菊糖-枯草芽孢杆菌合生元对断奶仔猪粪便菌群及粪便pH 的影响

杨侃侃

（辽宁省农业经济学校，辽宁锦州 121000）

随着集约化和规模化养猪产业发展进程的不断加快，仔猪早期断奶综合征的发生率呈逐渐升高的趋势，给养猪产业造成了很大的经济损失。微生态制剂作为一种安全、环保的绿色饲料添加剂，可有效预防仔猪早期断奶综合征，调节仔猪肠道系统微生态平衡，降低断奶仔猪发病率，促进养猪业的健康发展。益生菌和益生素类物质按适当比例配合成合生元，可最大限度地发挥其促生长、调控畜禽消化道微生态环境等作用。枯草芽孢杆菌作为一种重要的益生菌制剂，不仅能提高动物生长性能，增强免疫力，同时能调节肠道菌群平衡。菊糖是一种天然果聚糖，能调节动物消化道微生物区系的平衡。本试验在断奶仔猪日粮中添加菊糖-枯草芽孢杆菌合生元，比较分析其对仔猪粪便微生物菌群及粪便pH 的影响，为断奶仔猪饲料中添加合生元奠定理论基础。

1 材料与方法

1.1 试验材料

自制菊糖培养基，菊糖含量为4.0mg/mL。试验用枯草芽孢杆菌培养基、菊糖-枯草芽孢杆菌合生元培养基均为实验室自制，其中确定含菌量为1.35×108CFU/mL。基础饲粮由锦州展鸿牧业有限公司参照NRC（1998）仔猪营养需要量标准配置提供，其组成及营养水平见表1。

表1 基础饲粮组成及营养水平（风干基础）单位：%

1.2 饲养管理

试验采用半开放式猪舍，通风、光照、温度、湿度等环境条件控制良好。猪只自由饮水和采食，按照分组每天在饲粮中添加不同培养基。试验前按猪场常规管理程序对断奶仔猪进行免疫防疫和驱虫。试验为期14d。

1.3 试验设计

试验选取120 头“杜洛克×长白×大白” 三元杂交仔猪，断奶日龄为（23±2）d，平均体重为（6.76±0.56）kg。将仔猪随机分为4 组，分别为处理A 组（基础日粮）、处理B 组（基础日粮+菊糖）、处理C组（基础日粮+枯草芽孢杆菌）、处理D 组[基础日粮+（菊糖-枯草芽孢杆菌合生元）]，每组5 个重复，每个重复6 头猪。各组培养基喂量为15mL/d。

1.4 测定指标及方法

（1）粪便收集：在试验第15 天早上收集各处理组每个重复3 头健康仔猪排出的新鲜粪便（不低于1g）于无菌自封袋封装，保存于冰盒中。

（2）计数：采用平板涂布法进行细菌计数。整个操作过程在无菌操作台上进行，首先将1g 粪便与9mL 灭菌生理盐水混匀稀释成10-1，然后取1mL 稀释液再次与9mL 的生理盐水混匀稀释成10-2，按此法逐级进行，稀释至10-7。每个菌种选择10-4、10-5、10-63个梯度，每个梯度2 个重复。分别取50μL 不同浓度稀释液滴入相应培养基，在37℃条件下分别培养大肠杆菌24h、乳酸杆菌48h（厌氧）、双歧杆菌48h（厌氧）。结果以CFU 的常用对数值lg（CFU/g）表示。

（3）粪便pH：在试验第15 天早上，各处理组每个重复随即选择3 头健康仔猪，收集新鲜粪便10g 放入烧杯中，用pH 仪测定pH。

1.5 统计分析

采用SPSS 17.0 对试验数据进行单因素方差分析，采用Duncan's 法进行多重比较，结果以“平均值±标准差” 表示，P＜0.05 表示组间差异显著。

2 结果与分析

2.1 断奶仔猪粪中菌群

由表2 可知，从大肠杆菌数量看，与处理A 组相比，其余试验组数量均有降低趋势，其中处理C 组和处理D 组仔猪粪便大肠杆菌数量与处理A 组相比显著减少（P＜0.05），且这两组之间无显著差异（P＞0.05），其中处理D 组大肠杆菌数量最低；从乳酸杆菌数量看，处理B 组、处理C 组和处理D 组均高于处理A 组，其中处理D 组乳酸杆菌数量最高，显著高于处理A 组和处理B 组（P＜0.05），与处理C 组差异不显著（P＞0.05）；从双歧杆菌数量看，处理D 组显著高于处理A 组（P＜0.05），而处理B 组、处理C组与处理A 组之间差异不显著（P＞0.05），4 组中处理D 组双歧杆菌数量最高。

表2 菊糖-枯草芽孢杆菌合生元对断奶仔猪粪中菌群的影响 单位：g/L

2.2 断奶仔猪粪便pH

由表3 可知，处理B 组、处理C 组和处理D 组仔猪粪便pH 值均显著低于处理A 组（P＜0.05），其中处理D 组粪便pH 最低，处理B 组和处理C 组之间数量上很接近。

