急性缺血性脑卒中患者基质金属蛋白酶-9、 诱导型一氧化氮合酶、神经元特异性烯醇化酶、 神经导向因子 -1与神经功能缺损及预后的关系

郑亚彬，王 蔚

[南京中医药大学附属南京医院（南京市第二医院）神经内科，江苏 南京 210003]

急性缺血性脑卒中（acute ischemic stroke，AIS）患者临床多表现为共济失调、感觉障碍、偏瘫、失语等神经功能缺损症状，部分患者还会伴有昏迷、呕吐、头痛等症状，若不能得到及时有效的控制和治疗，极易对患者的生命安全造成严重威胁。因此，对AIS患者的病情进行早期诊断，有利于后续治疗方案的制定，及时对病情予以控制，对患者的预后改善具有重要的意义。基质金属蛋白酶-9（MMP-9）属于炎症因子的一种，参与动脉粥样硬化斑块的形成，其水平升高能够诱发脑卒中的发生[1]；诱导型一氧化氮合酶（iNOS）正常生理条件下水平较低，在炎症、神经损伤条件下其表达水平升高，具有神经毒性，可诱导神经元凋亡，从而加重脑损伤[2]；神经元特异性烯醇化酶（NSE）参与大脑神经元和神经内分泌细胞内的糖酵解，体液中NSE含量较低，当中枢神经系统受损时，神经细胞膜的完整性遭到破坏，导致NSE从细胞外进入血液中，其水平可直接反映大脑神经系统的受损程度[3]；神经导向因子-1（Netrin-1）在神经系统中的表达较为广泛，其参与神经元迁移、血管生成和抗凋亡过程，可参与神经系统受损后的功能和结构重建[4]。因此，本研究旨在探讨血清MMP-9、iNOS、NSE、Netrin-1水平与AIS患者神经功能缺损和预后的关系，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料选取2019年1月至2022年2月南京中医药大学附属南京医院（南京市第二医院）收治的81例AIS患者作为研究对象，其中男性52例，女性29例；年龄45～76岁，平均（64.17±6.25）岁；基础疾病：糖尿病29例，高血压35例，冠心病26例，其他7例。同时选取同期健康体检者101例作为对照组，其中男性53例，女性48例；年龄46～78岁，平均（64.23±6.18）岁；基础疾病：糖尿病28例，高血压43例，冠心病28例，其他7例。AIS患者和对照组的一般资料经比较，差异无统计学意义（P＞0.05），组间具有可比性。诊断标准：所有AIS患者参照《临床神经内科疾病诊疗》[5]中关于AIS的诊断标准。纳入标准：符合上述诊断标准者；均属于初次发病者；近3个月内未采用抗凝、抗炎等相关治疗者；肝、肾功能均无异常者等。排除标准：伴有急性感染者；自身免疫性疾病者；合并恶性肿瘤者等。本研究已经南京中医药大学附属南京医院（南京市第二医院）医学伦理委员会批准，且所有患者及家属均知晓并签署知情同意书。

1.2 研究方法

1.2.1 检测方法采集AIS患者入院次日、对照组研究对象受检当天空腹静脉血5 mL，以3 000 r/min的转速离心15 min后分离血清，采用酶联免疫吸附实验法检测血清MMP-9、iNOS、Netrin-1水平，采用电化学发光法检测血清NSE水平。

1.2.2 分组、治疗方法根据入院时美国国立卫生研究院卒中量表（NIHSS）[6]评分情况，将AIS患者分为轻度组（NIHSS评分＜4分，25例）、中度组（NIHSS评分4～15分，30例）和重度组（NIHSS评分＞15分，26例）。AIS患者入院后均接受血糖、血脂和血压调节，抗血小板、营养神经、改善循环及功能锻炼等治疗，采用改良Rankin量表（mRS）[7]评分评估患者的预后情况并将其分为预后良好组（mRS评分0～2分，57例）和预后不良组（mRS评分3～6分，24例）。

