基于“俞募配穴”理论穴位埋线疗法结合常规治疗对溃疡性结肠炎的疗效研究

刘 淼，杜 强，毛 刚，张 帆，周雪雷，万学梅

（成都中医药大学附属医院脾胃病科，四川 成都 610013）

溃疡性结肠炎（ulcerative colitis，UC）是一种影响结肠黏膜的慢性自身免疫性疾病，其发病机制与免疫和感染因素相关，临床表现为持续或反复发作的腹泻、黏液脓血便、腹痛、里急后重和不同程度的全身症状[1]。该病迁延难愈，极易复发，且有癌变倾向，严重影响患者的生活质量[2]。目前，UC的临床治疗主要以氨基水杨酸类制剂、肾上腺皮质激素、免疫调节剂等为主[3]，短期可取得较好的疗效，但停药后复发风险高，安全性差[4]。中医在溃疡性结肠炎的预防与治疗上有着独特的见解与疗效[5]。UC 属于“肠澼”“痢疾”泄泻”等范畴，与肝脾肺肾关系密切[6，7]。埋线疗法可通过穴位线体的持续刺激，将针刺的留针理论与现代物理医学相结合，具有刺激量大、作用持续的优点[8，9]。本研究基于“俞募配穴”理论，将穴位埋线疗法和穴位针刺两种方法治疗大肠湿热型轻-中度活动性UC 的疗效进行比较，以期为UC 的治疗提供参考，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2019 年1 月-2020 年12 月成都中医药大学附属医院收治的大肠湿热型轻-中度活动性UC 患者80 例，年龄24～63 岁，中位年龄42岁。采用随机数字表法将患者分为观察组和对照组，均为40 例。观察组男22 例，女18 例，年龄24～63 岁，平均年龄（40.13±11.87）岁，病程0.5～6.0 年，平均病程（2.69±1.54）年。对照组男23 例，女17 例，年龄26～62 岁，平均年龄（41.53±12.36）岁，病程0.6～4.5年，平均病程（2.36±1.43）年。两组性别、年龄、病程比较，差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。本研究经我院伦理委员会审核通过，患者均知情同意，自愿参加本研究，并签署知情同意书。

1.2 诊断标准 西医诊断参照《中国炎症性肠病诊断治疗规范的共识意见》中溃疡性结肠炎的诊断标准[10]。中医诊断参照《证候类中药新药临床研究技术指导原则》[11]与《溃疡性结肠炎中医诊疗专家共识意见(2017)》[12]溃疡性结肠炎的辨证标准。主症为腹痛，腹泻，便下黏液脓血；次症为肛门灼热，里急后重，身热小便短赤，口干口苦口臭，脉滑数。主症必备，次症2 项以上即可诊断大肠湿热证。

1.3 纳入与排除标准 纳入标准：①符合上述中、西医诊断标准；②年龄18～65 岁；③病情为轻、中度的初发型或慢性复发型活动期患者。排除标准：①溃疡型结肠炎临床缓解期及重度活动患者；②合并有肿瘤、肠道结核、肠梗阻、肠穿孔者；③严重心、肝、肾功能异常者；④过敏体质或对羊肠线材质过敏者；⑤妊娠或哺乳期妇女。

1.4 方法 两组均口服美沙拉嗪肠溶片（葵花药业集团佳木斯鹿灵制药有限公司，国药准字H19980148，规格：0.25 g/片）作为基础治疗，口服1 g/次，3 次/d。

1.4.1 对照组 采用针刺治疗（假埋线组）。取穴大肠俞、脾俞、中脘、天枢，患者侧卧位，铺好洞巾，0.2%碘伏常规消毒，采用一次性医用7 号无菌注射针头作为套管，不放入羊肠线，手持注射针头尾部，将针头刺入穴位，深度达皮下，捻转半周，得气后退针，检查线体有无在体表外露或局部出血，予棉签按压数秒后，各穴予0.2%碘伏再次消毒，输液贴固定2 h。各穴位逐一埋入。每2 周治疗1 次，疗程8 周。

