双环醇片联合恩替卡韦对慢性乙型肝炎患者血清P-选择素及细胞间黏附分子-1表达的影响

万品文 万 春△ 闪海霞

1.南阳市中心医院肝脏普外科 (河南 南阳， 473000) 2.南阳市中心医院感染肝病科

目前全世界约有2.5亿乙型肝炎病毒(HBV)感染者，大多集中在非洲与东南亚地区，已经成为引起全球范围关注的重大公共卫生问题之一[1]。我国现阶段HBV感染者约有9 000万，其中慢性乙型病毒性肝炎(CHB)患者约占1/3[2]。目前针对CHB尚无根治性方法，其治疗主要是抗HBV，抑制肝细胞变性坏死，从而延缓病情进展，延长患者生存期[3]。双环醇片是我国独立研制第一个拥有国际知识产权的抗肝炎新药，兼有抗病毒与抗肝细胞损伤两方面作用，且无明显不良反应[4]。在CHB发病过程中，黏附因子(AMs)参与其中并起着重要作用，血清P-选择素(P-selectin)是选择素超家族的一种，可促进单核细胞、血小板、中性粒细胞与内皮细胞的黏附，帮助其到达炎症反应的部位，在此过程中起桥梁作用。血清细胞间黏附分子-1(ICAM-1)是免疫球蛋白超家族的一种,它可与其受体淋巴细胞功能相关抗原-1( LFA-1)相结合，从而介导免疫反应与炎症反应，是导致肝细胞坏死重要机制[5]。P-selectin与ICAM-1均是黏附因子，已经在CHB等多种可引起肝功能异常的肝脏疾病中发现其表达异常[6]。笔者研究双环醇片对CHB患者血清P-selectin与ICAM-1表达的影响。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取我院2018年4月至2019年4月确诊的214例CHB患者，将其按随机数字表法分为对照组和观察组，各107例。对照组患者男68例，女39例；年龄27～61岁，平均(45.37±5.03)岁；病程1.5～14年，平均(7.31±1.52)年。观察组患者男64例，女43例；年龄29～65岁，平均(47.49±5.83)岁；病程1～15年，平均(8.15±2.04)年。两组患者在性别、年龄、病程等方面比较，差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。本研究已通过医院伦理委员会的批准，且患者已知情同意并签字。

1.2 纳入及排除标准 纳入标准：①符合《慢性乙型肝炎诊断标准》[7]；②符合抗HBV治疗的适应证，HBeAg和HBV DNA阳性；③年龄18～65岁。排除标准：①伴有其他类型肝炎者；②其他原因导致肝功能异常者；③3个月内进行过抗HBV治疗者；④妊娠或哺乳期妇女；⑤患有严重的肾脏疾病或全身性疾病者；⑥合并自身免疫性疾病；⑦对研究药物过敏者。

1.3 治疗方法 两组患者均口服恩替卡韦片(博路定，中美上海施贵宝制药有限公司，国药准字H20052237)0.5 mg/次，1次/d，观察组患者加服双环醇片(百赛诺，北京协和药厂，国药准字H20040467)25 mg/次，3次/d，两组患者均治疗6个月。

1.4 观察指标

1.4.1 肝功能 分别在治疗前和治疗6个月结束时，用全自动生化检测仪检测血清肝功能，包括丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、总胆红素(TBil)、白蛋白(Alb)。

1.4.2 HBV DNA转阴率 分别在治疗3个月和治疗6个月结束时，釆用实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)技术测定患者HBV DNA情况，仪器为美国应用生物系统公司生产的Prism 7000型荧光定量仪。

1.4.3 肝纤维化指标 分别在治疗前和治疗6个月结束时，检测患者血清Ⅲ型前胶原(PC-Ⅲ)、层黏连蛋白(LN)、透明质酸酶(HA)水平，试剂盒选自深圳安群生物工程有限责任公司，所有操作严格按试剂盒说明书进行。

1.4.4 血清P-selectin及ICAM-1 分别在治疗前和治疗后6个月结束时，采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定患者血清P-selectin和ICAM-1水平，试剂盒选自上海信帆生物科技有限责任公司，操作严格按试剂盒说明书进行。

1.5 疗效判定标准 治疗6个月结束时，根据患者肝功能与HBV DNA载量结果进行疗效评价。显效：肝功能恢复正常或基本正常，HBV DNA载量<1 000 copses/ml；有效：肝功能明显好转，HBV DNA载量≥1 000 copses/ml，但与治疗前比较下降≥2log10 copses/ml；无效：肝功能未见好转，且HBV DNA载量下降<2log10 copses/ml。有效率=(显效例数+有效例数)/总例数×100%。

