山西某地区由出血性大肠杆菌引发麋鹿死亡的分析报告

张 卓，李金邦，孙乐天，霍占锁

（太原动物园，山西 太原 030009）

大肠埃希氏菌（E.coli）通常称为大肠杆菌，是埃希菌属中的一类，为革兰氏阴性无芽孢的直杆菌，两端钝圆、周身鞭毛，为兼性厌氧菌，常见于温血生物的下肠。大肠杆菌广泛分布在自然界，大多数是不致病菌，附生于肠道内为正常菌群。某些血清型的致病性强，大致分为5类：致病性大肠杆菌（EPEC）、肠产毒性大肠杆菌（ETEC）、肠侵袭性大肠杆菌（EIEC）、肠出血性大肠杆菌（EHEC）和肠黏附性大肠杆菌（EAEC）。其中，肠出血性大肠杆菌（Enterohemorrhagic E.coli，EHEC）是一种人畜共患病，被感染的病人、带菌动物等均可传播本病，较常见的易感动物为牛、羊、鸡、狗、猪等家畜，也有从鹅、马、鹿的粪便中分离出此菌的报道。出血性肠炎在我国大部分鹿类园区时有发生，成为对我国养鹿业威胁较大的传染病之一[1]。

麋鹿（Elaphurus davidianus）隶属偶蹄目（Artiodacty）鹿科（Cervidae）鹿亚科麋鹿属，原产于中国长江中下游沼泽地带。2021年2月份，山西某养殖鹿场死亡2只麋鹿，通过临床症状和病理变化的分析，以及实验室诊断等，明确死因，为今后麋鹿的饲养和疾病预防工作提供参考。

1 发病情况

该鹿区共饲养20头麋鹿，分3个圈，发生疾病的是其中一个圈舍，内饲养有6头麋鹿。据该场人员介绍，2021年2月12日上午突然发现两只麋鹿状态不佳，其中一只♂7岁麋鹿走路时出现跛行的症状；一只♀6岁麋鹿出现精神沉郁、少食的症状。后于13日及15日这两只麋鹿先后出现不食，精神不振、头垂地常卧、拉血便的症状，排泄物为带有黏液和暗红色血液的坨状粪便。15日上午♀麋鹿死亡，20日上午♂麋鹿死亡。发病期间圈内剩余4只麋鹿精神状态一般，采食较平日减少，但未发现拉血便情况。

2 剖检情况

对病死的两只麋鹿病理解剖时发现：

心脏明显肿大、心冠脂肪处有少量出血点、心房内壁有出血点（图1A）；

肝脏边缘钝圆，轻微肿大（图1B）；

肺脏表面轻微出血；肾脏包膜不易剥离，质脆（图1C），皮质与髓质间的边界不清；肠系膜广泛性点状出血，淋巴结肿大；

小肠弥漫性出血坏死，内有血性内容物；部分肠段胀气，小肠内容物呈暗红色液体（图1D）。

图1 麋鹿尸体剖检结果

3 实验室诊断

3.1 细菌分离培养及镜检

在超净工作台内，无菌操作，使用接种环在心、肝、肾和肠道等病变组织取样，划线接种于血平板和中国蓝琼脂培养基（购于上海广锐生物科技有限公司），于 37℃需氧条件下培养18～24 h，观察菌落形态，相互对照后发现，菌落在血平板和中国蓝培养基上均生长良好，血平板上出现圆形，稍凸，灰白色不透明菌落，在中国蓝平板上出现蓝色菌落，挑取单个菌落进行革兰氏染色、镜检后，显微镜下可见细菌为革兰氏阴性，菌体中等大小、两端钝圆短杆菌，基本符合肠出血性大肠杆菌的特点。

3.2 细菌生化特性鉴定

在超净工作台内，利用细菌微量生化反应管，对所分离的菌株进行生化指标测定。结果表明该细菌能分解葡萄糖乳糖与靛基质、鸟氨酸、赖氨酸、卫矛醇反应；不与苯丙氨酸、枸橼酸盐、尿素、硫化氢反应。这些生化鉴定结果与大肠杆菌生物学特征相符，表明该菌极有可能是出血性大肠杆菌。

3.3 药敏试验

3.3.1 方法

采用纸片扩散法，按K-B法要求操作，35℃温箱中培养18～24h后，测抑菌圈直径。判断标准，参照K-B法药敏试验标准，抑菌圈直径≧18mm者为敏感（S）；抑菌圈直径13～17mm者为中敏（M）；抑菌圈直径＜12mm者为耐药（R）。

