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黄草乌地上部分化学成分的研究

2022-12-30罗启鹏杨崇康沙本才

中成药 2022年1期
关键词:分子式石油醚生物碱

罗启鹏, 杨崇康, 张 莲, 刘 佳, 沙本才, 沈 勇*

(1.云南农业大学农学与生物技术学院,云南 昆明 650201;2.云南农业大学功能产品研发中心,云南 昆明 650201;3.昆明康人生物科技有限公司,云南 昆明 650033)

毛茛科乌头属全世界有三百多种,广泛分布于亚洲、欧洲和北美洲,在我国有两百多种,为乌头属植物的核心分布中心,主要分布于西南横断山区,如云南西北部、四川西部、和西藏东部[1]。多年来,乌头属植物显著活性被科研工作者广泛关注,二萜生物碱为其核心成分,具有抗炎、镇痛、抗肿瘤、抗氧化等显著活性[2-3],但它同时也是剧毒成分,因而从中寻找高效低毒活性分子遇到较大困难。课题组前期对直缘乌头和附子地上部分进行研究,发现地上部分除了二萜生物碱以外,还存在酚苷、黄酮类成分[4]。目前,对乌头属植物化学成分和药理作用的研究主要集中于地下部分,仅有少数几个种涉及地上部分[5-10]。黄草乌AconitumvilmorinianumKom.为乌头属有毒植物,在云南大面积种植,其用药部位为块根,地上部分基本都是焚烧处理,为了进一步实现该部位的开发利用,本实验对其化学成分进行研究,结果共分离得到17个化合物,均为首次从该植物地上部分分离得到,其中化合物2、7、10~16为首次从该植物中分离得到。

1 材料

GF254薄层色谱硅胶(临沂市海祥化工有限公司);柱色谱硅胶 (200~300目,青岛海洋化工有限公司);Sephadex LH-20(美国Pharmacia公司);Hei-vap digital G3旋转蒸发仪(德国海道夫公司);顶佳高速多功能粉碎机DJ-500Y (上海顶佳机械设备有限公司);Avance-500 MHz核磁共振仪(德国Bruker公司);VG Autospec 3000型质谱仪(英国Micromass公司)。

2018年8月于云南禄劝采集黄草乌地上部分,经中国科学院昆明植物研究所雷立功副研究员鉴定为AconitumvilmorinianumKom.。

2 提取与分离

将黄草乌地上部分(50 kg)粉碎,甲醇回流提取,减压回收甲醇得总提物,用1.5% HCl溶解,HCl调pH至2~3,乙酸乙酯萃取,获得非碱性脂溶性部分A(650 g);酸水层用2% NaOH调pH 9~10,乙酸乙酯萃取,得碱性脂溶性部分B (230 g)。B部分用硅胶柱,石油醚-丙酮-二乙胺 (10∶1∶0.5~2∶8∶1)梯度洗脱,TLC检查、合并得6个流分Fr.1~Fr.6,Fr.3经硅胶柱,氯仿-甲醇 (10∶0.1)洗脱,氯仿结晶得到化合物1(0.2 g)、2(60 mg);Fr.4经硅胶柱, 氯仿-甲醇 (10∶1),石油醚-丙酮-二乙胺 (8∶2∶1)洗脱,TLC检查合并,丙酮结晶得化合物3(3.2 g)、4(1.4 g);Fr.5经硅胶柱,氯仿-甲醇 (10∶1),Sephadex LH-20 (氯仿-甲醇1∶1) 洗脱,得化合物5(0.1 g)、6(80 mg)、7(26 mg);Fr.6经硅胶柱,石油醚-乙酸乙酯-二乙胺 (8∶2∶1), Sephadex LH-20 (氯仿-甲醇1∶1)洗脱,丙酮结晶得化合物8(0.5 g)、9(1.5 g),10(33 mg)。A部分经硅胶柱,氯仿-甲醇 (20∶1~1∶9) 梯度洗脱,TLC检查、合并得6个流分Fr.1~Fr.6,Fr.3经硅胶柱,石油醚-丙酮 (9∶1)、氯仿-甲醇-水 (10∶0.5∶0.1) 洗脱,得化合物17(0.2 g);Fr.4经硅胶柱,石油醚-乙酸乙酯(8∶4),Sephadex LH-20 (氯仿-甲醇1∶1),得化合物11(0.2 g);Fr.5经硅胶柱,氯仿-甲醇-水(8∶2∶0.2),Sephadex LH-20 (氯仿-甲醇1∶1)得化合物12(10 mg)、13(15 mg); Fr.6经硅胶用氯仿-甲醇-水 (8∶2∶0.2),石油醚-丙酮(4∶6),Sephadex LH-20(氯仿-甲醇1∶1) 得化合物14(0.2 g)、15(0.1 g)、16(60 mg)。

