T淋巴细胞亚群、NK细胞及血小板活化指标在弥漫性大B细胞淋巴瘤患者诊疗中的应用

栗朋辉

(漯河市第二人民医院检验科，河南 漯河 462000)

弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)占非霍奇金淋巴瘤(NHL)亚型的30%～40%，且患病率呈逐年升高趋势[1-2]。DLBCL发病机制较为复杂，与机体的细胞免疫功能紊乱相关，肿瘤细胞异常增殖使正常的淋巴细胞与组织功能受损，严重影响患者健康[3-4]。T淋巴细胞亚群介导的细胞免疫为机体重要的抵抗肿瘤免疫来源，在免疫调节与抑制肿瘤细胞异常增殖中意义重大[5]。自然杀伤(NK)细胞在机体抗肿瘤免疫中起到免疫监视、杀伤靶细胞等功效。有研究[6]发现，肿瘤的发生、发展为各个不同因素相互作用的过程，细胞黏附因子对肿瘤细胞的浸润、转移发挥重要作用。而血小板活化指标[P-选择素(CD62p)、颗粒膜蛋白140(GMP-140)]为黏附细胞因子，参与肿瘤的发生与发展过程。然而临床对于T淋巴细胞亚群、NK细胞及血小板活化指标联合检测在DLBCL诊断中的相关研究报道较为少见，还有待进一步研究。基于此，本研究探究T淋巴细胞亚群、NK细胞及血小板活化指标在DLBCL中的诊断效能。

1 资料与方法

表1 DLBCL患者临床特征分析[n(%)]

1.2 方法

1.2.1 检测方法 ①标本采集：所有研究对象均于采血前1 d晚12：00禁食，第2天晨起在空腹状态下抽取5 mL静脉血，放在抗凝管中，以3 000 r·min-1的速率进行10 min的离心处理，取得上层血清之后，留存待检。②检测方法：选用流式细胞仪(希森美康公司，型号：CyFlow Counter)检测其T淋巴细胞亚群(CD3+、CD4+、CD8+)与NK细胞以及血小板活化指标[P-选择素(CD62p)、颗粒膜蛋白140(GMP-140)]。③质量控制：分析样本前，正确校准和标准化实验仪器，保障流式细胞仪激光光路与样品流处于最佳灵敏度工作状态，流式细胞仪的检测由我院检验中心的专人负责，检测过程完全在质量控制条件下完成。

1.2.2 观察指标 ①比较2组受试者T淋巴细胞亚群、NK细胞及血小板活化指标。②T淋巴细胞亚群、NK细胞及血小板活化指标单独与联合检测DLBCL的效能：绘制受试者操作特征(ROC)曲线，分析各项指标单独与联合检测诊断DLBCL的效能。

2 结果

2.1 2组T淋巴细胞亚群、NK细胞及血小板活化指标比较 观察组CD3+、CD4+、NK细胞水平低于对照组，CD8+、CD62p、GMP-140高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。见表2。

表2 2组受试者T淋巴细胞亚群、NK细胞及血小板活化指标比较

2.2 单独与联合检测在DLBCL中的诊断效能 ROC曲线结果显示，T淋巴细胞亚群、NK细胞及血小板活化指标联合检测在DLBCL诊断中的曲线下面积(AUC)为0.984(95%CI：0.967～1.000)，高于各项指标单独检测[0.730(95%CI：0.637～0.823)、0.648(95%CI：0.525～0.770)、0.856(95%CI：0.782～0.929)、0.821(95%CI：0.734～0.908)、0.875(95%CI：0.808～0.942)、0.834(95%CI：0.762～0.906)]。见表3、图1-7。

表3 T淋巴细胞亚群、NK细胞及血小板活化指标单独与联合检测在DLBCL中的诊断效能

图1 CD3+检测DLBCL的ROC图

图2 CD4+检测DLBCL的ROC图

图3 CD8+检测DLBCL的ROC图

图4 NK细胞检测DLBCL的ROC图

图5 CD62p检测DLBCL的ROC图

图6 GMP-140检测DLBCL的ROC图

图7 各项指标联合检测DLBCL的ROC图

3 讨论

DLBCL是临床较为多见的侵袭性淋巴瘤，属免疫系统的恶性肿瘤[7-8]。有研究[9]发现，机体的免疫系统异常与DLBCL的发生、发展相关，肿瘤细胞于机体的淋巴器官内过量增殖，会造成平常的淋巴组织损伤，促使免疫力降低，不利于肿瘤病情的控制。

