中国不同地区中药材黄精有机氯农药残留的检测及其安全性评价

徐雨生，申 科，魏 颖，董竞成，蒋智林，

（1.湖南农业大学农学院，长沙 410128；2.普洱学院农林学院，云南 普洱 665000；3.复旦大学中西医结合研究院传统药物比较研究所，上海 200040）

药用黄精为百合科黄精属植物黄精（Polygonatum sibiricumRed.）、多花黄精（Polygonatum cyrtonemaHua.）、滇黄精（Polygonatum kingianumColl.Et Hemsl.）干燥的根茎［1］。始载于《神农本草经》［2］，是中国一种传统药食两用植物［3］，具有补气养阴、健脾、润肺和益肾等功效［4］。目前随着人们保健意识的不断提升，黄精也日益受人青睐，市场需求日益增长［5］。

目前市场上售卖的中药材主要来源于野生资源，但是因为人们不加节制地过度采挖，致使环境遭到破坏，中药材的野生资源正在慢慢减少，人工种植随之逐渐兴起。在种植过程中，为了提高植株的成活率和避免病虫害，一些应对措施（物理防治、化学防治、微生物防治等）被采用。因为化学防治的简便快捷而备受广大药农的青睐。而有机氯农药因为杀虫效果明显，被很多药农采用。随之而来就导致农药残留含量很容易超标，给人们的健康带来危害［6］。目前被人类使用最多的有机氯农药为六六六（Benzene hexachloride，BHC）、滴滴涕（Dichlorodiphenyl trichloroethane，DDT）和五氯硝基苯（Pentachloronitrobenzene，PCNB），虽然中国在20世纪80年代已经禁止使用和生产这3种农药［7，8］，但是由于它们性质十分稳定，直到现在仍能被检测出存在残留［9］，其可以长期存在于食物中被人体吸收，导致在人体内进行蓄积，引发一系列病症，严重危害消费者的身体健康。因此，中药材中有机氯农药残留含量过高的现象已经成为中药走向国际化的严重阻碍，据报告有90%的中药样品被检测出存在有机氯农药残留，且目前只有9种有机氯农药被明确规定了限量标准，远远满足不了现在中药材市场的需求［10-12］。

目前，国内外鲜有黄精有机氯农药的相关报道，本试验根据农业行业标准NY/T761—2008，通过气相色谱法对全国范围内市面上出售的黄精进行有机氯农药残留含量的检测，为人们安全的药食选择、种植过程中农药的合理使用和市场监督管理提供一定的试验参考［13］。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 黄精样本材料 根据黄精在全国的产地分布情况，从云南、贵州、四川、重庆、广西、陕西、宁夏、甘肃、湖南、湖北、江西、内蒙古、西藏、广东、福建、安徽、浙江、河南、河北、吉林、山东、辽宁22个省（市、区）46个产地收集野生新鲜根茎共53个样本。所收集样本经普洱学院农林学院蒋智林教授鉴定，样品信息见表1。

表1 黄精样品来源信息及其鉴定结果

1.1.2 仪器与试剂 所用仪器主要有气相色谱仪（Agilent6890N型）、HP-5石英毛细管柱（30 m×0.32 mm，0.25 μm，Agilent）、台式速冻离心机（Sorvall ST 16R75004380型）、旋涡混合器（Talboys基本型）、超声波清洗器（CQ-250-DST型）、固体样品粉碎机（XA-1型）、烘箱（定制640 L型）、标准筛65目（250 μm）、电子天平（PX1250DZH型）。

续表1

农药标准品主要有BHC（α-BHC、β-BHC、γ-BHC、δ-BHC）、DDT（p，p＇-DDE、o，p＇-DDE、o，p＇-DDD、p，p＇-DDD、o，p＇-DDT、p，p＇-DDT）、PCNB；氯化钠、乙腈、丙酮、正乙烷均为分析纯级。

1.2 方法

1.2.1 标准对照溶液的制备 精密称取BHC、DDT及PCNB农药标准品（精确至0.1 mg），用正乙烷稀释，逐一配成1 000 mg/L的单一农药标准储备液，根据各农药储备液在仪器上的响应值，逐一吸取一定体积的单一标准储备液，移入同一容量瓶中，用正乙烷稀释至刻度。精密量取一定量混合对照品溶液，用正乙烷分别稀释成浓度为5×10-6、10-5、2×10-5、5×10-5、10-4mg/mL的溶液。

1.2.2 样品溶液的制备 将样品在45℃电热恒温鼓风干燥箱中干燥4 h，粉碎过65目筛，精密称取2.000 0 g，置于50 mL离心管中，加10.0 mL乙腈和10.0 mL去离子水，手动涡旋2 min后超声处理10 min（功率300 W，频率40 kHz），静置冷却至室温，加少许适量NaCl后离心10 min，取上清液5.0 mL置于10 mL试管中，吹干。

