黑骨藤化学成分的研究

余玺陈晨

（平顶山学院医学院，河南 平顶山467000）

黑骨藤Periploca Radix为萝摩科杠柳属植物西南杠柳的根或全株［1］，其味苦辛、性温，功效祛湿除痹、舒筋活络，用于治疗风湿性关节痛、强直性脊柱炎、跌打损伤等，其主要成分包括黄酮、神经酰胺、三萜、生物碱、强心苷、挥发油、苯丙素、甾体等［2］，具有抗炎镇痛、抗肿瘤、抗氧化、神经保护、抗过敏、提高免疫力、强心等作用［3-4］。党荣敏等［5］研究表明，黑骨藤可有效降低痛风性关节炎大鼠关节炎性反应，抑制滑膜细胞增生，改善关节滑膜功能。本实验对黑骨藤化学成分进行研究，从中分离得到14 个化合物，均为首次从该植物中发现。

1 材料

RTQ-X8.0 型质谱仪、AV-600 型核磁共振波谱仪（德国Bruker 公司）；GmbH153 型电子天平（德国Sartorius 公司）；Hpf-1722 型分析天平（美国Ohaus 公司）；Tlpt-152 型超声清洗器（瑞士Mettlr-Toledo 公司）；SEN-172 型旋转蒸发器（广东香山衡器集团股份有限公司）；YPL273 型恒温电热水浴锅（上海英展机电企业有限公司）。Sephadex LH-20（美 国Pharmacia公司）；100～200、300～400 目柱色谱硅胶（青岛海洋化工厂）。DMEM／F12 培养基（北京博尔生物技术有限公司）；DMSO 培养液（上海魁利生物技术有限公司）；甲氨蝶呤（澳大利亚Pfizer 公司）。黑骨藤Periploca Radix购于河南省平顶山市，经平顶山学院夏西超教授鉴定为为萝摩科杠柳属植物西南杠柳的根或全株。

2 提取与分离

取干燥黑骨藤35.7 kg，30 倍量90%乙醇加热回流提取3次，每次2 h，合并提取液，减压浓缩回收溶剂，得浸膏8.4 kg，超声分散于水中，配制成混悬液，依次用石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇萃取，萃取液减压浓缩成干浸膏，分别得石油醚部分（136.2 g，Fr.A）、二氯甲烷部分（114.3 g，Fr.B）、乙酸乙酯部分（109.4 g，Fr.C）、正丁醇部分（121.3 g，Fr.D）。

Fr.A 经100～200 目硅胶柱，以石油醚-丙酮-甲醇为流动相梯度洗脱，合并相似组分，得到7 个流分Fr.A1～Fr.A7。Fr.A3 经300～400 目硅胶柱，以石油醚-丙酮-甲醇为流动相梯度洗脱，合并相似组分，得到10 个流分Fr.A3-1～Fr.A3-10，Fr.A3-5 经300～400 目硅胶柱，以石油醚-丙酮（30∶70）为流动相洗脱，得化合物3（18 mg）；Fr.A3-9 经Sephadex LH-20柱，以氯仿-甲醇（5∶1）为流动相洗脱，得化合物2（23 mg）。

