莲须化学成分的研究

李 玥，吴 弢

（上海中医药大学中药研究所，上海 201203）

莲须又名“金樱草”，来源于睡莲科莲属植物莲NelmbonuciferaGaertn.的干燥雄蕊，野生或栽培在池塘或水田内，广泛分布于我国南北各省［1］，其味甘、涩，性平，归心、肾经，具有固肾涩精的功效［2-3］。《本草纲目》 记载：“莲须清心通肾、固精气、乌须发、悦颜色、益血、止血崩、吐血”［4］。目前，已从莲须中分离、纯化、鉴定出黄酮类、三萜类、甾醇、生物碱等八十余个化合物；药理研究表明其具有抗炎、抗腹泻、抗氧化、降血脂、雌激素等作用［5］。莲须含有丰富天然色素和黄酮类化合物，常被制成健康茶和功能性食品添加剂使用［6］。2020 年版《中国药典》 一部“莲须”项下收录了来源、性状、粉末鉴别、性味与归经、功能与主治、用法与用量、贮藏、薄层鉴别，无含量测定项。为提升莲须质量标准，寻找其指标成分，本研究对莲须甲醇浸提物的乙酸乙酯部位进行研究，首次从莲属植物中分离得到化合物2、4 ～15，首次从植物莲中分离得到化合物16。

1 材料

LC-3000 液相色谱仪（上海仪电分析仪器有限公司）； Bruker AVANCE III 400 MHz／600 MHz 核磁共振波谱仪 （德国Bruker 公司）； GCT Premier Micromass 质谱仪 （美国Waters 公司）； BS-100A自动接收仪（上海沪西分析仪器厂有限公司）；Sepacore 中压制备色谱仪 （瑞士Buchi 公司）；UG120 液相色谱柱（20 mm×250 mm、4.6 mm×150 mm，5 μm，日本曹达株式会社）。

柱硅胶（100 ～200、200 ～300、300 ～400 目，青岛海洋化工厂分厂）； 黄海GF254薄层色谱硅胶板／厚制备板（烟台江友硅胶开发有限公司）； C8 填料（45～60 μm，S-50 μm，日本YMC 公司）； Sephadex LH-20 （美国GE 公司）； 石油醚、乙酸乙酯、二氯甲烷、无水乙醇、95% 乙醇、甲醇、丙酮（分析纯，国药集团化学试剂有限公司）。

20 kg 莲须购自江西省广昌县，由上海中药标准化研究中心吴立宏研究员鉴定为睡莲科植物莲NelmbonuciferaGaertn.的干燥雄蕊，凭证标本保存于上海中医药大学中药研究所标本室 （编号lx161024）。

2 提取与分离

20 kg 莲须用甲醇冷浸提取3 次，每次400 L，合并滤液后，减压干燥，得浸膏1 200 g。水混悬后，用乙酸乙酯萃取4 次，每次3.6 L，减压干燥，得乙酸乙酯浸膏（830 g）、水部位浸膏（280 g）。取乙酸乙酯浸膏750 g，经100 ～200 目硅胶柱分离，以石油醚-乙酸乙酯（1 ∶0 ～0 ∶1）、二氯甲烷-甲醇（1 ∶0 ～0 ∶1）梯度洗脱，合并，减压回收，得到Fr.1～Fr.22。

Fr.12 （15.9 g）经C8 反相中压柱，以甲醇-水（80 ∶20 ～100 ∶0）梯度洗脱，得到Fr.12-1 ～Fr.12-9。Fr.12-3 （1.3 g）经200～300 目硅胶柱分离，以石油醚-乙酸乙酯（1 ∶0 ～0 ∶1）梯度洗脱，得到Fr.12-3-1～Fr.12-3-6。Fr.12-3-2 （17 mg）经制备TLC 分离，以二氯甲烷-甲醇（30 ∶1）洗脱，再经制备HPLC 纯化（检测波长210 nm，体积流量8.0 mL／min），以乙腈-水（90 ∶10）洗脱，得到化合物2 （4 mg，tR＝10 min）、9 （5 mg，tR＝16 min）。Fr.12-3-3 （22 mg）经制备TLC 分离，以二氯甲烷-甲醇（30 ∶1）洗脱，再经制备HPLC 纯化（检测波长210 nm，体积流量8.0 mL／min），以乙腈-水（90 ∶10）洗脱，得到化合物12 （5 mg，tR＝13 min）、14 （4 mg，tR＝18 min）。Fr.12-3-4（117 mg）经Sephadex LH-20 分离，以石油醚-二氯甲烷-甲醇（5 ∶5 ∶1）洗脱，得到Fr.12-3-4-1 ～Fr.12-3-4-2。Fr.12-3-4-1 经制备HPLC 纯化（检测波长210 nm，体积流量8.0 mL／min），以乙腈-水（92 ∶8）洗脱，得到化合物1 （6 mg，tR＝8 min）、15 （4 mg，tR＝10 min）。Fr.12-3-4-2 制备HPLC 纯化（检测波长210 nm，体积流量8.0 mL／min），以乙腈-水（89 ∶11）洗脱，得到化合物4 （8 mg，tR＝21 min）、7 （4 mg，tR＝15 min）。Fr.12-3-6（45 mg）经制备TLC 分离，以二氯甲烷-甲醇（30 ∶1）洗脱，再经制备HPLC 纯化（检测波长210 nm，体积流量8.0 mL／min），以乙腈-水（90 ∶10）洗脱，得到化合物8 （6 mg，tR＝19 min），再经制备HPLC 纯化（检测波长254 nm，体积流量8.0 mL／min），以乙腈-水（85 ∶15）洗脱，得到19 （4 mg，tR＝12 min）、21 （4 mg，tR＝7 min）。