2 结果

2.1 两组患者临床疗效比较 见表1。

表1 两组患者临床疗效比较 [n(%)]

2.2 治疗后两组患者HBV DNA 转阴率情况 见表2。

表2 两组患者治疗后HBV DNA转阴例数比较 [n(%)]

2.3 两组患者治疗前后血清P-selectin与ICAM-1水平检测情况 见表3。

表3 两组患者治疗前后P-selectin与ICAM-1结果比较

2.4 两组患者治疗前后肝功能检测结果 见表4。

表4 两组患者治疗前后肝功能结果比较

2.5 两组患者治疗前后肝纤维化指标检查结果 见表5。

表5 两组患者治疗前后纤维化结果比较

3 结论

HBV感染途径有血液传播、医源性传播、母婴垂直传播等[8]。HBV激活宿主产生免疫应答反应，诱发肝脏病理损伤，引起微循环功能障碍，导致肝细胞缺血、缺氧，进而出现继发性肝细胞损伤，最终可形成肝纤维化。因此，采用积极有效的治疗方案显得尤为重要[9]。

双环醇片是我国人工合成用于治疗肝炎的药物，具有清除体内自由基与抗氧化作用，保护肝细胞膜与线粒体，减少肝细胞DNA损伤，降低细胞凋亡，进而发挥保肝作用[10]。除此以外，双环醇还能够加速肝细胞蛋白质的合成，有助于肝细胞再生，抑制肝纤维化。它不但能够提升肝脏解毒功能，还能提高肝脏自我修复能力，从而显著提高机体免疫力[11]。

本研究结果提示双环醇片联合恩替卡韦治疗CHB患者，能够抑制HBV活性，改善肝功能，抑制肝纤维化进展，提高临床疗效。双环醇可有效抑制肝细胞核DNA的裂解与细胞凋亡，保护肝细胞不受HBV的损伤[12]。它能清除体内自由基，维持肝细胞生物膜结构的完整性。当人体感染HBV后可产生包括氧自由基在内的多种炎性细胞因子，损伤肝细胞核与线粒体，导致细胞坏死与凋亡。而双环醇片清除体内自由基的作用正好有助于阻断上述病理过程。双环醇可通过促进肝脏蛋白质合成的方式提高肝细胞修复功能，同时可减少炎症对机体的损伤，进而抑制肝脏纤维化，促进肝功能恢复[13]。董力等[14]研究证明应用双环醇片治疗CHB能减少患者肝脏炎症反应，改善肝功能，降低肝纤维化，取得了较好的临床疗效，与本文研究结果一致。

P-selectin本质是一种颗粒膜蛋白，主要存贮在内皮细胞和血小板内。在正常状态下表达量很少，但是当出现病理因素损伤血小板和内皮细胞时，可导致其表达量增高[15，16 ]。在CHB患者机体内，P-selectin在血小板和内皮细胞上过量表达，与单核细胞、中性粒细胞上的抗原相结合，能够介导白细胞黏附在内皮细胞上，并且滚动、聚集以及活化从而释放炎症介质，参与对肝细胞的损伤。ICAM-1是一种具有多种免疫调节功能的细胞因子，主要是由肝细胞与血管内皮细胞分泌[17]。正常人体中，肝细胞仅可少量表达ICAM-1，其血清水平不高，当肝组织发生炎症反应时，刺激内皮细胞与淋巴细胞产生大量的ICAM-1，致其血清水平上升[18]。ICAM-1有助于T细胞黏附于肝细胞以及识别病毒抗原，从而造成病毒感染的肝细胞炎症损伤。P-selectin和ICAM-1作为黏附因子的重要成员，两者共同参与乙型肝炎的病理过程[19]。HBV感染机体后，肝细胞受损导致机体释放TNF-α、IFN-γ等细胞因子可诱导机体过度表达P-selectin和ICAM1，进而发挥其生物学效应。本研究结果提示双环醇可下调体内TNF-α、IFN-γ等细胞因子水平，从而抑制P-selectin和ICAM-1等黏附分子的转录，降低其血清浓度[12]。

综上所述，采用双环醇片联合恩替卡韦治疗CHB患者，能够明显减轻肝组织炎症反应，改善肝功能，降低肝纤维化程度，提高HBV DNA 转阴率，抑制P-selectin和ICAM-1的过度表达，减少肝脏损伤。