3 结构鉴定

化合物1: 白色针状结晶,分子式C23H37NO4,ESI-MSm/z: 392.3[M+H]+。1H-NMR (500 MHz, CDCl3)δ: 4.13 (1H, t,J=4.7 Hz, H-14β), 3.43 (1H, dd,J=10.0, 6.1 Hz, H-16), 3.36, 3.25 (3H, s, -OCH3×2), 3.13 (1H, m, H-1), 3.09 (1H, s, H-17), 1.05 (3H, t,J=7.1 Hz, -NCH2CH3), 0.75 (3H, s, H-18);13C-NMR (125 MHz, CDCl3)δ: 86.7 (C-1), 82.1 (C-16), 75.7 (C-14), 73.2 (C-8), 62.5 (C-17), 56.9 (C-19), 56.5, 56.4 (16, 1-OCH3), 50.7 (C-5), 49.7 (C-21), 48.9 (C-11),46.8 (C-9), 46.0 (C-7), 38.3 (C-3), 37.8 (C-15), 37.4 (C-10), 34.8 (C-4), 27.7 (C-12), 26.4 (C-18), 26.7 (C-2), 25.0 (C-6), 13.5 (C-22)。以上数据与文献[11]基本一致,故鉴定为黄草乌碱丁。

化合物2: 白色针状结晶,分子式C22H33NO4,ESI-MSm/z: 376.3[M+H]+。1H-NMR (500 MHz, CDCl3)δ: 4.16 (1H, t,J=4.7 Hz, H-14β), 3.64 (1H, s, H-19), 3.40 (1H, dd,J=9.1, 4.9 Hz, H-16), 2.72 (1H, s, H-17), 3.36 (3H, s, -OCH3), 1.07 (3H, t,J=7.3 Hz, -NCH2CH3), 0.85 (3H, s, H-18);13C-NMR (125 MHz, CDCl3)δ:91.5 (C-1), 81.9 (C-16), 75.6 (C-14), 72.1 (C-8), 68.9 (C-19), 61.8 (C-17), 56.7 (16-OCH3), 55.0 (C-7), 47.9 (C-21), 48.5 (C-11), 46.5 (C-13), 45.8 (C-9), 39.7 (C-15), 38.5 (C-10), 38.3 (C-4), 36.5 (C-5), 30.3 (C-12), 27.0 (C-2), 24.7 (C-6), 23.5 (C-3), 20.4 (C-18), 14.7 (C-22)。以上数据与文献[12]基本一致,故鉴定为karakanine。