Fr.17 （56.6 g）经200 ～300 目硅胶柱分离，以石油醚-二氯甲烷（2 ∶1 ～0 ∶1）、二氯甲烷-甲醇（1 ∶0～0 ∶1）梯度洗脱，得到Fr.17-1～Fr.17-7。Fr.17-3 （2 g）经C8 反相中压柱分离，以甲醇-水（70 ∶30～100 ∶0）梯度洗脱，得到Fr.17-3-1～Fr.17-3-5，其中90% 甲醇洗脱液中析出无色针状结晶，得到化合物17 （15 mg）。Fr.17-3-1 （107 mg）经300 ～400 目硅胶柱，以石油醚-乙酸乙酯（5 ∶1）洗脱，再经制备TLC 分离，以石油醚-乙酸乙酯（2 ∶1）洗脱，得到化合物3 （6 mg）、10（6 mg）、11 （13 mg）。Fr.17-3-3 （360 mg）经Sephadex LH-20 分离，以二氯甲烷-甲醇（1 ∶1）洗脱，得到Fr.17-3-3-1 ～Fr.17-3-3-2。Fr.17-3-3-1（305 mg）经制备HPLC 纯化（检测波长254 nm，体积流量8.0 mL／min），以乙腈-水（85 ∶15）洗脱，得到化合物5 （5 mg，tR＝13 min）、6 （4 mg，tR＝12 min）。Fr.17-3-3-2 （10 mg）经TLC 制备，以二氯甲烷-甲醇（25 ∶1）洗脱，得到化合物20（2 mg）。Fr.17-3-4 （56 mg）经200～300 目硅胶柱分离，以二氯甲烷-甲醇（1 ∶0 ～0 ∶1）梯度洗脱，得到Fr.17-3-4-1 ～Fr.17-3-4-3。Fr.17-3-4-2 （30 mg）经制备TLC 纯化，以二氯甲烷-甲醇（25 ∶1）洗脱，再经制备HPLC 纯化（检测波长254 nm，体积流量8.0 mL／min），以乙腈-水（87 ∶13）洗脱，得到化合物18 （5 mg，tR＝19 min），再经制备HPLC 纯化（检测波长210 nm，体积流量8.0 mL／min），以乙腈-水（90 ∶10）洗脱，得到化合物13 （3 mg，tR＝17 min）。Fr.17-3-5 （33 mg）经Sephadex LH-20 分离，以石油醚-二氯甲烷-甲醇（5 ∶5 ∶1）分离，再经制备TLC 纯化，以石油醚-乙酸乙酯（2 ∶1）洗脱，得到化合物16 （4 mg）。

3 结构鉴定

化合物1：白色粉末，ESI-MSm／z：465.5［M＋Na］＋，分子式C30H50O2，不饱和度6。1H-NMR（400 MHz，CDCl3）δ：5.17 （1H，t，J＝3.5 Hz，H-12），3.53 （1H，d，J＝11.0 Hz，H-28b），3.20 （2H，dd，J＝11.0，4.5 Hz，H-28a），1.14（3H，s，H-27），0.97 （3H，s，H-26），0.91（6H，d，J＝4.0 Hz，H-23，25），0.86 （6H，m，H-29～30），0.77 （3H，d，J＝3.8 Hz，H-24）；13C-NMR （100 MHz，CDCl3）δ：38.7 （C-1），27.4 （C-2），79.2 （C-3），38.9 （C-4），55.3（C-5），18.5 （C-6），32.7 （C-7），39.9 （C-8），47.7 （C-9），37.1 （C-10），23.7 （C-11），122.5（C-12），144.3 （C-13），41.9 （C-14），25.7 （C-15），22.1 （C-16），37.1 （C-17），42.5 （C-18），46.6 （C-19），31.1 （C-20），34.2 （C-21），31.2（C-22），28.2 （C-23），15.7 （C-24 ～25），16.9（C-26），26.1 （C-27），69.9 （C-28），33.3 （C-29），23.7 （C-30）。以上数据与文献［7］报道基本一致，故鉴定为高根二醇。

