酶的活性与肠黏膜上皮细胞稳定性，促进核酸与蛋白质合成，具有抗氧化损伤的作用，可增强肠黏膜细胞自我修复水平[9]；双歧杆菌三联活菌散含有粪链球菌与枯草杆菌，能通过直接补充患儿体内正常菌群，与分泌细菌素、肠活动素抑制肠道内有害菌群繁殖，二者联合使用协同增效，从而可有效调节患儿肠道菌群平衡。

蒋茂林等[10]发现，锌制剂辅助治疗肠炎幼儿可帮助患儿早日恢复肠道功能，提高治疗有效率。本研究发现，观察组治疗后肠屏障功能优于对照组，说明锌制剂辅助益生菌治疗小儿腹泻有助于改善患儿肠屏障功能。分析原因可能为，锌具有抗氧化损伤与保护肠上皮细胞膜功能的能力，可稳定肠黏膜上皮细胞，并促进受损的肠黏膜上皮细胞再生和修复，对肠黏膜细胞保护作用显著，从而可以改善患儿肠屏障功能。

唐秋华等[11]研究发现锌剂+双歧杆菌三联活菌散用于治疗小儿腹泻可以提高患儿免疫功能，促进患儿肠道菌群恢复平衡，缓解临床不适症状，且疗效安全可靠。本研究表明，观察组免疫功能强于对照组，说明锌制剂辅助益生菌治疗小儿腹泻可提高患儿免疫功能。分析原因可能为葡萄糖酸锌中的Zn为机体含Zn酶和Zn依赖酶的活化剂，可提高肠黏膜刷状缘肽酶活性，促进免疫球蛋白的分泌[12]；同时还可激活B淋巴细胞、诱导T淋巴细胞活化，参与抗体的形成及释放，进而可提高患儿免疫功能[13]。叶莹莹等[14]研究发现葡萄糖酸锌用于治疗迁延性腹泻可提高患儿免疫功能，缩短病程，避免病情复发。

综上所述，锌制剂辅助益生菌治疗小儿急性腹泻有助于调节患儿肠道菌群、改善肠屏障功能与提高机体免疫功能，效果良好，临床可参考。但本次研究也存在局限性，如本次患儿选样仅来自于我院，取样范围小，样本数量有仅86例，临床跟踪时间短，因此本次研究结果还需要多中心、大样本，延长临床跟踪时间等进一步深入探讨。