化合物3: 白色块状物,分子式C22H35NO4, ESI-MSm/z: 378.2[M+H]+。1H-NMR (500 MHz, CDCl3)δ: 4.17 (1H, t,J=4.8 Hz, H-14β), 3.68 (1H, t,J=2.6 Hz, H-1), 3.50 (1H, dd,J=8.9, 5.0, H-16), 3.32 (3H, s, -OCH3), 2.72 (1H, s, H-17), 1.09 (3H, t,J=7.3 Hz, -NCH2CH3), 0.86 (3H, s, H-18);13C-NMR (125 MHz, CDCl3)δ:82.4 (C-16), 75.8 (C-14), 74.3 (C-8), 72.5 (C-1), 63.3 (C-17), 60.3 (C-19), 56.5 (16-OCH3), 48.8 (C-11), 48.4 (C-21), 46.7 (C-9), 46.6 (C-5), 45.1 (C-7), 44.0 (C-10), 42.6 (C-15), 40.3 (C-13), 33.1 (C-4), 31.2 (C-3), 29.9 (C-2), 28.8 (C-12), 27.9 (C-18), 24.9 (C-6), 13.3 (C-22)。以上数据与文献[13]基本一致,故鉴定为黄草乌碱乙。

化合物4: 白色粉末,分子式C23H37NO5,ESI-MSm/z: 408.1[M+H]+。1H-NMR (500 MHz, CDCl3)δ: 4.13 (1H, t,J=4.7 Hz, H-14β), 3.65 (1H, s, H-1), 3.45 (1H, m, H-16), 3.34, 3.28 (each 3H, s, -OCH3×2), 3.16 (1H, s, H-17), 1.05 (3H, t,J=7.2 Hz, NCH2CH3);13C-NMR (125 MHz, CDCl3)δ: 86.7 (C-1), 82.5 (C-16), 75.2 (C-14), 72.8 (C-8), 69.0 (C-18), 63.0 (C-17), 56.5, 56.4 (16, 1-OCH3), 53.4 (C-19), 49.8 (C-21), 49.0 (C-11), 46.7 (C-9), 45.5 (C-5), 45.3 (C-7), 45.1 (C-13), 38.7 (C-4), 38.2 (C-15), 37.8 (C-10), 32.5 (C-3), 27.4 (C-12), 25.9 (C-2), 24.9 (C-6), 13.8 (C-22)。以上数据与文献[14]基本一致,故鉴定为卡马考宁。

化合物5: 白色粉末,分子式C24H39NO5,ESI-MSm/z: 422.4[M+H]+。1H-NMR (500 MHz, CDCl3)δ: 4.08 (1H, t,J=4.8 Hz, H-14β), 3.46 (1H, m, H-16), 3.33 (1H, m, H-1), 3.28, 3.24, 3.21 (3H, s, 3×OCH3), 3.13, 3.00 (1H, d,J=12.0 Hz, H-18), 3.12 (1H, s, H-17), 1.06 (3H, t,J=7.1 Hz, -NCH2CH3);13C-NMR (125 MHz, CDCl3)δ: 86.4 (C-1), 82.3 (C-16), 79.2 (C-18), 75.3 (C-14), 72.6 (C-8), 62.8 (C-17), 56.7, 56.6, 56.2 (18, 16, 1-OCH3), 52.5 (C-19), 49.2 (C-21), 49.1 (C-11), 46.5 (C-9), 46.1 (C-13), 45.8 (C-7), 45.2 (C-10), 38.6 (C-4), 38.2 (C-15), 37.7 (C-10), 37.4 (C-5), 32.4 (C-3), 27.2 (C-12), 26.0 (C-2), 24.2 (C-6), 13.5 (C-22)。以上数据与文献[15]基本一致,故鉴定为塔拉地萨敏。