化合物2：白色粉末，ESI-MSm／z：485.5［M＋H］＋，分子式C32H52O3，不饱和度7。1H-NMR（400 MHz，CDCl3）δ：5.20 （1H，t，J＝3.5 Hz，H-12），4.03 （1H，d，J＝11.0 Hz，H-3），3.70（1H，d，J＝11.0 Hz，H-28b），3.22 （1H，dd，J＝11.2，4.7 Hz，H-28a），1.16 （3H，s，H-27），0.99 （3H，s，H-26），0.94 （3H，s，H-25），0.92 （3H，s，H-23），0.88 （6H，d，J＝11.0 Hz，H-24，29），0.78 （3H，s，H-30）；13CNMR （100 MHz，CDCl3）δ：39.0 （C-1），25.8（C-2），79.2 （C-3），38.8 （C-4），55.4 （C-5），18.5 （C-6），32.8 （C-7），40.0 （C-8），47.8（C-9），36.0 （C-10），23.0 （C-11），123.1 （C-12），143.8 （C-13），41.9 （C-14），26.2 （C-15），22.5 （C-16），37.1 （C-17），42.8 （C-18），46.5 （C-19），31.1 （C-20），34.2 （C-21），31.6（C-22），28.3 （C-23），15.8 （C-24），15.7 （C-25），16.9 （C-26），27.5 （C-27），71.0 （C-28），33.4 （ C-29），23.8 （ C-30），171.6 （ C-1′），21.2 （C-2′）。以上数据与文献［8］报道基本一致，故鉴定为高根二醇-3-醋酸酯。

化合物3：白色粉末，ESI-MSm／z：471.3［M-H］-，分子式C30H48O4，不饱和度7。1H-NMR（400 MHz，CD3OD）δ：5.28 （1H，t，J＝3.4 Hz，H-12），3.65 （1H，m，H-2），2.94 （1H，d，J＝9.6 Hz，H-3），2.89 （1H，dd，J＝13.8，4.0 Hz，H-18），1.20 （3H，s，H-27），1.04 （6H，m，H-23，26），0.98 （3H，s，H-25），0.94 （3H，s，H-29），0.84 （6H，m，H-24，30）；13C-NMR（100 MHz，CD3OD）δ：47.6 （C-1），69.5 （C-2），84.5 （C-3），40.6 （C-4），56.7 （C-5），19.6 （C-6），33.8 （C-7），40.5 （C-8），49.7（C-9），39.3 （C-10），24.6 （C-11），123.4 （C-12），145.4 （C-13），42.9 （C-14），28.8 （C-15），24.1 （C-16），48.1 （C-17），42.7 （C-18），47.3 （C-19），31.6 （C-20），34.9 （C-21），33.6（C-22），29.3 （C-23），17.1 （C-24），17.5 （C-25），17.8 （C-26），26.4 （C-27），182.0 （C-28），33.9 （C-29），24.0 （C-30）。以上数据与文献［9］报道基本一致，故鉴定为2α-羟基齐墩果酸。

化合物4：白色粉末，ESI-MSm／z：455.7［M-H］-，分子式C30H48O3，不饱和度7。1H-NMR（400 MHz，CDCl3）δ：5.28 （1H，t，J＝3.3 Hz，H-12），3.22 （1H，dd，J＝11.0，4.4 Hz，H-3），2.82 （1H，dd，J＝13.1，4.7 Hz，H-18），1.13（3H，s，H-27），0.98 （3H，s，H-23），0.92（3H，s，H-30），0.91 （3H，s，H-25），0.90（3H，s，H-29），0.77 （3H，s，H-24），0.75（3H，s，H-26）；13C-NMR （100 MHz，CDCl3）δ：38.5 （C-1），27.3 （C-2），79.2 （C-3），38.9（C-4），55.4 （C-5），18.4 （C-6），33.2 （C-7），39.4 （C-8），47.8 （C-9），37.2 （C-10），23.7（C-11），122.8 （C-12），143.7 （C-13），41.8（C-14），27.8 （C-15），23.1 （C-16），46.7 （C-17），41.1 （C-18），46.0 （C-19），30.8 （C-20），33.9 （C-21），32.8 （C-22），28.2 （C-23），15.7（C-24），15.5 （C-25），17.3 （C-26），26.1 （C-27），183.0 （C-28），32.6 （C-29），23.5 （C-30）。以上数据与文献［10］报道基本一致，故鉴定为齐墩果酸。