过Florid柱：依次用丙酮∶正己烷（体积比为1∶9）溶液5.0 mL和正己烷溶液5.0 mL预淋洗Florid柱，当溶剂液面到达柱吸附层表面时，立即倒入待洗脱样品，用10 mL试管接收洗脱液，用6.0 mL丙酮∶正己烷（体积比为1∶9）冲洗烧杯后淋洗Florid柱，并重复1次。将装有淋洗液的试管置于氮吹仪上，氮吹蒸发至体积少于2.0 mL，用正乙烷定容至2.0 mL，在旋涡混合器上混匀后分别转至2个2 mL自动进样器的样品瓶中，待测。

1.2.3 气相色谱条件HP-5石英毛细管柱（30 mm×0.32 mm，0.25 μm，Agilent）；载气：高纯氮（N2）；进样口温度：210℃；检测器温度：300℃；柱升温程序：初始温度80℃（1 min），以30℃/min升至170℃，以5℃/min升至240℃，以20℃/min升至280℃，保持3 min；流速1.0 mL/min；进样量1 μL。

2 结果与分析

2.1 标准曲线的绘制

吸取已经制备好的浓度为5×10-6、10-5、2×10-5、5×10-5、10-4mg/mL的一系列标准溶液，按“1.2.3”中色谱条件进行检测，以质量浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，得到标准溶液的线性回归方程，同时得到检出限为1 μg/kg。线性回归方程见表2。由表2可知，所有标准品的回归方程的相关系数均在0.9以上，说明建立的回归方程均可靠。

表2 11种有机氯农药标准品回归方程

2.2 加样回收试验

精密称取2.000 0 g样品置于100 mL的具塞锥形瓶中，精密吸取0.5 mL的混合对照品溶液（100 μg/kg），加入到装有样品的锥形瓶中，其余步骤同样品溶液制备，制成回收样品溶液，进行测定，同时进行空白试样的测定，得到有机氯农药残留的平均回收率为70.0%～115.3%。

2.3 样品检测及安全性评价

精密称取53份样品制备成供试溶液，按照“1.2.3”中方法，对53份黄精样品中11种有机氯农药残留含量进行检测，结果见表3。由表3可以看出，有20个样品中被检出存在有机氯农药残留，包括β-BHC、γ-BHC、δ-BHC、PCNB、o，p＇-DDE、p，p＇-DDE、p，p＇-DDD、p，p＇-DDT共8种；没有检出的3种有机氯农药是α-BHC、o，p＇-DDD和o，p＇-DDT。云南省的27个黄精样品中，有11个样品检出有机氯农药残留，检出率占云南省样品的40.7%，占总检出样品的55.0%。其他省份的26份样品中，有17个样品没有检测出有机氯农药残留，9个样品检测出有机氯农药残留，除49号贵州凯里（湿）的样品检测出3种农药残留（o，p＇-DDE、p，p＇-DDE和p，p＇-DDT）和44号陕西汉中的样品检测出2种有机氯农药残留（γ-BHC和PCNB）外，其他7个地区的黄精样品都只检测出1种有机氯农药残留，包括β-BHC、γ-BHC、PCNB、o，p＇-DDE、p，p＇-DDE和p，p＇-DDT，检出率占总检出样品的45.0%。其中，有机氯农药检出率最多的是p，p＇-DDE，占总试验样品的18.87%。

表3 样品有机氯农药残留含量检测结果统计

试验样品中除云南省普洱市、丽江市玉龙县、文山市富宁县、昆明市宜良和重庆市潼南区是人工种植的外，其余的都是野生黄精。人工种植的黄精样品中只有普洱市（湿样）和重庆市（干样）中被检出有机氯农药残留，占总试验样品的9.43%；野生黄精样品中检出有机氯农药残留的样品占试验总样品的28.30%。

3 小结与讨论

根据GB2763—2019《食品安全国家标准 食品中农药最大残留限量》《药用植物及制剂进出口绿色行业标准》和2015版《中国药典》限量标准综合得出，中药材中总六六六残留含量不得超过0.1 μg/g；中药材中总滴滴涕残留含量不得超过0.1 μg/g；中药材中五氯硝基苯残留含量不得超过0.1 μg/g［14-16］。根据以上标准来看，所有样品的有机氯农药残留含量都在安全限量内，没有超出标准。从农药残留量数据方面来看，p，p＇-DDE在11种有机氯农药中对黄精污染的影响最大；部分人工种植的黄精有机氯农药残留种类较多，为种植生产厂生产过程中控制农药的使用和剂量的大小提供一定的参考。野生黄精中检出有机氯农药残留的样品占总野生黄精试验样品的41%，而野生黄精一般生长在深山野林里，远离农田人群，说明现在农药污染的严重性和普遍性，迫切需要市场监督管理部门加强监督管理和监管力度。

本试验结果显示，所测中药材黄精有机氯农药的残留较低且均处于安全限量内，人们可以放心食用。