系统性红斑狼疮患者血清Th1/Th2 细胞因子及补体C3、C4 的变化

吴伯艳，陈建安，何永明（东莞东华医院，广东东莞 523110）

系统性红斑狼疮（SLE）是一种常见的慢性系统性自身免疫疾病，以产生多种自身抗体、补体激活和免疫复合物沉积为特征，可引发多个组织和器官损伤[1]。我国SLE 发病率为（30.13～70.41）/10 万，多见于女性，尤其是20～40 岁的育龄期女性[2]。目前SLE 的病因和致病机制仍未完全明确。Th 细胞分为Th1 细胞与Th2 细胞，Th1/Th2 平衡是维持正常免疫功能的重要基础[3]。研究显示，Th1/Th2 细胞因子失衡与SLE 的发生、发展密切相关，以细胞因子为靶点对系统性红斑狼疮进行治疗的方法逐步取得进展，细胞因子在SLE 发病机制及临床中的研究仍是当前热点[4]。亦有研究表明，补体C3、C4 参与SLE 的发生和疾病进展，并在诊断SLE 方面具有一定价值[5]。本研究旨在探讨SLE 患者血清Th1/Th2 细胞因子及补体C3、C4 的变化及意义，以期为SLE 的临床治疗提供依据。

1 资料和方法

1.1 一般资料

选取2019 年12月-2021 年12 月我院门诊或住院的129 例SLE 患者进行研究。所有患者诊断均符合中华医学会风湿病学分会制定的《2020 中国系统性红斑狼疮诊疗指南》[6]中的相关诊断标准，同时排除其他自身免疫性疾病、血液系统疾病及肿瘤相关疾病等，且近期无感染性疾病，未使用糖皮质激素及免疫抑制剂药物等。根据加拿大Toronto 大学制定的SLE 疾病活动度指数（SLEDAI）进行评分，分为活动组（SLEDAI≥10 分）和稳定组（SLEDAI＜10 分）。其中稳定组61 例，男6 例，女55 例，年龄14～68 岁，平均（35.2±9.8）岁；活动组68 例，男8 例，女60 例，年龄14～69 岁，平均（36.3±11.4）岁。同时选取本院同期健康体检者70 例为对照组，男7 例，女63 例，年龄22～59 岁，平均（34.1±6.9）岁。各组患者的年龄和性别差异无统计学意义（P＞0.05）。

1.2 方法

1.2.1 仪器与试剂 采用美国贝克曼库尔特公司的FC500 MCL 五色流式细胞分析仪检测Th1/Th2 细胞因子的水平。人Th1/Th2 细胞因子检测试剂盒购于杭州赛基生物科技有限公司。补体C3、C4 采用美国贝克曼库尔特IMMAGE800 特定蛋白分析仪及配套试剂进行检测。

1.2.2 方法 所有SLE 患者和对照组均清晨空腹抽取静脉血2 mL，置于红色促凝管中，静置30 min 后，3 500 r/min，离心5 min，分离上层血清，用于Th1/Th2 细胞因子检测及补体C3、C4 检测。采用流式细胞分析仪检测SLE 患者与对照组Th1/Th2 细胞因子（IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、TNF-α、IFN-γ）的表达水平；采用速率散射免疫比浊法测定补体C3、C4 水平。上述所有操作步骤均严格按照仪器及试剂盒说明书执行。

1.3 统计学处理

2 结果

2.1 SLE 活动组、稳定组与对照组Th1/Th2 细胞因子及补体C3、C4 水平的比较

SLE 活动组IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、TNF-α、IFN-γ 水平明显高于对照组，补体C3、C4 水平低于对照组（P＜0.01）；SLE 活动组IL-6、IL-10、IFN-γ 水平明显高于SLE 稳定组，补体C3、C4 水平低于SLE 稳定组（P＜0.01），IL-2、IL-4、TNF-α 水平与SLE 稳定组比较差异无统计学意义（P＞0.05）；SLE 稳定组的C3、C4水平明显低于对照组（P＜0.01），IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、TNF-α、IFN-γ 水平与对照组比较差异无统计学意义（P＞0.05）。见表1。