化合物5：白色粉末，ESI-MSm／z：472.4［M-H］-，分子式C30H48O4，不饱和度7。1H-NMR（400 MHz，Pyridine-d6）δ：5.47 （1H，t，J＝3.2 Hz，H-12），4.47 （1H，d，J＝10.9 Hz，H-24a），3.65 （1H，d，J＝10.4 Hz，H-24b），3.29 （1H，dd，J＝13.9，4.3 Hz，H-3），1.54 （3H，s，H-27），1.26 （3H，s，H-29），0.99 （3H，s，H-23），0.97 （3H，s，H-30），0.93 （3H，s，H-26），0.84 （3H，s，H-25）；13C-NMR （100 MHz，Pyridine-d6）δ：39.1 （C-1），28.8 （C-2），80.5（C-3），43.5 （C-4），56.7 （C-5），19.5 （C-6），33.6 （C-7），40.1 （C-8），48.5 （C-9），37.5（C-10），24.4 （C-11），122.8 （C-12），145.2（C-13），42.5 （C-14），28.7 （C-15），24.1 （C-16），47.0 （C-17），42.4 （C-18），46.9 （C-19），31.3 （C-20），34.6 （C-21），33.9 （C-22），24.0（C-23），64.9 （C-24），16.3 （C-25），17.6 （C-26），26.5 （C-27），180.6 （C-28），33.5 （C-29），24.1 （C-30）。以上数据与文献［10］报道基本一致，故鉴定为4-epi-hederagenin。

化合物6：白色粉末，ESI-MSm／z：485.1［M-H］-，分子式C31H50O4，不饱和度7。1H-NMR（400 MHz，Pyridine-d6）δ：5.47 （1H，t，J＝3.3 Hz，H-12），4.47 （1H，d，J＝8.9 Hz，H-24a），3.65 （1H，m，H-24b），3.59 （3H，s，-OCH3），3.30 （1H，m，H-3），1.53 （3H，s，H-27），1.24 （3H，s，H-29），0.99 （3H，s，H-23），0.96 （3H，s，H-30），0.93 （3H，s，H-26），0.84 （ 3H，s，H-25 ）；13C-NMR （ 100 MHz，Pyridine-d6）δ：39.1 （C-1），28.7 （C-2），80.5（C-3），43.5 （C-4），56.7 （C-5），19.5 （C-6），31.3 （C-7），40.1 （C-8），48.5 （C-9），37.5（C-10），24.1 （C-11），122.8 （C-12），145.2（C-13），42.4 （C-14），28.8 （C-15），24.4 （C-16），47.1 （C-17），42.5 （C-18），46.9 （C-19），30.4 （C-20），34.6 （C-21），33.6 （C-22），24.0（C-23），64.9 （C-24），16.4 （C-25），17.6 （C-26），26.5 （C-27），180.6 （C-28），33.9 （C-29），24.1 （C-30），50.0 （-OCH3）。以上数据与文献 ［11］报道基本一致，故鉴定为4-epihederagenin methyl ester。

化合物7：白色粉末，ESI-MSm／z：481.3［M-H］-，分子式C33H54O2，不饱和度7。1H-NMR（600 MHz，Pyridine-d6）δ：4.70 （1H，dd，J＝11.7，4.7 Hz，H-12），3.32 （1H，d，J＝10.5 Hz，H-3），2.07 （1H，m，H-33），1.29 （1H，m，H-27），1.27 （3H，s，H-23），1.02 （3H，s，H-30），1.00 （3H，s，H-24），0.97 （3H，s，H-31），0.91 （3H，s，H-26），0.88 （3H，s，H-25），0.83 （3H，s，H-29）；13C-NMR （150 MHz，Pyridine-d6）δ：40.1 （C-1），24.2 （C-2），81.1（C-3），38.6 （C-4），55.9 （C-5），18.9 （C-6），33.4 （C-7），42.4 （C-8），48.3 （C-9），37.5（C-10），23.3 （C-11），122.8 （C-12），146.0（C-13），42.5 （C-14），28.5 （C-15），28.7 （C-16），32.5 （C-17），47.1 （C-18），46.8 （C-19），31.4 （C-20），34.6 （C-21），38.3 （C-22），17.8（C-23），30.0 （C-24），15.8 （C-25），17.4 （C-26），26.6 （C-27），30.7 （C-28），24.3 （C-29），33.7 （ C-30），30.4 （ C-31），171.0 （ C-1′），21.5 （C-2′）。以上数据与文献［12］报道基本一致，故鉴定为28α-同-β-香树脂醇乙酯。