1.3 观察指标①对AIS患者与对照组研究对象血清MMP-9、iNOS、NSE、Netrin-1水平进行比较。②对不同神经功能缺损程度AIS患者血清MMP-9、iNOS、NSE、Netrin-1水平进行比较。③对不同预后AIS患者血清MMP-9、iNOS、NSE、Netrin-1水平进行比较。④分析血清MMP-9、iNOS、NSE、Netrin-1水平与NIHSS、mRS评分的关系。

1.4 统计学方法使用SPSS 20.0统计学软件进行数据分析，使用S-W法检验计量资料数据是否服从正态分布，对于符合正态分布的计量资料以(±s)表示，两组间比较采用t检验，3组间比较采用单因素方差分析，以Pearson相关性分析法分析血清MMP-9、iNOS、NSE、Netrin-1水平与神经功能缺损和预后的相关性。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 AIS患者与对照组研究对象血清MMP-9、iNOS、 NSE、Netrin-1水平比较AIS组患者血清MMP-9、iNOS、NSE水平均高于对照组，血清Netrin-1水平低于对照组，差异均有统计学意义（均P＜0.05），见表1。

表1 AIS患者与对照组研究对象血清MMP-9、iNOS、NSE、Netrin-1水平比较( ±s)

表1 AIS患者与对照组研究对象血清MMP-9、iNOS、NSE、Netrin-1水平比较( ±s)

注：AIS：急性缺血性脑卒中；MMP-9：基质金属蛋白酶-9；iNOS：诱导型一氧化氮合酶 ；NSE ：神经元特异性烯醇化酶；Netrin-1：神经导向因子-1。

组别 例数 MMP-9(μg/L) iNOS(U/mL) NSE(ng/mL) Netrin-1(pg/mL)对照组 101 214.12±37.74 14.34±2.56 3.46±0.45 487.74±67.36 AIS组 81 325.78±43.62 28.97±3.38 38.99±4.74 226.11±35.22 t值 18.503 33.220 74.962 31.647 P值 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05

2.2 不同神经功能缺损程度AIS患者血清MMP-9、iNOS、 NSE、Netrin-1水平比较与轻度组比，中度组、重度组患者血清MMP-9、iNOS、NSE水平均呈升高趋势，血清Netrin-1水平呈降低趋势，且组间两两比较，差异均有统计学意义（均P＜0.05），见表2。

表2 不同神经功能缺损程度AIS患者血清MMP-9、iNOS、NSE、Netrin-1水平比较( ±s)

表2 不同神经功能缺损程度AIS患者血清MMP-9、iNOS、NSE、Netrin-1水平比较( ±s)

注：与轻度组比，*P＜0.05，与中度组比，#P＜0.05。

组别 例数 MMP-9(μg/L) iNOS(U/mL) NSE(ng/mL) Netrin-1(pg/mL)轻度组 25 257.96±37.48 25.46±3.57 10.35±2.67 327.12±45.74中度组 30 335.47±42.59* 29.47±3.24* 25.64±3.58* 234.58±36.80*重度组 26 412.63±58.61*# 32.58±3.73*# 51.37±6.94*# 143.52±19.61*#F值 69.063 26.410 492.115 169.086 P值 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05

2.3 不同预后AIS患者血清MMP-9、iNOS、NSE、 Netrin-1水平比较预后不良组患者血清MMP-9、iNOS、NSE水平均高于预后良好组，血清Netrin-1水平低于预后良好组，差异均有统计学意义（均P＜0.05），见表3。

表3 不同预后AIS患者血清MMP-9、iNOS、NSE、Netrin-1水平比较( ±s)

表3 不同预后AIS患者血清MMP-9、iNOS、NSE、Netrin-1水平比较( ±s)

组别 例数 MMP-9(μg/L) iNOS(U/mL) NSE(ng/mL) Netrin-1(pg/mL)预后良好组 57 273.25±30.41 21.36±3.53 18.97±3.85 289.77±35.36预后不良组 24 375.48±33.54 33.94±3.32 45.41±4.22 174.14±21.18 t值 13.400 14.898 27.430 14.901 P值 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05