化合物6: 白色针状,分子式C21H31NO4,ESI-MSm/z: 362.2[M+H]+。1H-NMR (500 MHz, CDCl3)δ: 7.11 (1H, s, H-19), 4.18 (1H, s, H-17), 4.15 (1H, t,J=4.8 Hz, H-14β), 3.51 (1H, dd,J=8.3, 2.8 Hz, H-16), 3.19 (1H, dd,J=10.3, 6.9 Hz, H-1), 3.36, 3.22 (3H, s, -OCH3×2), 1.12 (3H, s, H-18);13C-NMR (125 MHz, CDCl3)δ: 168.9 (C-19), 84.9 (C-1), 82.0 (C-16), 75.5 (C-14), 72.3 (C-8), 61.9 (C-17), 56.6, 56.1 (16, 1-OCH3), 52.2 (C-7), 47.4 (C-11), 46.7 (C-5), 46.1 (C-10), 46.1 (C-9), 45.9 (C-4), 37.4 (C-15), 37.1 (C-13), 32.7 (C-3), 27.4 (C-12), 26.4 (C-6), 26.0 (C-2), 22.3 (C-18)。以上数据与文献[16]基本一致,故鉴定为N-deethyl-N-19-didehydrosachaconitine。

化合物7:白色油状,分子式C31H43NO8,ESI-MSm/z: 558.3[M+H]+。1H-NMR (500 MHz, CDCl3)δ: 7.59 (1H, dd,J=8.4, 1.7 Hz, H-6′), 7.57 (1H, d,J=1.7 Hz, H-2′), 6.91 (1H, d,J=8.4 Hz, H-5′), 4.20 (1H, t,J=4.8 Hz, H-14β), 4.12 (1H, d,J=10.8 Hz, H-18b), 3.96 (1H, d,J=10.4 Hz, H-18a), 3.94, 3.92, 3.48 (3H, s, -OCH3×3), 3.75 (1H, s, H-1), 3.36 (1H, dd,J=9.1, 5.0 Hz, H-16), 2.83 (1H, s, H-17), 1.15 (3H, t,J=7.1 Hz,-NCH2CH3);13C-NMR (125 MHz, CDCl3)δ: 166.4 (C=O), 153.4 (C-4′), 149.2 (C-3′), 123.6 (C-6′), 122.8 (C-1′), 112.2 (C-2′), 110.0 (C-5′), 81.4 (C-16), 76.0 (C-14), 74.4 (C-8), 72.0 (C-1), 69.9 (C-18), 63.8 (C-17), 56.5 (16-OCH3), 56.6 (C-19), 48.9 (C-11), 48.2 (C-21), 46.4 (C-9), 45.5 (C-7), 44.3 (C-10), 42.1 (C-15), 41.5 (C-5), 39.8 (C-13), 37.2 (C-4), 29.3 (C-3), 28.0 (C-12), 26.4 (C-2), 25.4 (C-6), 12.9 (C-22)。以上数据与文献[17]基本一致,故鉴定为hemsleyaconitine D。

化合物8:白色粉末,分子式C21H33NO4,ESI-MSm/z: 364.1[M+H]+。1H-NMR(500 MHz, CDCl3)δ: 4.16 (1H, t,J=4.8 Hz, H-14β), 3.64 (1H, dd,J=9.3, 4.4 Hz, H-16), 3.56 (1H, t,J=3.1 Hz, H-1), 2.69 (1H, s, H-17), 1.08 (3H, t,J=7.1 Hz, NCH2CH3), 0.85 (3H, s, H-18);13C-NMR (125 MHz, CDCl3)δ: 75.4 (C-14), 72.4 (C-16), 72.3 (C-1), 62.9 (C-17), 60.1 (C-19), 48.9 (C-11), 48.5 (C-21), 46.7 (C-5), 46.2 (C-9), 45.4 (C-7), 44.3 (C-15), 43.9 (C-13), 43.4 (C-10), 33.0 (C-4), 31.2 (C-3), 29.4 (C-2), 28.2 (C-12), 27.2 (C-18), 24.5 (C-5), 12.5 (C-22)。以上数据与文献[16]基本一致,故鉴定为16β-羟基心瓣翠雀碱。