化合物8：白色粉末，ESI-MSm／z：455.1［M-H］-，分子式C30H48O3，不饱和度7。1H-NMR（400 MHz，CD3OD）δ：4.71 （1H，s，H-29b），4.59 （1H，s，H-29a），3.13 （1H，dd，J＝11.1，5.0 Hz，H-3），1.69 （ 3H，s，H-30），1.01（3H，s，H-27），0.97 （3H，s，H-23），0.95（3H，s，H-26），0.86 （3H，s，H-25），0.75（3H，s，H-24）；13C-NMR （100 MHz，CD3OD）δ：39.7 （C-1），26.9 （C-2），79.7 （C-3），40.0（C-4），56.9 （C-5），19.4 （C-6），33.3 （C-7），41.9 （C-8），52.0 （C-9），38.1 （C-10），22.1（C-11），26.9 （C-12），38.3 （C-13），43.6 （C-14），28.6 （C-15），31.7 （C-16），57.5 （C-17），50.4 （ C-18），49.9 （ C-19），152.0 （ C-20），30.8 （C-21），35.6 （C-22），28.0 （C-23），16.1（C-24），16.7 （C-25），16.6 （C-26），15.1 （C-27），180.0 （C-28），110.2 （C-29），19.5 （C-30）。以上数据与文献［13］报道基本一致，故鉴定为白桦脂酸。

化合物9：白色粉末，ESI-MSm／z：399.2［M-H］-，分子式C27H44O2，不饱和度6。1H-NMR（400 MHz，CDCl3）δ：5.35 （1H，d，J＝5.2 Hz，H-6），3.52 （1H，m，H-3），1.09 （6H，d，J＝6.9 Hz，H-26 ～27），1.00 （3H，s，H-19），0.91（3H，d，J＝6.6 Hz，H-21），0.67 （3H，s，H-18）；13C-NMR （100 MHz，CDCl3）δ：37.4 （C-1），31.8 （C-2），71.9 （C-3），42.4 （C-4），140.9 （C-5），121.8 （C-6），32.0 （C-7，8），50.2 （C-9），36.6 （C-10），21.2 （C-11），39.9（C-12），42.5 （C-13），56.9 （C-14），24.4 （C-15），28.3 （C-16），56.0 （C-17），12.0 （C-18），19.5 （C-19），35.5 （C-20），18.6 （C-21），30.0（C-22），37.4 （C-23），215.7 （C-24），41.0 （C-25），18.5 （C-26 ～27）。以上数据与文献 ［14］报道基本一致，故鉴定为24-ketocholesterol。

化合物10：白色粉末，ESI-MSm／z：429.1［M-H］-，分子式C29H50O2，不饱和度5。1H-NMR（600 MHz，CDCl3）δ：5.31 （1H，s，H-26），3.87 （1H，d，J＝7.9 Hz，H-3），3.57 （1H，ddd，J＝15.7，11.2，4.3 Hz，H-7），1.07 （3H，s，H-19），0.95 （3H，d，J＝6.5 Hz，H-21），0.92～0.82 （9H，m，H-26～27，29），0.72 （3H，s，H-18）；13C-NMR （150 MHz，CDCl3）δ：37.2（C-1），31.8 （C-2），71.7 （C-3），42.0 （C-4），143.7 （C-5），125.7 （C-6），73.6 （C-7），32.1（C-8），48.5 （C-9），36.7 （C-10），21.3 （C-11），39.8 （C-12），41.1 （C-13），55.6 （C-14），26.6 （C-15），28.8 （C-16），56.2 （C-17），12.0（C-18），19.3 （C-19），36.3 （C-20），19.1 （C-21），34.2 （C-22），26.3 （C-23），46.1 （C-24），29.4 （C-25），20.0 （C-26），19.4 （C-27），23.3（C-28），12.2 （C-29）。以上数据与文献［15］报道基本一致，故鉴定为7β-羟基谷甾醇。

化合物11：白色粉末，ESI-MSm／z：429.3［M-H］-，分子式C29H50O2，不饱和度5。1H-NMR（600 MHz，CDCl3）δ：5.58 （1H，dd，J＝5.2，1.5 Hz，H-26），3.83 （ 1H，s，H-3），3.57（1H，ddd，J＝15.8，11.1，4.6 Hz，H-7）1.07（3H，s，H-19），0.97 （3H，s，H-21），0.78 ～0.84 （9H，m，H-26 ～27，29），0.67 （3H，s，H-18）；13C-NMR （150 MHz，CDCl3）δ：37.2 （C-1），31.6 （C-2），71.6 （C-3），42.4 （C-4），146.5 （C-5），124.1 （C-6），65.6 （C-7），37.7（C-8），42.6 （C-9），37.6 （C-10），20.9 （C-11），39.4 （C-12），42.3 （C-13），49.6 （C-14），26.1 （C-15），28.5 （C-16），55.9 （C-17），11.9（C-18），18.5 （C-19），36.3 （C-20），19.0 （C-21），34.2 （C-22），24.5 （C-23），46.1 （C-24），29.3 （C-25），20.0 （C-26），19.2 （C-27），23.3（C-28），12.2 （C-29）。以上数据与文献［15］报道基本一致，故鉴定为7α-羟基谷甾醇。