2.4 血清MMP-9、iNOS、NSE、Netrin-1水平与神经功能缺损和预后的关系经Pearson相关系数分析，血清MMP-9、iNOS、NSE水平与NIHSS、mRS评分呈正相关，血清Netrin-1与NIHSS、mRS评分呈负相关，差异均有统计学意义（均P＜0.05），见表4。

表4 血清MMP-9、iNOS、NSE、Netrin-1水平 与神经功能缺损和预后的关系

3 讨论

AIS具有较高的发病率、致残率和致死率，且超过一半以上的存活患者均存在不同程度的后遗症，严重影响患者的身心健康和生活质量，且给患者家庭带来较大的经济负担[8]。因此，尽早对患者的病情和预后状况作出准确的评估，可为临床治疗提供较好的指导，及时有效地控制病情进展，促进患者预后的改善。

MMP-9主要由血管内皮细胞和吞噬细胞等合成和分泌，其含量增高后可加重炎症反应，破坏脑血管基底膜，严重者可导致脑水肿的发生[9]。iNOS、NSE主要参与脑组织的继发性损伤过程，与神经细胞的凋亡过程具有同步的规律。有研究显示，Netrin-1的高表达可降低脑梗死面积，其血清含量与神经功能密切相关，可促进神经行为的转归[10]。NIHSS评分是临床评估脑卒中患者神经功能缺损情况的重要指标；mRS评分常用来反映脑卒中患者预后改善情况。本研究结果显示，AIS组患者血清 MMP-9、iNOS、NSE水平均高于对照组，血清Netrin-1水平低于对照组；与轻度组比，中度组、重度组患者血清MMP-9、iNOS、NSE水平呈升高趋势，血清Netrin-1水平呈降低趋势，表明AIS患者的血清MMP-9、iNOS、NSE水平越高，血清Netrin-1水平越低，其神经功能缺损程度越严重，其可作为预测评估AIS患者严重程度的指标，与沈杰等[11]研究结果一致。AIS患者的脑组织受到严重损伤，血流量显著下降，致使溃破的斑块加重了机体的炎症反应，进而导致MMP-9因子大量释放至血液中，其含量明显升高，进一步对血脑屏障造成损伤，加重神经功能缺损[12]。AIS患者发病后，其脑组织神经元受到严重的损伤，致使iNOS、NSE因子大量分泌和释放，血清含量明显升高[13]。Netrin-1具有调节血管生成和轴突导向的作用，在神经功能受损时其水平显著降低，致使神经元再生功能受到抑制，加重病情[14]。本研究结果显示，预后不良组患者血清MMP-9、iNOS、NSE水平均高于预后良好组，血清Netrin-1水平低于预后良好组；经Pearson相关系数分析，血清MMP-9、iNOS、NSE水平与NIHSS、mRS评分成正相关，血清Netrin-1与NIHSS、mRS评分呈负相关，表明AIS患者血清MMP-9、iNOS、NSE、Netrin-1水平与神经功能缺损、预后具有一定的相关性，可作为对患者预后的预测评估指标。血清MMP-9含量较高表明机体炎症反应较为严重，会促进患者动脉粥样硬化的破裂，逐渐增大梗死面积，另外iNOS、NSE通常参与脑损伤疾病的病情进展，其含量较高可增加脑梗死面积，影响患者的预后；Netrin-1血清含量升高可有助于血管灌注和神经元再生，减少神经元凋亡和减轻缺血再灌注造成的损伤，进而改善 预后。

综上，AIS患者的血清MMP-9、iNOS、NSE水平越高，血清Netrin-1水平越低，其神经功能缺损程度越严重，预后越差，对以上指标进行检测可对患者的病情进行判断，为临床后续治疗提供一定的参考依据，并可作为对预后情况的预测指标，值得临床进一步推广应用。