甲状腺乳头状癌术后血清缺氧诱导因子2α和可溶性白介素-2受体的表达与预后的关系研究

魏 坦

惠州仲恺高新区人民医院，广东 惠州 516000

甲状腺是人体最大的内分泌腺体，也是身体代谢的主 要调控器官。甲状腺癌是临床常见的甲状腺恶性肿瘤，占全身恶性肿瘤的1%，其发病率与地区、种族、性别有关，其中女性发病率较高［1］。甲状腺癌分型复杂，且不同分型甲状腺癌病理发展规律不同，部分临床症状较为隐匿，且生长缓慢，已引起学者的广泛关注［2］。国家癌症中心研究［3］表明，近年来，我国甲状腺癌发病率呈上升趋势，且乳头状腺癌在甲状腺癌发病率的构成比重逐年升高。甲状腺乳头状癌病情进展缓慢，外科手术治疗的预后尚可。甲状腺乳头状癌术后的复发和转移是导致患者死亡的主要原因。有研究［4］发现，缺氧诱导因子2α（HIF-2α）在肿瘤细胞中发挥着重要作用，其表达水平与患者的预后密切相关。慢性炎症反应参与恶性肿瘤的发生发展过程，其中可溶性白介素-2受体（SIL-2R）是白细胞介素家族较重要的细胞因子，其与肺癌、喉癌、消化系统肿瘤等多种恶性肿瘤有关［5］。本研究旨在探讨甲状腺乳头状癌术后血清HIF-2α、SIL-2R的表达与预后的关系，现将结果报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取惠州仲恺高新区人民医院2018年1月―2020年10月收治的60例甲状腺乳头状癌患者及60例术后病理证实的良性甲状腺结节患者作为研究对象，分别为乳头状癌组和良性组。其中乳头状癌组男20例，女40例；年龄30～55岁，平均年龄（45.22±4.12）岁；身体质量指数（BMI）16～26 kg/m2，平均BMI（22.35±2.25）kg/m2；病程1个月～4年，平均病程（1.93±0.35）年。良性组男22例，女38例；年龄31～55岁，平均年龄（45.34±4.10）岁；BMI 17～25 kg/m2，平均BMI（22.22±2.20）kg/m2；病程1个月～4年，平均病程（2.01±0.30）年。两组患者一般资料具有可比性（P＞0.05）。本研究经医院医学伦理委员会批准通过。纳入标准：（1）符合中华医学会内分泌学分会制定的《甲状腺结节和分化型甲状腺癌诊治指南》［6］中关于甲状腺乳头状癌和良性甲状腺结节诊断标准。（2）临床资料齐全。（3）外科手术治疗适应证。（4）患者及家属均知情同意本项研究等。排除标准：（1）妊娠期、哺乳期女性。（2）合并其他原发肿瘤。（3）全身感染性疾病。（4）严重凝血功能障碍。（5）既往有颈部手术史。（6）入组前甲状腺乳头状癌患者接受过放化疗。（7）甲状腺乳头状癌已出现远端转移。（8）酒精及药物滥用史。

1.2 方法

1.2.1 收集临床资料 收集甲状腺乳头状癌患者的吸烟史、饮酒史、临床分期、分化程度、随访复发等一般资料。患者出院后，每3个月采用门诊复查、电话访问等多种方式的随访，随访时间1年，随访日期截至2021年10月，随访率为100%。

1.2.2 血清HIF-2α水平测定 以磷酸盐缓冲溶液（PBS）作空白对照，切片脱蜡，灭活内源性过氧化物，PBS冲洗，加入HIF-2α一抗，4℃过夜，第2天PBS冲洗，苏木素复染，碳酸锂返蓝，二甲苯透明，树胶封片。结果判读：深黄色3分，棕黄色2分，淡黄色1分，无色0分，细胞阳性率在50%以上为3分，25%～50%为2分，5%～25%为1分，5%以下为0分。两项得分相乘在3分及以上为阳性。

1.2.3 血清SIL-2R水平测定 抽取患者清晨空腹外周静脉血5 mL，缓慢注入含乙二胺四乙酸二钠的干燥食管，3 000 r/min离心10 min，置于低温环境保存备用，采用全自动酶标仪（美国BIO-RAD，型号680），使用酶联免疫吸附法检测血清SIL-2R水平。所有标本经10%甲醇固定，HE染色及免疫组化染色，细胞核和细胞质内呈棕黄色颗粒为阳性，阳性细胞数在20%及以上为阳性，阳性细胞数在20%以下为阴性。

1.3 观察指标

比较乳头状癌组和良性组患者血清HIF-2α、SIL-2R水平阳性率，比较乳头状癌组患者血清HIF-2α和SIL-2R水平与临床病理特征的关系及乳头状癌组患者预后复发情况与血清HIF-2α、SIL-2R水平阳性表达的关系。

1.4 统计学方法

采用SPSS 22.0软件进行统计分析。计量资料以均数±标准差（±s）表示，组间比较采用t检验。计数资料以例数和百分比（%）表示，组间比较采用χ2检验。Pearson相关系数进行相关性分析，多因素分析采用logistic回归分析。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组患者血清HIF-2α、SIL-2R水平阳性情况

乳头状癌组血清HIF-2α、SIL-2R水平阳性率高于良性组，差异有统计学意义（P＜0.05），见表1。

表1 两组患者血清HIF-2α、SIL-2R水平阳性情况 例（%）

2.2 乳头状癌组血清HIF-2α水平与临床病理特征的关系

乳头状癌分化程度低、复发患者血清HIF-2α阳性表达率高于分化程度高、无复发者，差异有统计学意义（P＜0.05），血清HIF-2α阳性表达率在其他病理特征间的比较，差异无统计学意义（P＞0.05），见表2。