化合物12：白色粉末，ESI-MSm／z：451.7［M＋Na］＋，分子式C29H48O2，不饱和度6。1H-NMR（400 MHz，CDCl3）δ：6.19 （1H，s，H-6），4.35 （1H，m，H-3），1.20 （3H，s，H-19），0.94 （3H，d，J＝6.5 Hz，H-21），0.85 （9H，m，H-26～27，29 ），0.73 （ 3H，s，H-18 ）；13C-NMR （100 MHz，CDCl3）δ：36.4 （C-1），34.0 （C-2），68.9 （C-3），41.7 （C-4），171.6（C-5），119.8 （C-6），199.6 （C-7），34.3 （C-8），53.9 （C-9），39.2 （C-10），21.2 （C-11），39.6 （C-12），42.6 （C-13），56.1 （C-14），24.3（C-15），28.3 （C-16），55.7 （C-17），12.1 （C-18），18.4 （C-19），36.2 （C-20），18.8 （C-21），34.0 （C-22），26.2 （C-23），46.0 （C-24），29.3（C-25），20.0 （C-26），19.2 （C-27），23.2 （C-28），12.1 （C-29）。以上数据与文献［16］报道基本一致，故鉴定为3β-羟基豆甾-5-烯-7-酮。

化合物13：白色粉末，ESI-MSm／z：443.5［M-H］-，分子式C29H48O3，不饱和度6。1H-NMR（400 MHz，CD3OD）δ：5.42 （1H，m，H-7），5.23 （2H，m，H-22 ～23），3.98 （1H，m，H-3），3.39 （3H，s，-OCH3），3.17 （1H，d，J＝4.8 Hz，H-6），1.06 （3H，d，J＝6.6 Hz，H-21），1.00 （3H，s，H-19），0.96 （3H，d，J＝6.9 Hz，H-28），0.88 （6H，d，J＝7.3 Hz，H-26～27），0.64 （3H，s，H-18）；13C-NMR （100 MHz，CD3OD）δ：33.2 （C-1），31.9 （C-2），68.5 （C-3），40.8 （C-4），77.1 （C-5），84.0（C-6），116.2 （C-7），144.7 （C-8），44.9 （C-9），38.4 （C-10），23.2 （C-11），40.2 （C-12），44.5 （C-13），56.2 （C-14），24.2 （C-15），29.4（C-16），57.5 （C-17），12.9 （C-18），19.0 （C-19），40.9 （C-20），21.8 （C-21），137.2 （C-22），133.4 （C-23），42.0 （C-24），33.8 （C-25），20.6 （C-26），20.2 （C-27），18.4 （C-28），58.4 （C-29）。以上数据与文献［17］报道基本一致，故鉴定为（3β，5α，6β，22E）-6-甲氧基麦角甾烷-7，22-二烯-3，5-二醇。

化合物14：白色粉末，ESI-MSm／z：423.3［M-H］-，分子式C28H40O3，不饱和度9。1H-NMR（400 MHz，CDCl3）δ：6.38 （1H，s，H-4），5.27 ～5.32 （2H，m，H-22 ～23），2.84 （1H，t，J＝9.2 Hz，H-9），2.68 （1H，d，J＝16.8 Hz，H-7a），1.29 （3H，s，H-19），1.11 （3H，d，J＝7.0 Hz，H-21），1.00 （3H，s，H-18），0.94（3H，d，J＝6.8 Hz，H-28），0.85 （6H，dd，J＝8.4 Hz，H-26 ～27）；13C-NMR （100 MHz，CDCl3）δ：39.1 （ C-1），34.6 （ C-2），199.3 （ C-3），126.8 （C-4），156.3 （C-5），200.2 （C-6），41.1（C-7），62.4 （C-8），49.6 （C-9），36.2 （C-10），25.3 （ C-11），38.6 （ C-12），54.2 （ C-13），215.0 （ C-14），38.2 （ C-15），23.4 （ C-16），49.6 （C-17），17.3 （C-18），24.2 （C-19），37.5（C-20），23.8 （C-21），132.6 （C-22），135.4（C-23），43.5 （C-24），33.3 （C-25），19.9 （C-26），20.3 （C-27），17.8 （C-28）。以上数据与文献［18］报道基本一致，故鉴定为dankasterone A。