1.4.2 观察组 采用埋线疗法治疗。取穴大肠俞、脾俞、中脘、天枢。其中，大肠俞、脾俞、天枢每次单侧埋线，左右交替进行。患者取侧卧位，铺好洞巾，0.2%碘伏常规消毒，采用一次性医用7 号无菌注射针头作为套管，将3.0 可吸收性外科缝线剪成10 mm线段若干，浸泡在75%乙醇内备用。以消毒后的镊子镊取一段羊肠线，将其2/3 线体置入套管前端，将剩余1/3 裸露线体少许弯折，手持注射针头尾部，将针头刺入穴位，深度达皮下，捻转半周，得气后退针，检查线体有无在体表外露或局部出血，予棉签按压数秒后，各穴予0.2%碘伏再次消毒，输液贴固定2 h。各穴位逐一埋入。每2 周埋线1 次，疗程8 周。

1.5 观察指标 比较两组临床疗效、临床症状评分、电子结肠镜表现、外周血中核转录因子κB（NFκB）、Toll 样受体4（TLR4）蛋白及其mRNA 表达水平。

1.5.1 疗效判定 治愈：中医临床症状、体征基本消失，中医证候评分减少≥90%；显效：中医临床症状、体征明显改善，中医证候评分减少70%～89%；有效：中医临床症状、体征均有好转，中医证候评分减少30%～69%；无效：中医临床症状、体征均无明显改善，甚至加重，中医证候评分减少不足30%。总有效率=（治愈+显效+有效）/总例数×100%。

1.5.2 症状评分变化情况 参照《证候类中药新药临床研究技术指导原则》改良Mayo 评分表总分分级相关内容制订评分标准，主症腹痛、脓血便、腹泻，按照无、轻度、中度、重度分别评为0、2、4、6 分，次症肛门灼热、里急后重、身热小便短赤、口干口苦口臭，按照有、无分别评为1、0 分。症状分级标准：治愈：0分；轻度：2～7 分；中度：7～12 分；重度：≥12 分。

1.5.3 电子结肠镜检查 观察患者病变黏膜在结肠镜下的表现及组织病理表现，包括Sourtherland 疾病活动指数（DAI）评分[13]和结肠镜表现评分。其中DAI是对患者腹泻、便血、内镜下黏膜表现及医师病情评估4 个方面进行综合评估，每项根据轻重程度分别记0、2、4、6 分，评分越高说明病情活动越明显；结肠镜表现评分根据结肠镜下观察病变黏膜的轻重程度[14]，按照正常黏膜、轻度病变、中度病变、重度病变分别记0、2、4、6 分。

1.5.4 外周血NF-κB 及TLR4 mRNA 及蛋白水平检测 分别于治疗前、后抽取患者空腹静脉血4 ml，分为2 份，均置于肝素抗凝管中。其中，一份生理盐水1∶1 稀释，在尖型离心管中按1∶1、1∶2 的比例加入淋巴细胞分离液（Ficoll 液），3000 r/min 离心10 min后收集白膜层，再次离心10 min 后取下层沉淀，加入1 ml 生理盐水，枪头反复吹打将其充分混匀后转移至EP 管中离心10 min，收集细胞沉淀，获得外周血单核细胞（PBMC）。Trizol 法提取总RNA，紫外分光光度计测定RNA 浓度与纯度，然后按照反转录试剂盒说明书步骤操作，完成反转录获取cDNA，实时荧光定量PCR（RT-qPCR）检测NF-κB 和TLR4 mRNA。另一份经密度梯度离心后肝素抗凝后，按1∶6比例加入红细胞裂解液，室温静置5 min，3000 r/min离心10 min，弃上清，抽提出核蛋白，酶联免疫吸附法（ELASA）检测NF-κB 及TLR4 蛋白表达水平。

1.6 统计学方法 采用SPSS 22.0 软件进行统计学分析。计量资料用（±s）表示，组间比较采用独立样本t检验，组内比较采用配对t检验。计数资料采用[n（%）]表示，比较采用χ2检验。P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组临床疗效比较 观察组总有效率高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05），见表1。

表1 两组临床疗效比较[n（%）]