化合物9:白色粉末,分子式C22H35NO5,ESI-MSm/z: 394.2[M+H]+。1H-NMR (500 MHz, CDCl3)δ: 4.11 (1H, t,J=4.7 Hz, H-14β), 3.65 (1H, s, H-1), 3.31 (1H, m, H-16), 3.27 (1H, s, 16-OCH3), 1.16 (3H, t,J=7.2 Hz, -NCH2CH3);13C-NMR (125 MHz, CDCl3)δ: 82.2 (C-16), 75.3 (C-14), 74.5 (C-8), 72.2 (C-1), 67.5 (C-18), 63.8 (C-17), 56.4 (C-19), 56.3 (16-OCH3), 48.4 (C-11), 48.3 (C-21), 46.2 (C-9), 45.1 (C-7), 44.0 (C-10), 42.2 (C-15), 41.2 (C-5), 40.3 (C-13), 37.5 (C-4), 29.1 (C-3), 28.5 (C-12), 26.0 (C-2), 24.3 (C-6), 12.4 (C-22)。以上数据与文献[14]基本一致,故鉴定为哥伦乌头碱。

化合物10:黄色油状,分子式C20H23NO4,ESI-MSm/z: 340.3[M-H]-。1H-NMR (500 MHz, CDCl3)δ: 8.05 (1H, s, H-11), 6.83 (1H, s, H-8), 6.59 (1H, s, H-3), 3.91 (3H, s, 10-OCH3), 3.87 (3H, s, 2-OCH3), 3.64 (3H, s, 1-OCH3), 2.53 (3H, s, -NCH3);13C-NMR (125 MHz,CDCl3)δ: 151.6 (C-2), 145.0 (C-9), 144.6 (C-1), 144.3 (C-10), 130.1 (C-7a), 129.0 (C-3a), 127.3 (C-1b), 126.6 (C-1a), 124.0 (C-11a), 113.5 (C-8), 111.6 (C-11), 110.4 (C-3), 62.6 (C-6a), 60.0 (1-OCH3), 56.1 (10-OCH3), 55.8 (2-OCH3), 53.3 (C-5), 44.3 (NCH3), 34.3 (C-7), 29.2 (C-4)。以上数据与文献[18]基本一致,故鉴定为N-甲基樟苍碱。

化合物11:棕色固体,分子式C12H13NO3,ESI-MSm/z: 242.2[M+Na]+。1H-NMR (500 MHz,C5D5N)δ: 6.96 (2H, s, H-7, 10), 4.51 (1H, d,J=7.6 Hz, H-10b), 4.28 (1H, m, H-5α), 2.85 (1H, m, H-5β), 2.73 (1H, m, H-1α), 2.72 (2H, m, H-6), 2.46 (1H, m, H-2α), 2.31 (1H, m,H-2β), 1.57 (1H, m, H-1β);13C-NMR (125 MHz, C5D5N)δ: 172.7 (C-3), 146.4 (C-9), 146.2 (C-8), 129.4 (C-10a), 124.8 (C-6a), 116.6 (C-7), 112.8 (C-10), 56.5 (C-10b), 37.5 (C-5), 32.2 (C-2), 28.4 (C-6), 28.0 (C-1)。以上数据与文献[19]基本一致,故鉴定为马齿苋酰胺E。

化合物12:白色油状,分子式C17H20O9,ESI-MSm/z: 369.1[M+H]+。1H-NMR (500 MHz,CD3OD)δ: 7.58 (1H, d,J=16.0 Hz, H-7′), 7.01 (1H, d,J=1.9 Hz, H-2′), 6.92 (1H, dd,J=8.2, 2.2 Hz, H-6′), 6.74 (1H, d,J=8.1 Hz, H-5′), 6.26 (1H, d,J=16.0 Hz, H-8′), 5.35 (1H, m, H-5), 4.08 (1H, m, H-3), 3.72 (3H, s, 7-OCH3), 3.70 (1H, dd,J=7.6, 3.2 Hz, H-4);13C-NMR (125 MHz, CD3OD)δ: 176.2 (C-7), 168.5 (C-9′), 149.3 (C-4′), 147.0 (C-7′), 146.7 (C-3′), 127.9 (C-1′), 122.7 (C-6′), 116.3 (C-5′), 115.6 (C-8′), 115.0 (C-2′), 75.2 (C-1), 73.9 (C-4), 72.4 (C-5), 68.4 (C-3), 52.6 (7-OCH3), 40.8 (C-2), 36.3 (C-6)。以上数据与文献[20]基本一致,故鉴定为neochlorogenic acid methyl ester。

