离子色谱法测定畜禽肉中氯化物的含量

孙雪萍

（盱眙县综合检验检测中心，江苏淮安 211700）

氯是一种非金属元素，在自然界中通常以氯化物形式存在[1]。氯离子参与维持人和动物正常的生理状态[2]。但是人体不能靠自身合成氯，只能通过外界摄入来补充。氯离子的主要摄入来源是食用盐，也就是氯化钠[3]。而高钠盐摄入已被证明是引起高血压和心血管疾病的重要诱因。在我国，畜禽肉是居民餐桌上最普遍的食材，但在有些畜禽肉或肉制品中氯的含量较多，而过量的氯的摄入可能会对人的健康造成不利影响，因此检测畜禽肉中氯化物的含量并加以控制显得尤为重要。

《食品安全国家标准 食品中氯化物的测定》 （GB 5009.44—2016）中，测定畜禽肉中氯化物含量的方法有电位滴定法、佛尔哈德法和银量法[4]。其中银量法、电位滴定法滴定终点前后的颜色变化肉眼不易辨别，容易出现人员误差[5]。铬酸钾，硝酸银等属于有毒有害试剂，而且过程烦琐，分析检测流程较长。随着时代科技的发展，离子色谱法逐渐发展成熟，具有稳定性好、测定时间短、灵敏度较高等优点，用于检测无机阳离子和有机化合物的浓度[6-8]。因此本文提出离子色谱法检测畜禽肉中氯化物的含量，通过多次试验，证明其可行性，该方法弥补了国标方法检测的不足，可为畜禽肉类及肉制品中氯化物的检测提供参考和依据。

1 材料与方法

1.1 材料与设备

试剂：氯离子标准溶液1000 mg·L-1（坛墨质检科技股份有限公司）；去离子水。

仪器：CIC-D120型离子色谱仪，SH-AC-11型阴离子色谱柱（250 mm×4.6 mm），SHY-A-6型阴离子抑制器；SHRF-10淋洗液发生器、电导检测器（均为青岛盛瀚色谱技术有限公司）；BS224S型电子天平（赛多利斯科学仪器有限公司）；KQ-500DE型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；TDKZ-1型恒温振荡水浴锅（上海一恒科学仪器有限公 司）；Centrifuge 5804R型高速离心机（德国艾本德股份公司）。

1.2 试验方法

1.2.1 样品前处理

将样品粉碎混匀，称取2.5 g（精确至0.001 g）样品于150 mL具塞锥形瓶中，加入80 mL水，20 min超声提取，期间每隔5 min振摇1次，保证固相分散。置于80 ℃水浴中加热20 min至可清晰看见有组织液渗透，加热完成后自然冷却至室温，转移到 100 mL容量瓶，加水稀释至刻度线，混匀。取其中的部分溶液，离心机10000 r·min-1离心15 min，取上 清，并用0.22 µm水性滤膜针头滤器过滤，收集滤液到进样瓶中，以备进样。

1.2.2 标液配制

分别准确移取氯离子标准储备液0.05 mL、0.10 mL、 0.20 mL、0.50 mL、1.00 mL、2.00 mL、5.00 mL和10.00 mL于100 mL容量瓶中，用水稀释并定容至标线，混匀。制成氯离子浓度分别为0.50 mg·L-1、1.00 mg·L-1、2.00 mg·L-1、5.00 mg·L-1、10.0 mg·L-1、20.0 mg·L-1、50.0 mg·L-1和100.0 mg·L-1的标准工作液。按从浓度低到高分别将标准工作液注入离子色谱仪中，得到各浓度标准工作液色谱图，利用软件分析测定相应的峰高或峰面积。

1.2.3 色谱条件

色谱柱：阴离子色谱柱4.6 mm×250 mm（带保护柱4 mm×50 mm）；淋洗液：氢氧化钾溶液，浓度为15 mmol·L-1；等度洗脱；流速1.2 mL·min-1；抑制器：电流75 mA；检测器：电导检测器，检测池温度：35 ℃；进样体积：25 µL。