2.2 两组临床症状评分比较 两组腹痛评分、脓便血评分以及腹泻评分均较治疗前降低，且观察组低于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05），见表2。

表2 两组临床症状评分比较（±s，分）

表2 两组临床症状评分比较（±s，分）

注：与治疗前比较，*P＜0.05

2.3 两组电子结肠镜检查评分比较 两组DAI 评分和结肠镜表现评分均较治疗前降低，且观察组低于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05），见表3。

表3 两组电子结肠镜检查评分比较（±s，分）

表3 两组电子结肠镜检查评分比较（±s，分）

注：与治疗前比较，*P＜0.05

2.4 两组外周血NF-κB、TLR4 mRNA 和蛋白相对表达水平比较 两组外周血NF-κB 和TLR4 mRNA 和蛋白相对表达水平均较治疗前降低，且观察组低于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05），见图1。

图1 两组外周血NF-κB、TLR4 mRNA 和蛋白相对表达量水平比较

3 讨论

UC 是由遗传基因易感性、环境、免疫以及心理等多因素参与的肠道炎症性疾病。随着现代生活方式、饮食习惯以及环境的改变，其发病率在世界范围内均呈逐年上升趋势[15]。目前研究普遍认为，机体免疫调节失衡、肠道黏膜的防御保护机制受损，从而导致肠道黏膜损伤，黏膜发生病变，表现为黏膜糜烂及溃疡等损伤，进而导致体内多种信号传导通路及炎症因子被激活[16]。这些活动共同参与了UC 的发生和发展。中医认为，外感湿热邪毒、饮食不节、情志失调等是UC 发生的主要病因。其病位在肠，湿热蕴肠，气血不调，热毒蕴结，络损血溢[17]。目前，UC 的西医治疗短期可取得较好疗效，但复发风险高，安全性差。因此，寻找有效的管理方案对于UC 的治疗非常重要。

本研究显示，观察组总有效率为87.50%，高于对照组的65.00%，提示“俞募配穴”与穴位埋线疗法相结合治疗UC 的效果较好。分析原因，可能与作用位置和时间有关。俞募穴是临床上针灸常用的配穴法之一，募穴多用来治疗六腑病症，背俞穴常反映脏腑功能，背俞穴与腹募穴相配，可诊察和治疗相应脏腑病症。“俞募配穴”与穴位埋线疗法相结合，在利用可吸收线持续刺激穴位的同时，延长了其作用时间，从而使观察组总有效率高于仅使用针刺疗法的对照组[18]。此外，观察组症状改善、DAI 评分和结肠镜表现评分均优于对照组，证明“俞募配穴”穴位埋线疗法可改善UC 患者临床症状和黏膜病变情况。同时，本研究发现，观察组患者外周血TLR4 与NF-κB mRNA 及相应蛋白的相对表达水平均低于对照组。说明穴位埋线可降低机体炎症水平，有助于UC 患者的康复。TLR4/NF-κB 信号通路在炎症信号的传递中发挥着重要作用，能调节机体炎症因子的表达水平，在UC 的发生发展过程中具有重要的作用。Toll 样受体（TLRs）是参与非特异性免疫的一类重要分子，也是连接非特异性免疫和特异性免疫的桥梁，在天然免疫识别以及获得性免疫反应中具有重要价值[19]。研究表明[20]，TLR4 信号传导对结肠炎乃至结肠癌的发生至关重要，抑制TLR4 可对结肠炎的发生起到保护作用。当黏膜受到刺激后，巨噬细胞超活化，TLR4 被过度激活，同时，TLR4 可刺激下游NF-κB 的激活，而NF-κB 是粘膜免疫系统调节的关键分子，可在结肠黏膜损伤部位释放肿瘤坏死因子α (TNF-α)、白细胞介素18（IL-18）、IL-1β 等大量炎症因子，促使肠道局部炎症的发展。因此，抑制TLR4 信号传导可有效调节炎症细胞因子的表达[21]。

综上所述，基于“俞募配穴”的穴位埋线疗法可提高大肠湿热型UC 患者的治疗效果，改善结肠黏膜病变，有效降低患者体内炎症水平，具有良好的临床应用价值。