Fr.B 经100～200 目硅胶柱色谱，以石油醚-丙酮-甲醇为流动相梯度洗脱，合并相似组分，得到9 个流分Fr.B1～Fr.B9）。Fr.B3 经300～400 目硅胶柱，以石油醚-丙酮-甲醇为流动相梯度洗脱，合并相似组分，得到7 个流分Fr.B3-1～Fr.B3-7，Fr.B3-2 经300～400 目硅胶柱，以石油醚-丙酮-甲醇（10∶80∶10）为流动相洗脱，得化合物1（25 mg）；Fr.B3-4 经300～400 目硅胶柱，以石油醚-丙酮-甲醇（20∶70∶10）为流动相洗脱，得化合物4（22 mg）。Fr.B5 经300～400 目硅胶柱，以石油醚-丙酮-甲醇为流动相梯度洗脱，合并相似组分，得到8 个流分Fr.B5-1～Fr.B5-8，Fr.B5-3 经300～400 目硅胶柱，以石油醚-丙酮-甲醇（10∶70∶20）为流动相洗脱，得化合物11（22 mg）；Fr.B5-5 经300～400 目硅胶柱，以石油醚-丙酮-甲醇（10∶80∶10）为流动相洗脱，得化合物12（26 mg）。Fr.B6 经300～400 目硅胶柱，以石油醚-丙酮-甲醇为流动相梯度洗脱，合并相似组分，得到9 个流分Fr.B6-1～Fr.B6-9，Fr.B6-2 经300～400 目硅胶柱，以石油醚-丙酮-甲醇（10∶60∶30）为流动相洗脱，得化合物5（19 mg）；Fr.B6-7 经Sephadex LH-20 分离，以氯仿-甲醇（5∶1）为流动相洗脱，得化合物10（23 mg）。

Fr.C 经100～200 目硅胶柱，以石油醚-丙酮-甲醇为流动相梯度洗脱，合并相似组分，得到8 个流分Fr.C1～Fr.C8。Fr.C2 经300～400 目硅胶柱，以石油醚-丙酮-甲醇为流动相梯度洗脱，合并相似组分，得到9 个流分Fr.C2-1～Fr.C2-9，Fr.C2-2经300～400 目硅胶柱，以石油醚-丙酮-甲醇（10∶70∶20）为流动相洗脱，得化合物6（21 mg）；Fr.C2-5 经300～400 目硅胶柱，以石油醚-丙酮-甲醇（10∶40∶50）为流动相洗脱，得化合物14（22 mg）；Fr.C2-8 经Sephadex LH-20，以氯仿-甲醇（5∶1）为流动相洗脱，得化合物9（29 mg）。Fr.C4 经300～400 目硅胶柱，以石油醚-丙酮-甲醇为流动相梯度洗脱，合并相似组分，得到7 个流分Fr.C4-1～Fr.C4-7，Fr.C4-3 经300～400 目硅胶柱，以石油醚-丙酮-甲醇（10∶60∶30）为流动相洗脱，得化合物7（32 mg）。Fr.C7 经300～400 目硅胶柱，以石油醚-丙酮-甲醇为流动相洗脱，合并相似组分，得到8 个流分Fr.C7-1～Fr.C7-8，Fr.C7-3经300～400 目硅胶柱，以石油醚-丙酮-甲醇（10∶60∶30）为流动相洗脱，得化合物8（18 mg）；Fr.C7-5 经300～400 目硅胶柱，以石油醚-丙酮-甲醇（10∶30∶60）为流动相洗脱，得化合物13（28 mg）。

3 结构鉴定

化合物1：无色针晶，ESI-MSm／z：201.2［M＋Na］＋。1H-NMR（CD3OD，600 MHz）δ：11.14（1H，s，H-9），7.91（1H，d，J＝12.0 Hz，H-7），7.54（1H，dd，J＝8.2 Hz，H-6），7.35（1H，td，J＝8.2 Hz，H-4），6.95（1H，dd，J＝8.2 Hz，H-3），6.72（1H，td，J＝8.2 Hz，H-5），6.46（1H，dd，J＝12.0，2.2 Hz，H-8），3.91（3H，s，H-10）；13C-NMR（CD3OD，150 MHz）δ：119.2（C-1），158.1（C-2），110.3（C-3），130.5（C-4），120.3（C-5），127.1（C-6），139.1（C-7），119.4（C-8），166.3（C-9），54.2（C-10）。与文献［6］报道的邻甲氧基肉桂酸基本一致。

