牛传染性鼻气管炎的诊断及防控

袁晓娟，杨胜红

贵州省黔东南州动物疫病预防控制中心，贵州凯里 556000

0 引言

牛传染性鼻气管炎（Infectious Bovine Rhinotracheitis，IBR）是一种由牛传染性鼻气管炎病毒（牛疱疹病毒I型）引起的传染病。世界动物卫生组织（OIE）将IBR列为必须通报的动物疫病；我国农业农村部将此病列为二类疫病。IBR病毒（IBRV）可以侵入牛体内潜伏，导致病牛长期带毒，带来危害非常大。IBR的防控需要大量的精力，给当地畜牧兽医部门带来很大的挑战和困难。IBR最初在西方国家被发现，我国是在1980年在进口奶牛中首次发现，其后在我国的病奶牛、水牛病料中也分离出来了IBRV。从我国学者对国内11个省市部分牛场IBRV血清学调查结果看，IBR在我国牧区、半牧区省份的流行已成为十分普遍现象，在贵州9个市（州）11 县28个牛场均有不同程度的IBRV感染[1]，因此对IBR的相关研究综述显得尤为重要，可以为兽医同行快速诊断及防控该病提供参考。

1 病原学及流行病学

1.1 病原学

IBRV属疱疹病毒科、疱疹病毒亚科甲、水痘病毒属，是直径130~180 nm的球形双股DNA病毒。IBRV在多种牛源细胞（如肾、胚胎、皮肤等）上做细胞培养生长良好，并可产生病变，细胞聚集后出现巨核细胞体，染色后发现有嗜酸性核内包涵体[2]。IBRV只有1个血清型。IBRV的结构蛋白中主要有4 种糖蛋白（gB、gC、gD和gE）负责病毒的吸附、渗透和病毒在细胞之间的扩散，同时也是刺激宿主免疫应答的主要抗原蛋白[3]。

1.2 流行病学

IBRV主要感染牛（如肉用牛、奶牛），各种年龄阶段均可感染，也能感染山羊、猪和鹿等。病牛和带毒牛是主要的传染源，特别是病牛呼吸道带毒分泌物可通过飞沫、交配、接触、空气、媒介物等传播，在一定环境条件下，IBRV可以经空气传播3.85 m的距离[4]。IBRV潜伏期一般在3~7 天，最长可达3 周。IBR在秋季和冬季较为多发，特别是在饲养管理较差、牛群饲养密度较大、应激因素、其他病原体感染的情况下，都会加速IBRV的传播。IBRV的牛群发病率受环境等综合因素影响。由于IBRV传播性强，截至目前，我国各地牛群中都检测到了IBRV抗体。我国自首次分离到IBRV后，IBR的流行一直呈上升趋势，之后我国学者对国内地区的调查结果进一步证明该病在我国已广泛存在[5]。目前芬兰等国家已彻底清除了IBRV。我国应借鉴国外控制疫病的方法，结合本国的国情以及地区的流行特点，消灭该病，以促进养牛业的持续健康发展。

2 临床症状

IBRV在临床上可引起多种病症，症状轻重差别很大，主要以呼吸道感染症状为主，表现为呼吸困难，常常张口呼吸，鼻黏膜发炎肿胀（图1）；母牛患病表现为脓疱性外阴阴道炎，产奶量下降，引起乳房炎、流产等；公牛患病则表现为发热、龟头炎等。另外，病牛还可表现出眼结膜炎、肠炎、脑膜炎（常见犊牛）等临床症状。

图1 病牛张口呼吸，鼻黏膜发炎肿胀

3 诊断方法

3.1 血清学诊断

血清学检测包括琼脂免疫扩散试验、病毒中和试验、酶联免疫吸附试验、间接血凝试验等。血清学检测的优点是操作容易、物廉，适合于大面积基础血清学调查。间接免疫荧光抗体试验可用于微量血清样品的检测，与中和试验相比灵敏度更高。ELISA检测方法具有多种优点，大量学者对其均有研究，李伟等[6]用IBRV gB蛋白作为诊断抗原建立的间接ELISA诊断方法，与进口诊断试剂盒比较，该诊断方法具有良好的特异性和灵敏性，可用来区别疫苗毒株及野毒株诱导产生的抗体。马辉[7]、董华兴等[8]分别建立的双抗体夹心ELISA、间接ELISA方法来检测IBRV，后者与病毒中和试验、全病毒ELISA方法的检测结果符合率分别为87.5%、92.5%，该方法为基层检查提供了便利。张帆[9]对我国IBR的流行情况做了Meta分析并建立了gE间接ELISA方法，可用于奶牛场中IBRV的流行病学调查。