表1 SLE 活动组、稳定组与对照组Th1/Th2 细胞因子及补体C3、C4 水平比较 （）

表1 SLE 活动组、稳定组与对照组Th1/Th2 细胞因子及补体C3、C4 水平比较 （）

与对照组比较：aP＜0.01；与SLE 稳定组比较：bP＜0.01

2.2 SLE 患者补体C3、C4 水平与Th1/Th2 细胞因子相关性分析

SLE 患者补体C3、C4 水平与IFN-γ 水平以及C4水平与IL-2 水平均呈负相关，差异均有统计学意义（P＜0.05 或0.01）；补体C3、C4 水平与IL-4、IL-6、IL-10、TNF-α 水平，以及C3 水平与IL-2 水平无相关性（P＞0.05）。见表2。

表2 SLE 患者补体C3、C4 水平与Th1/Th2 细胞因子相关性分析 （n=129）

3 讨论

系统性红斑狼疮患者通过产生大量的自身抗体，导致循环免疫复合物形成，激活补体系统，造成多个器官组织损害，严重危害患者的生命健康[7]。目前SLE 的致病机制尚未完全明确，相关研究表明，Th1/Th2 细胞因子失衡及补体C3、C4 水平的异常均参与SLE 的发病机制。

Th1 细胞主要分泌IL-2、TNF-α、IFN-γ 等细胞因子，其关键性转录因子为T-bet，可引发细胞免疫；Th2细胞主要分泌IL-4、IL-6、IL-10 等细胞因子，关键转录因子为STAT6 及GATA，其作用细胞主要为B 细胞，可激活B 细胞及生成抗体，引发体液免疫[8]。正常时Th1/Th2 处于动态平衡，而在SLE 的发生、发展中，Th1/Th2 失衡起到了重要作用，不同时期，Th1、Th2 优势各不相同[9]。

在Th1 型细胞因子中，IL-2 是淋巴细胞生长分化过程中的重要调节因子，可以诱导TNF-α、IFN-γ 等细胞因子的产生。TNF-α 和IFN-γ 是促炎细胞因子，在机体发生感染时，其水平明显升高，诱导急性全身炎症反应，从而引起机体各组织器官损伤。在Th2 型细胞因子中，IL-4 和IL-10 是抗炎细胞因子，可通过抑制TNF-α等促炎细胞因子的分泌，发挥其抗炎作用。IL-6 是由单核细胞产生的促炎细胞因子，通过激活B 细胞，诱导自身抗体产生，从而参与机体免疫反应[10-12]。本研究发现，SLE 活动组IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、TNF-α、IFN-γ 水平明显高于对照组；活动组IL-6、IL-10、IFN-γ 水平明显高于稳定组，差异有统计学意义（P＜0.01）。Th1/Th2 细胞因子均高水平表达，提示SLE 患者促炎反应和抗炎反应同时存在，并相互促进。Th1/Th2 细胞因子紊乱在SLE 疾病的发生、发展中起着重要作用。SLE 活动期IL-6、IL-10、IFN-γ 水平明显增高，有望成为SLE 病情活动度的监测指标。

补体是机体参与免疫反应的重要环节。张舒等[13]研究发现SLE 患者体内存在补体C3、C4 水平的下降，并且下降的程度与疾病病情活动程度相关。本研究发现，SLE 患者补体C3、C4 水平明显低于健康者，补体C3、C4与IFN-γ 水平以及C4 与IL-2 水平呈负相关（P＜0.05 或0.01），补体C3、C4 水平在SLE 患者疾病活动期明显降低，提示SLE 患者体内存在补体成分消耗现象，这与梁鑫等[14-15]的研究结果一致。其相关机制可能是：SLE 疾病进程中产生大量免疫复合物沉积到组织器官中，通过激活补体介导的经典和旁路途径清除免疫复合物，进而消耗大量的补体C3 和C4，导致其水平降低[16-17]。

综上所述，Th1/Th2 细胞因子紊乱及补体C3、C4水平的异常与SLE 的发生、发展密切相关；IL-6、IL-10、IFN-γ 及补体C3、C4 水平，还与SLE 活动度有关，可作为判断SLE 病情活动度指标。