3.3.2 结果

实验结果表明该分离株对头孢噻肟和庆大霉素中敏，头孢曲松、奥美拉唑和庆大霉素等敏感，详见表1。

表1 肠出血性大肠杆菌对抗生素的敏感程度

4 治疗

（1）由于病鹿于2月12日发现少食、精神沉郁，口服健胃消食片（4.8g/次），2次/d。饮水中添加电解多维（5g/10kg），喝完再续。

（2）母鹿于2月1 3日发现拉血便后单圈饲养，治疗药物更换为：肌内注射酚磺乙胺注射液（1.25g∕次），2次/d；肌内注射维生素k1注射液（50mg∕次），2次/d；肌内注射盐酸林可霉素注射液（10mg∕kg），2次/d。由于病情较为严重，在及时治疗的同时，采集带血粪便进行实验室检查，但因病料从地面采集，污染严重，未培养出有效菌种。

（3）母麋鹿于2月14日，对其进行补液治疗，静脉滴注0.9%生理盐水，输液中添加盐酸林可霉素注射液（10mg/kg），2次/d。并肌内注酚磺乙胺注射液（1.25g∕次），2次/d；维生素k1注射液（50mg/次），2次/d。

发现母麋鹿血便后，公麋鹿采取预防性治疗，盐酸林可霉素注射液（10mg∕kg），2次/d。

（4）母麋鹿病程较快，治疗效果不佳，于2月15日死亡。采集心、肝、肾及肠道等病变组织重新进行细菌培养和药敏试验。

同时，为预防其他5只麋鹿不受感染，饮水中添加盐酸土霉素可溶性粉（1g/500ml），饲料中添加电解多维（1g/kg）。也为减少治疗期间麋鹿的应激反应。饲料也将苜蓿颗粒更换为易消化的谷草、槐树叶和东北草。

2月18日，根据药敏结果治疗药物更换为：肌内注射庆大霉素（400mg/次），2次/d；酚磺乙胺注射液（1.25g/次），2次/d；维生素k1注射液（50mg/次）， 2次/d。但治疗效果欠佳，公麋鹿1月20日死亡。

5 讨论

本病在我国自然保护区、野生动物场及动物园的斑马、象、鹿中均有发生，被称为“猝死症”[3]。因此，早期发现，及时诊断和治疗是控制该病的关键[4]。文中两只麋鹿发生死亡，原因分析可能是早期症状不典型，未出现水样腹泻和出血性肠炎，对其重视程度不够，错过了治疗的“黄金时期”，也可能是天气寒冷食欲减退等多种原因混合引发。圈内剩余4只麋鹿由于治疗及时，配合良好的饲养管理，均已好转。

在饲养中要以预防为主，防重于治。具体的发病机制大体可以总结为4点：

多雨季节，雨水未及时清理，饮到不洁净水；

季节温差较大，气温骤变，如寒冷、炎热、干燥等；

突然大量变换饲料种类或饲喂方法，如在北方冬草和青草的转换上，应慢慢递增或递减；

有应激刺激如换舍，断奶，换环境等。尽量避免上述发病原因，可以有效减少患病的几率。

在诊断时，也应与产气荚膜梭菌及巴氏杆菌引起的鹿出血性肠炎区分清楚，避免误诊。由于死亡速度较快，治疗时抗生素的选择需要根据药敏试验的结果。本报告中，药敏试验结果对头孢噻肟和庆大霉素中敏，头孢曲松、奥美拉唑和庆大霉素等敏感，而有些地区对养殖场送检的病死动物进行细菌分离之后，阿米卡星的敏感度最高，与本实验结果不同，原因分析可能是不同地区用药不同导致的敏感性存在差异[5]，或是动物品种的不同导致敏感性也不尽相同。

EHEC主要会通过粪口途径传播，动物之间可以通过相互接触、共食共饮污染的草、水等进行相互传播，鸟类和禽类也是携带者。当怀疑或诊断出此类疾病后，首先选取针对性的方法进行消毒，可以减少患病动物与健康动物之间的传播；我们使用1%的次氯酸钠对运动场和食槽、水槽、粪便等重污染地区喷刷消毒，30分钟后用清水冲洗干净。因为消毒比较及时所以成效也明显，对圈内剩余麋鹿并没有造成感染和死亡。其次，将患病2只麋鹿放入隔离圈舍治疗，也能有效地控制传染源，减少动物应激，方便治疗和投喂药物。