化合物2：无色粉末，ESI-MSm／z：380.7［M＋Na］＋。1H-NMR（CD3OD，600 MHz）δ：7.62（1H，dd，J＝12.0，8.2 Hz，H-6′），7.47（1H，d，J＝8.2 Hz，H-2′），6.71（1H，d，J＝12.0 Hz，H-5′），4.24（1H，d，J＝8.2 Hz，Glc-H-1），4.19（1H，m，H-3），4.02（1H，m，H-3），3.74（3H，s，3′-OCH3），3.68（1H，dd，J＝12.0，2.2 Hz，Glc-H-6α），3.59（1H，J＝12.0，8.2 Hz，Glc-H-6β），3.28（2H，m，H-2），3.24～3.12（3H，m，Glc-H-3～5），3.03（1H，m，Glc-H-2）；13C-NMR（CD3OD，150 MHz）δ：135.4（C-1），70.1（C-2），67.2（C-3），128.4（C-1′），116.3（C-2′），153.1（C-3′），153.7（C-4′），112.5（C-5′），125.2（C-6′），105.1（Glc-C-1），74.7（Glc-C-2），77.8（Glc-C-3），72.4（Glc-C-4），78.1（Glc-C-5），63.4（Glc-C-6），55.7（3′-OCH3）。与文献 ［7 ］报道的 βhydroxypropiovanillone-3-O-β-D-glucopyranoside 基本一致。

化合物3：白色粉末，ESI-MSm／z：292.8［M＋Na］＋。1H-NMR（CD3OD，600 MHz）δ：7.43～7.38（2H，m，H-2，6），7.35～7.29（2H，m，H-3，5），7.27～7.21（1H，m，H-4），4.76（1H，d，J＝8.2 Hz，H-7），4.62（1H，d，J＝8.2 Hz，H-7），4.17（1H，d，J＝8.2 Hz，H-1′），3.73（1H，dd，J＝12.0，8.2 Hz，H-6′α），3.52（1H，dd，J＝12.0，8.2 Hz，H-6′β），3.17～2.97（4H，m，H-2′～5′）；13C-NMR（CD3OD，150 MHz）δ：126.8（C-1），129.3（C-2），128.1（C-3），137.5（C-4），128.1（C-5），129.3（C-6），70.3（C-7），100.8（C-1′），74.1（C-2′），76.8（C-3′），69.4（C-4′），77.1（C-5′），60.8（C-6′）。与文献［7］报道的苯甲醇-β-D-葡萄糖苷基本一致。

化合物4：黄色油状物，ESI-MSm／z：443.1［M＋Na］＋。1H-NMR（CD3OD，600 MHz）δ：6.49（1H，s，H-2′），6.41（2H，s，H-2，6），3.92（1H，d，J＝8.2 Hz，H-7），3.86（3H，s，3′-OCH3），3.79（6H，s，3，5-OCH3），3.71（1H，m，H-9α），3.68（1H，m，H-9′α），3.61（1H，m，H-9′β），3.45（1H，dd，J＝12.0，8.2 Hz，H-9β），3.31（3H，s，5′-OCH3），2.63（2H，m，H-7′），1.92（1H，m，H-8），1.73（1H，m，H-8′）；13C-NMR（CD3OD，150 MHz）δ：139.1（C-1），129.5（C-2），147.2（C-3），132.6（C-4），113.7（C-5），106.3（C-6），42.8（C-7），50.3（C-8），63.7（C-9），130.2（C-1′），106.1（C-2′），145.8（C-3′），136.4（C-4′），146.3（C-5′），126.1（C-6′），34.2（C-7′），39.1（C-8′），67.3（C-9′），57.2（3-OCH3），57.2（5-OCH3），56.1（3′-OCH3），60.2（5′-OCH3）。与文献［8］报道的lyoniresinol 基本一致。