化合物13:白色油状,分子式C17H20O9,ESI-MSm/z: 369.2[M+H]+。1H-NMR (500 MHz, CD3OD)δ: 7.54 (1H, d,J=15.8 Hz, H-7′), 7.04 (1H, d,J=1.6 Hz, H-2′), 6.92 (1H, dd,J=8.0, 1.6 Hz, H-6′), 6.75 (1H, d,J=8.1 Hz, H-5′), 6.23 (1H, d,J=15.8 Hz, H-8′), 5.33 (1H, dd,J=9.8, 4.4 Hz, H-3), 4.16 (1H, d,J=2.9 Hz, H-5), 3.74 (3H, s, 7-OCH3), 2.17 (1H, dd,J=13.9, 2.9 Hz, H-2a);13C-NMR (125 MHz, CD3OD)δ: 173.8 (C-7), 167.1 (C-9′), 148.5 (C-4′), 145.8 (C-7′), 145.4 (C-3′), 126.5 (C-1′), 121.8 (C-6′), 114.9 (C-5′), 113.5 (C-8′), 113.5 (C-2′), 74.3 (C-1), 71.5 (C-3), 70.1 (C-4), 68.9 (C-5), 51.4 (7-OCH3), 36.8 (C-6), 36.5 (C-2)。以上数据与文献[20]基本一致,故鉴定为chlorogenic acid methyl ester。

化合物14:黄色粉末,分子式C21H20O11,ESI-MSm/z: 449.1[M+H]+。1H-NMR (500 MHz, CD3OD)δ: 8.03 (2H, d,J=8.7 Hz, H-2′, 6′), 6.84 (2H, d,J=8.7 Hz, H-3′, 5′), 6.34 (1H, s, H-8), 6.16 (1H, s, H-6), 5.15 (1H, d,J=7.5 Hz, H-1″);13C-NMR (500 MHz, CD3OD)δ: 179.1 (C-4), 166.5 (C-7), 162.9 (C-5), 161.2 (C-4′), 159.7 (C-2), 157.9 (C-9), 135.9 (C-3), 132.5 (C-2′, 6′), 122.9 (C-1′), 116.5 (C-3′, C-5′), 105.9 (C-10), 104.7 (C-1″), 99.9 (C-6), 94.7 (C-8), 78.4 (C-5″), 78.1 (C-3″), 75.8 (C-2″), 71.2 (C-4″), 62.8 (C-6″)。以上数据与文献[21]基本一致,故鉴定为山柰酚-3-O-β-D-葡萄糖苷。

化合物15:黄色粉末,分子式C20H18O10,ESI-MSm/z: 419.2[M+H]+。1H-NMR (500 MHz,C5D5N)δ: 8.52 (2H, d,J=8.7 Hz, H-2′, 6′), 7.19 (2H, d,J=8.7 Hz, H-3′, 5′), 7.06 (1H, d,J=1.9 Hz, H-8), 6.80 (1H, d,J=1.9 Hz, H-6), 5.66 (1H, d,J=7.2 Hz, H-1″);13C-NMR (500 MHz, C5D5N)δ: 177.1 (C-4), 163.5 (C-7), 161.4 (C-9), 161.0 (C-4′), 156.3 (C-5), 147.9 (C-2), 138.2 (C-3), 130.6 (C-2′, 6′), 123.3 (C-1′), 116.4 (C-3′, 5′), 106.4 (C-10), 102.8 (C-1″), 99.8 (C-6), 94.7 (C-8), 74.2 (C-2″), 72.0 (C-3″), 69.2 (C-4″), 67.6 (C-5″)。以上数据与文献[22]基本一致,故鉴定为山柰酚-7-O-α-L-阿拉伯糖苷。