表3 枯草芽孢杆菌-菊糖合生元对断奶仔猪粪便pH 的影响

3 讨论

3.1 断奶仔猪粪便PH 值

3.1.1 菊糖-枯草芽孢杆菌合生元对断奶仔猪粪便菌群中大肠杆菌数量的影响

倪学勤等[1]试验表明，仔猪断奶后添加枯草芽孢杆菌可降低大肠杆菌数量，对肠道中需氧菌和厌氧菌的比例起到维持作用。郝生宏等[2]发现，雏鸡日粮中添加枯草芽孢杆菌后，粪便中大肠杆菌的数量明显减少（P＜0.05），合生元抑制了大肠杆菌的生长繁殖。相关研究表明合生元不仅可以增加肉鸡肠道中乳酸杆菌的数量，还可以减少大肠杆菌、沙门菌等总需氧菌的数量。本试验研究表明，枯草芽孢杆菌与合生元均可显著降低仔猪粪便大肠杆菌数量（P＜0.05），菊糖组在一定程度上降低了大肠杆菌的数量（P＞0.05）。本试验基本与前人研究结果一致。

3.1.2 菊糖-枯草芽孢杆菌合生元对断奶仔猪粪便菌群中乳酸杆菌数量的影响

Guo 等[3]研究发现，与对照组相比，仔猪日粮中添加枯草芽孢杆菌后，粪样中乳酸杆菌数量显著增加。顾宪红等[4]研究表明，菊粉能促进断奶仔猪盲肠内乳酸杆菌生长，增加双歧杆菌数量（P＜0.05）。邸静[5]报道，给肉仔鸡饲喂苦豆籽粕-双歧杆菌合生元后，能提高自身肠道内的乳酸杆菌数量。本试验研究表明，枯草芽孢杆菌与合生元均可显著提高乳酸杆菌数量（P＜0.05），菊糖组也可提高乳酸杆菌数量，但差异不显著（P＞0.05）。

3.1.3 菊糖-枯草芽孢杆菌合生元对断奶仔猪粪便菌群中双歧杆菌数量的影响

Jannine 等[6]报道，菊糖增加了双歧杆菌和乳酸杆菌等有益微生物菌群在各段肠道中的数量。邸静[5]研究发现，苦豆籽粕-双歧杆菌合生元对肉鸡肠道内双歧杆菌的增殖具有促进作用。本试验研究表明，合生元组可提高仔猪粪便双歧杆菌数量（P＜0.05），菊糖组在一定程度上提高了双歧杆菌的数量（P＞0.05），枯草芽孢杆菌组的双歧杆菌数量没有增加趋势，原因可能是乳酸杆菌产生了一定的竞争抑制作用，从而负面影响双歧杆菌的增殖，导致双歧杆菌数量下降。

菊糖是典型的益生元，大量体内试验和体外试验研究表明，菊糖能增强有益菌生长，如双歧杆菌和乳酸杆菌在肠道后段会利用菊糖，使有益微生物迅速增加，维持了肠道微生态平衡，进而促进动物健康[7]。枯草芽孢杆菌-菊糖合生元进入肠道后不仅会增加外源性有益菌，同时合生元中的菊糖成分可以辅助肠道内有益菌的恢复，并且还能抑制有害菌繁殖。此外，肠道有益菌的增加还可以促进营养物质的消化吸收，使肠道pH 降低，进而抑制有害菌繁殖，两者结合可起到双倍效果。本试验研究表明，以菊糖为益生元与枯草芽孢杆菌配合成的合生元添加剂不仅可以快速促进断奶仔猪肠道菌群的建立及平衡，还可以显著提高有益菌与有害菌的比值。因此，菊糖和枯草芽孢杆菌具有协同调节肠道微生态平衡的作用。

3.2 菊糖-枯草芽孢杆菌合生元对断奶仔猪粪便pH 的影响

大量研究表明，枯草芽孢杆菌和菊糖均可显著降低氨气浓度，改变猪舍环境。杨锋[8]研究表明，3%的枯草芽孢杆菌制剂可显著降低猪舍氨气浓度（P＜0.05）。孙瑞峰等[9]发现，菊糖+枯草芽孢杆菌能显著减少肉鸡排泄物中氨气散发量。而Aarnink 等[10]研究认为，影响氨气散发量的关键因素是粪便pH，两者成正相关，降低粪便pH 可显著减少氨气散发量。由于试验条件的限制，无法测得氨气挥发量，进而用仔猪粪便pH 来反应猪舍氨气浓度。杨锋[8]试验报道，随着枯草芽孢杆菌制剂添加量的增加，仔猪粪便pH 降低。顾宪红等[4]研究表明，1%菊粉能显著降低断奶仔猪直肠后端内容物pH（P＜0.05）。本试验研究表明，菊糖组、枯草芽孢杆菌组和合生元组均能降低粪便pH，合生元组尤其明显，与前人报道一致。

菊糖到达肠道后端被微生物发酵，可产生乙酸、丙酸、丁酸等短链脂肪酸和乳酸、丙酮酸、琥珀酸等有机酸，菊糖与枯草芽孢杆菌两者结合，更能显示出两者的共同作用，显著降低粪便pH，进而降低氨气等恶臭气体的散发。粪便pH 不仅能显示肠道内环境，也可表明合生元等微生态制剂可以减少猪舍内有害气体含量，改善猪舍空气质量。

4 结论

（1）菊糖-枯草芽孢杆菌合生元不但能有效减少断奶仔猪粪便中大肠杆菌的数量，而且能显著提高乳酸杆菌和双歧杆菌的数量，从而有利于维持仔猪肠道微生态平衡和仔猪健康。

（2）菊糖-枯草芽孢杆菌合生元可显著降低断奶仔猪粪便pH，减少猪舍内氨气浓度，从而改善猪舍空气质量。