化合物5：白色油状物，ESI-MSm／z：249.1［M＋Na］＋。1H-NMR（CD3OD，600 MHz）δ：5.79（1H，dd，J＝12.0，8.2 Hz，H-8），5.68（1H，d，J＝8.2 Hz，H-7），4.41（1H，m，H-9），2.80（1H，d，J＝8.2 Hz，H-2α），2.39（1H，d，J＝8.2 Hz，H-4α），2.19（1H，m，H-5），2.07（1H，d，J＝8.2 Hz，H-4β），1.69（1H，d，J＝12.0 Hz，H-2β），1.31（3H，d，J＝8.2 Hz，H-10），1.15（3H，s，H-12），1.03（3H，s，H-11），0.87（3H，d，J＝8.2 Hz，H-13）；13C-NMR（CD3OD，150 MHz）δ：43.1（C-1），50.8（C-2），209.4（C-3），46.1（C-4），37.2（C-5），76.8（C-6），132.4（C-7），134.7（C-8），69.1（C-9），24.2（C-10），25.1（C-11），25.7（C-12），16.1（C-13）。与文献［9］报道的4，5-dihydroblumenol A 基本一致。

化合物6：黄色粉末，ESI-MSm／z：454.8［M＋Na］＋。1H-NMR（CD3OD，600 MHz）δ：8.12（1H，d，J＝12.0 Hz，H-8），7.52（1H，d，J＝8.2 Hz，H-5），7.36（1H，s，H-4），7.08（1H，dd，J＝12.0，8.2 Hz，H-7），5.06（1H，d，J＝8.2 Hz，H-1′），2.08（3H，s，2-CH3）；13C-NMR（CD3OD，150 MHz）δ：165.3（C-1），119.2（C-2），159.4（C-3），106.1（C-4），112.9（C-5），160.8（C-6），122.4（C-7），130.1（C-8），185.6（C-9），182.5（C-10），99.6（C-1′），74.1（C-2′），75.2（C-3′），70.1（C-4′），76.8（C-5′），59.2（C-6′），52.4（2-CH3）。与文献［10］报道的2-methyl -1，3，6-trihydroxy-9，10-anthraquinone-3-O-β-glucoside 基本一致。

化合物7：白色粉末，ESI-MSm／z：399.7［M＋Na］＋。1H-NMR（CD3OD，600 MHz）δ：5.31（1H，s，H-14），4.02（1H，t，J＝8.2 Hz，H-15），3.91（1H，t，J＝8.2 Hz，H-16a），3.76（1H，m，H-2），3.68（1H，t，J＝8.2 Hz，H-16b），3.57（1H，d，J＝12.0 Hz，H-19a），3.22（1H，d，J＝12.0 Hz，H-19b），1.41（3H，s，H-22），1.30（3H，s，H-23），1.12（3H，s，H-18），0.91（3H，s，H-17），0.79（3H，s，H-20）；13C-NMR（CD3OD，150 MHz）δ：52.3（C-1），66.4（C-2），43.8（C-3），40.1（C-4），54.8（C-5），23.5（C-6），35.8（C-7），139.2（C-8），49.3（C-9），42.3（C-10），22.7（C-11），34.2（C-12），36.1（C-13），128.2（C-14），80.3（C-15），64.1（C-16），25.2（C-17），26.1（C-18），65.1（C-19），18.4（C-20），109.4（C-21），27.3（C-22），26.1（C-23）。与文献 ［11］报道的isopropylidenkirenol 基本一致。

化合物8：白色粉末，ESI-MSm／z：185.2［M＋Na］＋。1H-NMR（CD3OD，600 MHz）δ：7.51（2H，d，J＝8.2 Hz，H-2，6），7.39（1H，d，J＝12.0 Hz，H-3），7.18（1H，m，H-8），6.51（1H，d，J＝12.0 Hz，H-5），3.42（3H，s，3-OCH3），3.09（1H，s，H-9）；13C-NMR（CD3OD，150 MHz）δ：136.1（C-1），126.8（C-2），129.1（C-3），141.6（C-4），129.1（C-5），126.8（C-6），137.2（C-7），127.3（C-8），173.1（C-9），49.2（3-OCH3）。与文献［12］报道的2-propenoic acid-3-phenyl-methyl ester 基本一致。