1.2.4 结果计算

氯离子含量的计算公式为

式中：X为试样中氯化物的含量（以氯离子计），mg·kg-1；ρ为测定用试样溶液中的氯离子浓度，mg·L-1；ρ0为试剂空白液中氯离子的浓度，mg·L-1；V为试样溶液体积，mL；f为试样溶液稀释倍数； 1000为换算系数；m为试样取样量，g。

2 结果与分析

2.1 淋洗液浓度和流速对保留时间的影响

2.1.1 淋洗液浓度优化

淋洗液流速为1.0 mL·min-1，浓度分别设为 10 mmol·L-1、15 mmol·L-1、20 mmol·L-1时，氯离子的保留时间分别为8.25 min、6.88 min、5.92 min。淋洗液浓度过大则保留时间提前，分离不完全；浓度过小则出峰位置过后，浪费时间。浓度为15 mmol·L-1最为合适。

2.1.2 淋洗液流速优化

淋洗液浓度为15 mmol·L-1，流速分别设为 1.0 mL·min-1、1.2 mL·min-1、1.5 mL·min-1时，氯离子的保留时间分别为6.88 min、5.66 min、4.52 min。淋洗液流速大于1.2 mL·min-1时，基线不稳定，压力过大，对仪器不友好；流速过小则耗费时间。流速为 1.2 mL·min-1效果最优。

经过多次试验，在淋洗液浓度为15 mmol·L-1，流速为1.2 mL·min-1时氯离子出峰效果最好，标液色谱图如图1所示。鸡肉样品经前处理后在此色谱条件下的离子色谱图见图2。

2.2 标准曲线

以标准工作液的浓度为横坐标x，以峰面积为纵坐标y，绘制标准曲线，结果如图3。由图3可得出，标准曲线回归方程为y=0.439413x-0.023245，相关系数r=0.999731，线性关系良好。

2.3 方法检测限

将标准工作液分别稀释并制成不同浓度的溶液，精密吸取上述溶液，分别进样进行测定，根据 GB/T 27404—2008提供的方法[9]，按照下列公式计算得出检出限为0.123 mg·L-1。

式中：CL为方法检出限；Sb为空白值标准偏差；b为方法校标准曲线的斜率。

2.4 精密度与准确度

2.4.1 精密度

对氯离子浓度分别为1.0 mg·L-1、5.0 mg·L-1、10.0 mg·L-1的标准工作液，进行6次平行测定，结果见表1。相对标准偏差分别为3.69%、1.63%、2.87%，均属允许范围，表明本试验方法的精密度 较好。

图1 氯离子标液色谱图

图2 鸡肉样品色谱图

图3 氯离子标准曲线

2.4.2 准确度

分别向鸡肉、猪肉样品中加入氯离子含量为 5.0 mg·L-1、10.0 mg·L-1和20.0 mg·L-1的标准工作液并进行测定，带入标准曲线回归方程进行计算，结果如表2所示。加标回收率为94.3%～105.0%，符合《实验室质量控制规范 食品理化检测》（GB/T 27404— 2008）的要求，准确度较高。

表1 方法精密度结果

表2 加标回收率结果

2.5 比较试验

用本法与GB 5009.44—2016国标法进行比较，对5份样品进行测定，结果见表3，对两种方法所得结果进行配对t检验，二者差异无统计学意义（t=0.02727，P＞0.05）。

表3 两法对照试验结果（以Cl-计，%）

3 结论

通过对该方法的准确性和精密度等的验证，结果均能满足检测需求且符合国家要求。用离子色谱法测定畜禽肉中氯化物具有结果理想和灵敏性好等优点。用此方法测定畜禽肉中的氯化物含量与国标提供的参考方法相比，样品前处理简单，能够有效提高分析质量和工作效率，所用试剂少且安全，利于环境保护，能为日后相关研究提供参考和支持。