T淋巴细胞为机体重要的免疫细胞，在正常状态下T淋巴细胞与其亚群数量处于较为平稳情况，当细胞免疫功能紊乱时，T淋巴细胞与其亚群将会发生紊乱[10-11]。CD3+细胞为总T细胞水平的代表，可划分成CD4+、CD8+细胞亚群。CD4+可辅助诱导机体中的其余免疫细胞，发挥抗肿瘤的作用，并参与B细胞、NK细胞等的激活，起到协同抗肿瘤作用[12]。若机体CD3+、CD4+降低，提示患者免疫功能减弱。抑制性的CD8+细胞能够抑制机体CD4+与B细胞能力，阻碍机体内抗体的产生和细胞免疫应答的发生，当其水平异常升高时，则表示肿瘤细胞出现持续增殖。因此，CD3+、CD4+、CD8+水平转变可当成恶性肿瘤检查、治疗与评估的重要参考指标。NK细胞可直接起到细胞毒活性，并能够分泌多种免疫调节因子，对肿瘤产生杀伤功效。同时，NK细胞可通过释放细胞因子对免疫应答起到调控作用，为机体内免疫防御体系的主要防线，NK细胞活性的降低是肿瘤发生与发展的重要原因。血小板活化指标对机体血管功能与血供具有较大影响，当血小板状态较差时，会应激性地呈现出血小板活化程度增强。CD62p为黏附因子，其受体在多种肿瘤细胞表层均有表达，此类受体与CD62p结合，可介导血小板与血管内皮细胞与循环内肿瘤细胞的黏附，使得肿瘤转移[13]。GMP-140是血小板活化释放的特异标志之一，可反映体内血小板的活化程度[14-15]。本研究结果显示，观察组CD3+、CD4+、NK细胞水平低于对照组，CD8+、CD62p、GMP-140水平高于对照组；ROC曲线结果显示，T淋巴细胞亚群、NK细胞及血小板活化指标联合检测在DLBCL诊断中的AUC高于各项指标单独检测指标。提示上述各项指标在DLBCL的发生与发展中联系紧密，各项指标联合检测在该病诊断中的应用价值较高。其原因为当DLBCL发生发展时，其疾病状态会造成免疫反应激活，T淋巴细胞亚群出现应激性变化，继而导致CD3+、CD4+、NK细胞水平降低，CD8+升高[16-17]。而CD62p、GMP-140则会在造血系统受损后出现异常升高，与血小板受损或形成减少后代偿性活化增强有关。多项指标联合检测可为DLBCL诊断提供更为丰富、全面、可靠的参考依据，故诊断效能更高。因此，各医院在自身实验室条件允许的前提下，可通过对此类患者的T淋巴细胞亚群、NK细胞及血小板活化指标予以尽早地检测，继而早期明晰患者的病情严重程度，以此指导临床制定科学合理的治疗手段，确保患者的身心健康。然而仍需值得注意的是，本研究尚存在纳入样本量较少等不足，可能会对本次实验结果的可信度构成一定程度的影响[18]。因此，后续临床还需不断地完善试验设计，继续扩大样本量的纳入，以此进行更深层次的探究，继而更深入地了解T淋巴细胞亚群、NK细胞及血小板活化指标联合检测DLBCL患者的诊断效能，以此为临床之后治疗此类患者提供更为优良的指导，继而制定更具合理规范化的治疗手段，以此保障患者的身心安全，最大限度地提升其生存率。

综上所述，T淋巴细胞亚群、NK细胞及血小板活化指标在DLBCL患者机体中呈异常表达状态，联合检查具有较高的诊断价值，对各项指标进行联合检测可及时明确患者病情，继而指导临床制定更具规范性的治疗策略，最终保障患者身心健康。