化合物9：无色针晶，ESI-MSm／z：271.4［M＋Na］＋。1H-NMR（CD3OD，600 MHz）δ：6.91（1H，s，H-6），6.82（2H，d，J＝8.2 Hz，H-2，5），4.58（1H，d，J＝2.2 Hz，H-7），4.51（1H，dd，J＝12.0，8.2 Hz，H-9a），4.18（2H，m，H-9b，H-9′a），4.24（1H，dd，J＝8.2，2.2 Hz，H-9′b），3.37（1H，m，H-8），3.12（1H，m，H-8′）；13C-NMR（CD3OD，150 MHz）δ：133.1（C-1），120.6（C-2），109.1（C-3），148.2（C-4），147.6（C-5），107.1（C-6），87.3（C-7），49.1（C-8），69.4（C-9），176.9（C-7′），45.8（C-8′），70.1（C-9′）。与文献［13］报道的acuminatolide基本一致。

化合物10：无色油状物，ESI-MSm／z：271.2［M＋Na］＋。1H-NMR（CD3OD，600 MHz）δ：7.02（1H，d，J＝12.0 Hz，H-5），6.71（1H，d，J＝12.0 Hz，H-6），6.53（1H，s，H-2），6.12（1H，m，H-3′），4.38（1H，dd，J＝8.2，2.2 Hz，H-9α），3.93（1H，dd，J＝8.2，2.2 Hz，H-9β），3.37（1H，m，H-8），2.28（3H，s，H-7），1.94（3H，d，J＝8.2 Hz，H-4′），1.65（3H，s，H-5′），1.41（3H，d，J＝8.2 Hz，H-10）；13C-NMR（CD3OD，150 MHz）δ：139.2（C-1），117.6（C-2），153.8（C-3），128.1（C-4），124.6（C-5），120.8（C-6），20.7（C-7），31.9（C-8），70.2（C-9），17.1（C-10），170.2（C-1′），126.8（C-2′），140.1（C-3′），15.7（C-4′），21.3（C-5′）。与文献［14］报道的9-angeloyloxythymol 基本一致。

化合物11：棕色粉末，ESI-MSm／z：367.2［M＋Na］＋。1H-NMR（CD3OD，600 MHz）δ：13.62（1H，s，6-OH），6.31（1H，brs，H-3），6.09（1H，d，J＝8.2 Hz，H-5），5.03（1H，d，J＝8.2 Hz，H-1′），3.91（3H，s，H-2-OCH3），3.80（1H，m，H-6′a），3.59（1H，m，H-6′b），3.53～3.46（3H，m，H-2′，3′，5′），3.27（1H，m，H-4′）；13C-NMR（CD3OD，150 MHz）δ：105.8（C-1），166.1（C-2），91.7（C-3），164.3（C-4），95.8（C-5），163.1（C-6），202.5（C-7），33.2（C-8），100.3（C-1′），72.8（C-2′），76.5（C-3′），70.1（C-4′），77.1（C-5′），59.3（C-6′），55.8（2-OCH3）。以上数据与文献［15］报道的annphenone 基本一致。