化合物15：无色油状物，ESI-MSm／z：331.5［M-H］-，分子式C21H32O3，不饱和度6。1H-NMR（400 MHz，CDCl3）δ：5.66 （1H，d，J＝1.8 Hz，H-2），5.28 （1H，dd，J＝15.3，7.6 Hz，H-16），5.19 （1H，dd，J＝15.3，8.3 Hz，H-15），2.67（1H，dd，J＝10.8，5.9 Hz，H-8），2.30 （1H，m，H-13），1.06 （3H，d，J＝6.6 Hz，H-14），0.94 （3H，d，J＝6.8 Hz，H-21），0.86 （6H，t，J＝6.8 Hz，H-19 ～20），0.63 （3H，s，H-12）；13C-NMR （100 MHz，CDCl3）δ：171.0 （C-1），112.5 （C-2），170.7 （C-3），104.9 （C-4），40.3（C-5），35.3 （C-6），49.1 （C-7），50.6 （C-8），21.6 （C-9），29.1 （C-10），55.6 （C-11），11.9（C-12），43.0 （C-13），21.2 （C-14），134.8 （C-15），133.1 （C-16），43.1 （C-17），33.3 （C-18），19.9 （C-19），20.2 （C-20），17.8 （C-21）。以上数据与文献［19］报道基本一致，故鉴定为demethylincisterol A3。

化合物16：白色粉末，ESI-MSm／z：413.1［M＋H］＋，分子式C29H48O，不饱和度6。1H-NMR（400 MHz，CDCl3）δ：5.74 （1H，s，H-6），1.06 （3H，s，H-19），0.94 （3H，d，J＝6.6 Hz，H-21），0.84 （9H，dd，J＝9.2，7.0 Hz，H-26 ～27，29），0.73 （3H，s，H-18）；13C-NMR （100 MHz，CDCl3）δ：35.8 （ C-1），34.0 （ C-2），199.9 （C-3），123.9 （C-4），171.9 （C-5），33.1（C-6），32.2 （C-7），34.1 （C-8），54.0 （C-9），39.8 （C-10），21.2 （C-11），38.7 （C-12），42.5（C-13），56.0 （C-14），24.3 （C-15），28.3 （C-16），56.1 （C-17），12.1 （C-18）17.5 （C-19），36.3 （C-20），18.8 （C-21），35.8 （C-22），26.2（C-23），46.0 （C-24），29.3 （C-25），20.0 （C-26），19.2 （C-27），23.2 （C-28），12.1 （C-29）。以上数据与文献［20］报道基本一致，故鉴定为β-谷甾酮。

化合物17：无色针状结晶（甲醇），ESI-MSm／z：437.2 ［M＋Na］＋，分子式C29H50O，不饱和度5。1H-NMR （400 MHz，C5D5N）δ：5.42 （1H，d，J＝4.7 Hz，H-6），3.84 （1H，m，H-3），1.06（3H，s，H-19），0.99 （3H，t，J＝6.1 Hz，H-21），0.83～0.92 （9H，m，H-26 ～27，29），0.68（3H，s，H-18）；13C-NMR （100 MHz，C5D5N）δ：37.6 （C-1），29.3 （C-2），71.0 （C-3），42.3（C-4），140.8 （C-5），121.0 （C-6），32.0 （C-7），2.3 （C-8），50.5 （C-9），36.7 （C-10），21.2 （C-11），39.8 （C-12），46.0 （C-13），56.7（C-14），24.3 （C-15），28.4 （C-16），56.1 （C-17），11.8 （C-18），19.4 （C-19），43.3 （C-20），19.8 （C-21），34.0 （C-22），26.2 （C-23），51.1（C-24），34.0 （C-25），19.0 （C-26），23.2 （C-27），24.3 （C-28），12.0 （C-29）。以上数据与文献［20］报道基本一致，故鉴定为β-谷甾醇。

化合物18：黄色粉末，ESI-MSm／z：301.7［M-H］-，分子式C15H10O7，不饱和度11。1H-NMR（400 MHz，CD3OD）δ：7.75 （1H，d，J＝2.1 Hz，H-2′），7.65 （1H，dd，J＝8.5，2.2 Hz，H-6′），6.90 （1H，d，J＝8.5 Hz，H-5′），6.41（1H，d，J＝2.1 Hz，H-6），6.20 （1H，d，J＝2.1 Hz，H-8）；13C-NMR （100 MHz，CD3OD）δ：147.4 （ C-2），135.8 （ C-3），175.9 （ C-4），161.1 （C-5），97.8 （C-6），164.1 （C-7），93.0（C-8），156.8 （C-9），103.1 （C-10），121.7 （C-1′），114.6 （C-2′），144.8 （C-3′），146.7 （C-4′），114.8 （C-5′），120.3 （C-6′）。以上数据与文献［21］报道基本一致，故鉴定为槲皮素。