化合物16:黄色粉末,分子式 C20H18O10,ESI-MSm/z: 435.2[M+H]+。1H-NMR (500 MHz,C5D5N)δ: 8.51 (1H, d,J=1.9 Hz, H-2′), 8.03 (1H, d,J=8.4, 1.9 Hz, H-6′), 7.41 (1H, d,J=8.4 Hz, H-5′), 6.99 (1H, d,J=1.9 Hz, H-8), 6.79 (1H, d,J=1.8 Hz, H-6), 5.65 (1H, d,J=6.9 Hz, H-1″);13C-NMR (125 MHz, C5D5N)δ: 177.2 (C-4), 163.9 (C-7), 162.0 (C-5), 156.9 (C-9), 156.7 (C-2), 148.4 (C-4′), 147.1 (C-3′), 135.3 (C-3), 121.1 (C-1′), 116.8 (C-5′), 116.6 (C-2′), 106.1 (C-10), 102.4 (C-1″), 99.7 (C-6), 94.5 (C-8), 74.4 (C-3″), 72.0 (C-2″), 69.4 (C-4″), 67.2 (C-5″)。以上数据与文献[23]基本一致,故鉴定为槲皮素-3-O-α-L-阿拉伯糖。

化合物17:白色针状结晶 (甲醇),经硅胶TLC,以石油醚-乙酸乙酯 (8∶2,Rf=0.5)、石油醚-丙酮 (9∶1,Rf=0.4)、乙酸乙酯-丙酮 (97∶3,Rf=0.5) 为展开剂,与β-谷甾醇对照品比对,经硫酸乙醇溶液显色,105 ℃下烤至斑点清晰。结果,在与对照品相应位置上显相同颜色斑点;熔点为137~138 ℃,与对照品混合后熔点不下降,故鉴定为β-谷甾醇。

4 讨论

本实验共分离得到17个化合物,其中9个为二萜生物碱,2个为四氢异喹啉类生物碱,3个为黄酮苷;二萜生物碱为其核心成分,均为C19二萜生物碱类成分,其中7个与块根所含成分相同,仅化合物2、7为该植物地上部分的特异性二萜生物碱[24-28],提示黄草乌地上、地下部分所含该类成分结构类型相同。二萜生物碱中,C-3、C-6、C-13、C-15常见OH或OCH3的取代,同时C-8和C-14有酯基取代[27],而黄草乌地上部分均无上述位置的取代。

二萜生物碱是乌头属植物的活性成分,同时也是毒性成分,其毒性与酯基数量与取代位置有关,双酯型二萜生物碱毒性最强,单酯型次之,醇胺类乌头碱毒性最弱[2]。黄草乌地下部分高含量的特征二萜生物碱主要为双酯型,如滇乌碱、草乌甲素等[24-25,28],而地上部分均为醇胺型生物碱,故前者剧毒而后者毒性较小。因此,黄草乌块根入药时,通常需要炮制水解C-8、C-14位酯基降低毒性方能应用于临床[29];地上部分二萜生物碱为醇胺类,其毒性相当于炮制后的块根,临床应用更安全。

除二萜生物碱外,本实验还分离鉴定了2个四氢异喹啉类生物碱——马齿苋酰胺E和N-甲基樟苍碱,前者具有较强的抗氧化活性[30-31],后者具有明显的肿瘤抑制作用[32]。此外,还获得3个黄酮苷类成分,在抗氧化、抗菌、抗炎、抗辐射、神经保护等方面表现出较好的作用而一直备受关注[33-34]。目前,上述2类成分在黄草乌地下部分中未见报道,即为地上部分特有,同时具有较高的安全性,可为从该植物中发现活性物质提供参考。

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