自身免疫性肝病相关自身免疫性肝病抗体谱的检测及临床意义研究

渠 晶

(滕州市中心人民医院 山东 枣庄 277599)

自身免疫性肝病主要因自身免疫系统发生异常进而导致肝胆损伤，引发系列疾病，临床症状主要表现为乏力、嗜睡、黄疸、食欲降低、腹胀等，目前无完全治愈案例，但可通过相关治疗进行缓解[1-3]。经相关研究表明，肝病类型的不同和病理特征自身免疫性肝病的特点各不相同，而单一的诊断结果并不能作为判断病情的依据[4]。而采用ALD抗体谱检测效果更为显著，同时也为了更加确定自身免疫性肝病采用抗体谱检测对免疫肝病的诊断价值，本文主要探讨自身免疫性肝病患者通过分析其临床资料，具体报道如下。

1 资料与方法

1.1一般资料

选取2020年1月～2021年12月本院收治的180例自身免疫性肝病患者为研究对象，同时并收集60例健康体检人群作为对比，其中自身免疫性疾病的类型主要包括AIH(自身免疫性肝炎)60例为AIH组、PBC(原发性胆汁性肝病)60例为PBC组、PSC(原发性硬化胆管病)60例为PSC组，其中AIH组患者中男性和女性分别占38例、22例，年龄为23～64岁，平均年龄为(45.68±5.88)岁，PBC组患者中男性和女性分别占35例、25例，年龄为22～65岁，平均年龄为(46.05±5.62)岁，PSC组中男性和女性分别占36例、24例，年龄为22～66岁，平均年龄为(45.43±5.71)岁；健康体检组男性和女性分别占34例、26例，年龄为23～67岁，平均年龄为(44.82±5.43)岁；纳入标准：所有患者均符合《自身免疫性肝病基础与临床》[5]对所有自身免疫性肝炎疾病的诊断依据；所有患者均自愿参与研究；依从性良好；排除标准：患者伴有其它肝脏疾病，如肝肿瘤、酒精肝硬化等；精神障碍疾病。四组患者的性别、年龄等临床资料对比无显著差异(P>0.05)，具有可比性。

1.2方法

所有患者均在空腹状态下抽取3ml静脉血，保存于真空采血管中，并作离心分离，分离速度为每分钟3000r，时间为10min，并将分离出的血清放置于冰箱中，冰箱的温度设定为20℃。本次研究中所有抗体谱免疫球蛋白试剂盒均由同一公司生产的，且所有检测流程均按照试剂盒步骤完成。

1.2.1间接免疫荧光法检测

间接免疫荧光技术的应用主要用来检测ANA(血清抗核抗体)、AMA(抗线粒体抗体)、SMA(抗平滑肌抗体)，间接免疫荧光法以Hep-2细胞作为细胞基质片并提供抗原来源，将其与大鼠胃基质的冰冻生物薄片以1：100的比例进行血清配比，并将两种基质均温水中浸泡30min，洗涤干净后将羊抗人血清IgG放入后再持续30min进行洗片和封片，并在荧光显微镜下观察结果。判断ANA或AMA的阳性依据主要观察组织或细胞内是否出现特异性黄绿色荧光，若存在黄绿色荧光则表示为阳性。

1.2.2免疫印迹法检测

免疫印迹法主要是以高分辨率凝胶和免疫化学技术相结合的一种杂交技术，主要可用来检测SLA/LP(抗可溶性肝抗原、肝胰抗原)、LKM-Ⅰ型，其中将五种不同的相对分子质量采用AMA-M2亚型抗原做标本。其比例可依据1：50，将30μl和1.5ml稀释液进行混合，并观察膜的反应情况；振荡孵育可在常温下进行，持续时间为1h，清洗膜后将抗人IgG滴入，在常温下晃动1h进行洗膜，可在NBT/BC IP上显色10min以蒸馏水下结束反应。阳性判断的标准可根据对照条带图对比，若特定区域显示颜色或颜色较为清晰则为阳性。

1.3统计学方法

2 结果

2.1所有受检者的血清ANA，AMA抗体测定结果比较

与其它三组对比，健康受检组的阳性率较低，其中AIH 组患者的血清ANA阳性率高于PBC和PSC组，差异显著(P<0.05)，而PBC组和PSC组的血清ANA阳性率对比无显著差异(P>0.05)，PBC组与其它三组对比AMA阳性率较高，差异显著(P<0.05)，如表1所示。

表1 四组受检者血清ANA、AMA抗体测定结果的比较[n(%)]

2.2四组受检者SMA滴度>1/320，SLA/LP与LKM-1抗体测定结果的比较

与其它三组对比，AIH组的SMA滴度>1/320，SLA/LP与LKM-1抗体阳性率较高，差异显著(P<0.05)，而PBC组、PSC组和健康受检组的SMA滴度>1/320，SLA/LP与LKM-1抗体阳性率对比无显著差异(P>0.05)，如表2所示。

表2 四组受检者SMA滴度>1/320，SLA/LP与LKM-1抗体测定结果的比较[n(%)]

3 讨论

自身免疫性肝病的疾病类型较多，依据组织病理学和免疫学可分为AIH、PBC、PSC等，当前，临床对自身免疫性肝病的发病机制尚未有明确结石，但被临床学者普遍认为诱发的原因是支持抗原被激活，还有学者认为和病毒感染有很大关联，肝组织在被乙肝病毒或麻疹等感染后其肝细胞膜则会被白细胞抗原给活化，通过刺激自身B细胞而释放出更多的抗体，进而对自身肝脏组织造成很大损害，若随着病情的发展下，会引发肝功能衰竭或肝硬化等严重疾病，若不及时治疗还会造成患者死亡[6-9]。因自身免疫性肝病的抗体具有一定特异性，且抗体的滴度水平也相对较高，为此自身免疫性肝病患者的诊断科采用自身抗体谱进行检测[10]。

抗线粒体抗体对检测原发性胆汁肝硬化具有较强的特异性，并且抗可溶性肝抗原/抗胰抗原也是诊断AIH较强且有效的一种方式，为此，采用自身抗体谱检测对自身免疫性肝病的早期诊治具有重要意义[11-12]。通过不同自身免疫性肝病的不同其对血清AMA水平的影响也存在一定差异，而影响最小的则是AIH。通过本次研究结果发现，与其它三组对比，健康受检组的阳性率较低，其中AIH 组患者的血清ANA阳性率高于PBC和PSC组，而PBC组和PSC组的血清ANA阳性率对比无显著差异(P>0.05)，PBC组与其它三组对比AMA阳性率较高；与其它三组对比，AIH组的SMA滴度>1/320，SLA/LP与LKM-1抗体阳性率较高，差异显著(P<0.05)，而PBC组、PSC组和健康受检组的SMA滴度>1/320，SLA/LP与LKM-1抗体阳性率对比无显著差异(P>0.05)；由此表明，临床采用自身抗体谱检测可显著筛查自身免疫性肝病，同时也是作为检测自身免疫性肝病的重要指标。

综上所述，临床采用自身抗体谱检测肝脏疾病的应用效果较为显著，主要用于鉴别自身免疫性肝病，而临床治疗的依据可结合自身抗体谱的检测情况和患者自身症状及其它检测指标决定治疗策略，进而才能为治疗自身免疫性肝病的效果提供重要参考依据。