3.2 病原学诊断

在PCR技术建立方面，学者更倾向于研究与IBRV同属病毒的鉴定，王冰等[10]建立了一种既能检测IBRV、又能区分同属病毒（牛疱疹病毒5型、伪狂犬病病毒）的PCR技术；魏宇等[11]建立了一种同时检测牛病毒性腹泻病毒（BVDV）和牛冠状病毒（BCoV）2 种病原的双重纳米RT-PCR方法，可适用于大批量临床样品检测，结果表明，此方法对IBRV、牛呼吸道合胞体病毒（BRSV）、牛副流感病毒3型（BPIV3）和牛轮状病毒（BRV）均无交叉反应，特异性良好。此外，敏感性试验结果为常规RT-PCR敏感性的10 倍，最低检出限为1 fg。Marley等[12]建立的复式荧光定PCR（qPCR），在检测IBRV的同时也能鉴定BVDV-1型和BVDV-2型；孔繁德等[13]为满足同时对IBRV和赤羽病病毒（AKAV）进行快速诊断的需要，建立了多重PCR方法，该方法的建立对于加强进出口牛IBRV和AKAV的检验检疫有重大意义。此外，范晴等[14]利用特异性LAMP引物标记荧光基团扩增建立了一种用于检测牛支原体（Mycoplasma Bovis，MB）和IBRV的二重荧光LAMP检测方法，检测敏感度达100 拷贝/μL，与OIE推荐的荧光定量PCR检测方法相比，此二重LAMP方法敏感性为94.4%~96.6%，特异性为100%，能同时检测大量样本，可用于MB和IBRV的临床检测和流行病学调查。

4 疫苗研究

接种疫苗是防控该病的重要手段。IBR的疫苗主要包括弱毒疫苗、灭活疫苗、亚单位疫苗。由于常规疫苗的种种缺点，不少学者开始研究新型疫苗，基因缺失疫苗的优点是病毒毒力不易返强，免疫原性好且安全性能高，可用于免疫和野毒感染动物的鉴别。为了获得具有良好抗原性的IBRV重组gE蛋白，杨木娇等[15]采用PCR方法得到的重组gE蛋白，经试验证明具有较强的反应原性以及良好免疫原性，为gE基因缺失疫苗免疫牛与自然感染牛的鉴别诊断提供了物质基础。Zhang等[16]开发了IBR的一种新的疫苗，利用牛疱疹病毒-1（BoHV-1）的突变体，通过同源重组删除基因的糖蛋白G（GG）和胸苷激酶（TK）构成，所以BoHV-1的gG（-）/TK（-）可能是IBR标记疫苗的一个发展方向。

郭利等[17]为试验IBR的致弱疫苗（LNM株）的安全性及其免疫效果，结果显示，3月龄牛接种该弱毒株后，无异常。对免疫牛进行的攻毒试验结果显示，IBR弱毒疫苗免疫可有效地保护牛抵抗强毒株的攻毒，免疫保护期持续12个月。冷雪等[18]将毒株灭活与佐剂混合乳化制成IBR灭活疫苗，接种于普通牛和母牛，无异常表现，疫苗接种牛对强毒攻击的保护率达80%以上，说明该疫苗安全性高且免疫保护效果良好。

5 防控措施

采取综合措施是预防IBR的最佳选择，首先对出入境牛只进行严格检疫，严禁从疫区引进种牛，种牛引进应按照相关政策程序执行；其次要加强饲养管理和改善卫生条件，注意消毒、养殖密度、通风、保温等措施，定期进行检疫；最后制定合理的免疫程序，一旦发现可疑病例，立即采取隔离、封锁和消毒等措施，对所有牛群进行紧急注射疫苗，以提高牛群免疫力。

对于IBR，目前没有特效药。为防止得病牛只发生其他继发性感染，可采取抗生素药物对症治疗，若牛发热，在体温下降不明显的情况下可以肌内注射氨基比林，可结合中医治疗方法，采用柴胡、牛蒡子等帮助退热，同时服用板蓝根、连翘、升麻、桔梗等提高机体免疫机能。继发感染时，用400 万单位青霉素、100 万单位链霉素各2 支肌内注射，1 天1 次，连用3 天[19]。

6 小结

随着我国养殖业的日益发展，IBRV传播的风险也越来越大，采用有效可靠的检测方法确诊阳性牛并予以扑杀是目前根除IBR的方法。对于IBRV的流行应提高警惕，开展一切防控计划和措施，重中之重是研发出安全有效低廉的疫苗。另外，科学的饲养管理和严格落实检疫制度对防控该病也很重要。相信随着科学技术的发展和人们对该病的不断研究，人类有望最终可以控制并消灭IBRV。