化合物19：黄色粉末，ESI-MSm／z：315.4［M-H］-，分子式C16H12O7，不饱和度11。1H-NMR（400 MHz，C5D5N）δ：8.31 （1H，d，J＝2.0 Hz，H-6′），8.21 （1H，dd，J＝8.5，2.1 Hz，H-2′），7.38 （1H，d，J＝8.5 Hz，H-5′），6.88 （1H，d，J＝2.1 Hz，H-8），6.77 （1H，d，J＝2.1 Hz，H-6），3.89 （3H，s，-OCH3）；13C-NMR （100 MHz，C5D5N）δ：148.2 （C-2），137.7 （C-3），177.0（C-4），157.2 （C-5），99.0 （C-6），165.3 （C-7），94.2 （C-8），162.2 （C-9），104.2 （C-10），122.7 （ C-1′），116.4 （ C-2′），147.3 （ C-3′），149.0 （ C-4′），112.4 （ C-5′），122.6 （ C-6′），55.7 （-OCH3）。以上数据与文献［21］报道基本一致，故鉴定为异鼠李素。

化合物20：黄色粉末，ESI-MSm／z：285.2［M-H］-，分子式C15H10O6，不饱和度11。1H-NMR（400 MHz，CD3OD）δ：8.03 ～8.13 （2H，m，H-2′，6′），6.95 ～6.84 （2H，m，H-3′，5′），6.38（1H，d，J＝2.1 Hz，H-8），6.16 （1H，d，J＝2.1 Hz，H-6）；13C-NMR （100 MHz，CD3OD）δ：148.1 （ C-2），137.2 （ C-3），177.4 （ C-4），162.6 （C-5），99.3 （C-6），165.6 （C-7），94.5（C-8），158.3 （C-9），104.6 （C-10），123.7 （C-1′），130.7 （ C-2′，6′），116.3 （ C-3′，5′），160.6 （C-4′）。以上数据与文献［22］报道基本一致，故鉴定为山柰酚。

化合物21：黄色粉末，ESI-MSm／z：285.3［M-H］-，分子式C15H10O6，不饱和度11。1H-NMR（400 MHz，CD3OD）δ：7.29 ～7.38 （2H，m，H-2′，6′），6.85 （1H，m，H-5′），6.46 （1H，s，H-3），6.33 （1H，d，J＝2.1 Hz，H-8），6.11（1H，d，J＝2.0 Hz，H-6）；13C-NMR （100 MHz，CD3OD）δ：166.1 （C-2），103.4 （C-3），183.5（C-4），159.6 （C-5），101.1 （C-6），169.2 （C-7），95.8 （C-8），163.0 （C-9），104.4 （C-10），123.5 （ C-1′），113.9 （ C-2′），147.2 （ C-3′），151.5 （C-4′），116.8 （C-5′），120.2 （C-6′）。以上数据与文献［23］报道基本一致，故鉴定为木犀草素。

4 讨论

从莲须乙酸乙酯部位分离出21 个化合物，其中化合物1 ～8 均为五环三萜类，具有丰富的药理活性。化合物9～17 为甾体类，这类化合物在抗前列腺炎以及预防前列腺癌、卵巢癌方面有良好活性［24］，本研究为莲须在抗炎、固肾、雌激素作用等方面的药效物质基础研究提供了理论依据。结合甾体类成分在抗炎、抗肿瘤、降胆固醇［25］等方面的研究，提示选择此类成分作为莲须的指标成分具有一定的科学依据。后续应逐个进行单体成分的相关生物活性验证。

莲须乙酸乙酯部位极性小且成分十分复杂，分离难度大，采用C8 中压柱、TLC、HPLC 结合的手段对该部分获得了良好的分离效果，为莲须质量标准的完善以及药材进一步研究开发提供了参考依据。前人研究报道黄酮类为莲须的主要成分，本研究仅分离得到4 个。而黄酮类成分具有抑菌、调节血脂、抗病毒等活性［26］，课题组通过TLC、HPLC等手段推测在莲须的水萃取部位可能有大量的黄酮苷类成分，而对此部位化学成分研究尚不充足，因此，莲须物质基础的研究还需继续探索。

5 结论

本研究从莲须中分离得到21 个化合物，包括三萜、甾体、黄酮这3 类化合物。三萜类包含7 个齐墩果烷型、1 个羽扇豆烷型，甾体类有4 个谷甾、2 个麦角甾、1 个胆甾、1 个豆甾、1 个C21甾体。化合物2、4～15 为首次在莲属中分离得到，其中羽扇豆烷型三萜首次在莲属中分离得到，丰富了莲属的化合物种类，为莲须及莲属的进一步研究提供物质基础研究的理论依据。