表2 乳头状癌组血清HIF-2α水平与临床病理特征的关系 例（%）

2.3 乳头状癌组血清SIL-2R水平与临床病理特征的关系

乳头状癌分化程度低、复发患者血清SIL-2R阳性表达率高于分化程度高、无复发者，差异有统计学意义（P＜0.05），血清SIL-2R阳性表达率在其他病理特征间的比较，差异无统计学意义（P＞0.05），见表3。

表3 乳头状癌组血清SIL-2R水平与临床病理特征的关系 例（%）

2.4 乳头状癌组预后复发情况与血清HIF-2α、SIL-2R水平阳性表达的关系

乳头状癌组患者预后复发与血清HIF-2α、SIL-2R水平均呈正相关（P＜0.05），见表4。

表4 乳头状癌组预后复发情况与血清HIF-2α、SIL-2R水平阳性表达的关系

2.5 血清HIF-2α、SIL-2R水平表达与患者病理特征的多因素分析

logistic多因素分析结果显示，甲状腺乳头状癌组织中血清HIF-2α、SIL-2R阳性表达是影响分化程度和复发情况的独立因素（P＜0.05），见表5。

表5 血清HIF-2α、SIL-2R水平表达与患者病理特征的多因素分析

3 讨论

甲状腺癌的病因主要有缺碘、相关激素及放射线的慢性刺激、家族遗传等，可发生在任何年龄段［7］。甲状腺癌的早期特征不明显，甲状腺内可触及的表面不平的肿块是主要临床表现，给临床诊治造成一定的难度，容易耽误治疗，影响预后［8］。该疾病多见于女性，且以青中年人为主，由于女性甲状腺癌常合并其他疾病，缺乏质硬或固定等表现，导致临床缺乏对年轻女性甲状腺癌的重视程度，通常确诊时已到中晚期［9］。近年来，甲状腺癌的发病率不断增高，其病理类型占比也有显著变化，乳头状癌仍占最高比重，其发病率显著升高，其他病理类型占比有所下降，相比于男性甲状腺癌，女性甲状腺癌发病率和恶性程度更高，预后也更差［10］。因此，分析甲状腺癌的生物学机制，选择合适的分子标志物，对协助患者治疗和判断预后具有重要意义。近年来，随着分子生物学和免疫学的不断发展，甲状腺乳头状癌的研究逐渐受到临床关注，显现出较高的应用价值，但对于甲状腺乳头状癌的分子生物学机制尚处于探索阶段［11］。

缺氧诱导因子是人体普遍存在的一类转录因子，包括HIF-1α和HIF-2α，两种生物学作用不同，目前，临床关于HIF-1α的研究较多，而HIF-2α的研究相对较少［12］。缺氧是肿瘤恶性增殖过程中的普遍现象，肿瘤细胞能够通过活化缺氧诱导因子对缺氧产生应激反应［13］。缺氧诱导因子对肿瘤细胞的增殖机制涉及细胞分化、细胞代谢等生物过程［14］。缺氧状态改下α和β亚基在细胞核内形成活性状态的HIF-2，其可激活血管内皮生长因子发挥作用。在甲状腺癌的侵袭和转移过程中，有多种分子共同参与使肿瘤增殖，进而发生迁移。SIL-2R是一种复合性黏蛋白，其能够特异性的与IL-2结合，抑制机体的免疫反应，减弱机体的内分泌效应，抑制已活化的T细胞的克隆化扩增［15］。因此，血清HIF-2α和SIL-2R均参与了甲状腺乳头状癌的发生和发展过程［16］。本研究结果显示，与良性组比较，乳头状癌组血清HIF-2α、SIL-2R水平阳性率升高，提示血清HIF-2α、SIL-2R水平的表达与甲状腺乳头状癌的发生密切相关。本研究结果显示，乳头状癌分化程度低、复发患者血清HIF-2α阳性表达率和SIL-2R阳性表达率高于分化程度高、无复发者，初步说明了甲状腺乳头状癌患者血清HIF-2α、SIL-2R水平与分化程度和复发有着密切关系。进一步Pearson相关系数分析提示，乳头状癌组患者预后复发与血清HIF-2α、SIL-2R水平均呈正相关，甲状腺乳头状癌组织中血清HIF-2α、SIL-2R阳性表达是影响分化程度和复发情况的独立因素，表明血清HIF-2α、SIL-2R在甲状腺乳头状癌中的过度表达与分化程度和复发情况有关，术后严密监测血清HIF-2α、SIL-2R表达情况有利于治疗方案的制定，在预后中有一定临床价值［17］。HIF-2α可参与甲状腺乳头状癌细胞的浸润和转移，其水平越高，提示肿瘤的恶性程度越高，这可能与肿瘤内部缺氧导致实体瘤快速生长出现的转移有关［18］。多数患者认为SIL-2R是某种酶进入血液形成的，而不是死亡细胞释放，机体中的SIL-2R抑制了肿瘤患者的细胞免疫反应，因此，可认为SIL-2R可作为恶性肿瘤的活性标志［19］。以往的研究［20-21］也证实，肿瘤恶性程度越高的患者预后越差，因此，血清HIF-2α、SIL-2R与甲状腺乳头状癌患者的预后密切相关。但本研究存在以下不足之处：（1）未进行大样本研究。（2）本研究所选样本人员均经过家属同意才可以进行，具有一定的局限性。（3）本研究所纳入的研究时间间隔较短，未进行多时间段的实验研究，故需要后续学者进行多中心、大样本及较长的时间跨度或者多时间段的进一步深入研究。

综上所述，血清HIF-2α、SIL-2R在甲状腺乳头状癌中的过度表达与分化程度和复发情况有关，术后严密监测血清HIF-2α、SIL-2R表达情况有利于治疗方案的制定。