化合物12：黄色粉末，ESI-MSm／z：633.7［M＋Na］＋。1H-NMR（CD3OD，600 MHz）δ：7.61（1H，dd，J＝12.0，8.2 Hz，H-6′），7.59（1H，d，J＝8.2 Hz，H-2′），6.91（1H，d，J＝12.0 Hz，H-5′），6.41（1H，d，J＝2.2 Hz，H-8），6.09（1H，d，J＝2.2 Hz，H-6），5.28（1H，d，J＝8.2 Hz，H-1‴），4.41（1H，d，J＝12.0 Hz，H-1‴），3.69～3.18（10H，H-2″～H-6″，H-2″～H-5‴），1.02（3H，d，J＝12.0 Hz，6‴-CH3）；13CNMR（CD3OD，150 MHz）δ：132.5（C-1），157.2（C-2），132.7（C-3），176.8（C-4），161.5（C-5），97.1（C-6），163.9（C-7），94.1（C-8），157.1（C-9），104.2（C-10），120.8（C-1′），114.9（C-2′），145.1（C-3′），149.1（C-4′），160.7（C-5′），122.1（C-6′），100.8（C-1″），73.8（C-2″），76.1（C-3″），71.3（C-4″），75.8（C-5″），66.5（C-6″），99.8（C-1‴），69.2（C-2‴），67.3（C-3‴），72.1（C-4‴），68.4（C-5‴），18.1（C-6‴）。与文献 ［16］报道的芦丁基本一致。

化合物13：棕色粉末，ESI-MSm／z：581.3［M＋Na］＋。1H-NMR（CD3OD，600 MHz）δ：7.13（2H，s，H-2‴，6‴），7.02（1H，d，J＝12.0 Hz，H-5′），6.91（1H，d，J＝8.2 Hz，H-2′），6.83（1H，d，J＝12.0 Hz，H-8），6.73（1H，d，J＝12.0 Hz，H-7），6.54（1H，dd，J＝12.0，8.2 Hz，H-6′），6.41（1H，d，J＝8.2 Hz，H-2），6.31（2H，d，J＝8.2 Hz，H-6），6.14（1H，t，J＝8.2 Hz，H-4），4.83（1H，d，J＝8.2 Hz，H-1″），4.61（1H，dd，J＝8.2，2.2 Hz，H-6″a），4.27（1H，dd，J＝8.2，2.2 Hz，H-6″b），3.75（1H，m，H-5″），3.51（1H，m，H-2″），3.47（1H，m，H-3″），3.29（1H，m，H-4″）；13C-NMR（CD3OD，150 MHz）δ：139.2（C-1），105.8（C-2），160.3（C-3），103.5（C-4），161.2（C-5），105.8（C-6），127.4（C-7），130.2（C-8），136.1（C-1′），115.3（C-2′），147.4（C-3′），145.7（C-4′），117.2（C-5′），120.3（C-6′），104.1（C-1″），75.2（C-2″），78.1（C-3″），71.9（C-4″），76.3（C-5″），65.1（C-6″），120.3（C-1‴），109.8（C-2‴），147.2（C-3‴），139.6（C-4‴），147.2（C-5‴），109.4（C-6‴），167.9（C-7‴）。与文献［17］报道的piceatannol 4′-O-（6″-O-galloyl）-β-Dglucopyranoside 基本一致。

化合物14：白色粉末，ESI-MSm／z：302.7［M＋Na］＋。1H-NMR（CD3OD，600 MHz）δ：7.08（1H，s，H-12），3.92（1H，s，H-5），3.73（1H，d，J＝12.0 Hz，H-9β），3.02（1H，dd，J＝12.0，8.2 Hz，H-1），2.91（1H，d，J＝12.0 Hz，H-9α），2.38（1H，m，H-3α），2.18（1H，m，H-2α），2.09（3H，s，H-13），1.63（1H，m，H-3β），1.49（1H，m，H-2β），1.28（3H，s，H-15），1.21（3H，s，H-14）；13C-NMR（CD3OD，150 MHz）δ：70.3（C-1），24.1（C-2），35.8（C-3），64.3（C-4），62.9（C-5），188.5（C-6），123.1（C-7），155.2（C-8），40.1（C-9），57.9（C-10），124.1（C-11），139.2（C-12），11.3（C-13），16.7（C-14），18.1（C-15）。与文献［12］报道的curcuzederone 基本一致。

5 结论

本研究从黑骨藤中分离得到14 个化合物，均为首次从该植物中分离得到，可丰富其化学成分的物质基础。