石墨炉原子吸收光谱法测定食品中铬的方法学验证
2022-12-13贾欣
贾欣
(山西省食品研究所(有限公司),山西太原 030024)
铬广泛存在于自然环境中,是一种毒性很大的重金属,其中以六价铬的毒性最强,这些化合物进入人体,易被人体吸收并蓄积,引起黏膜脑水肿,肾脏损伤,严重的可能导致肾脏坏死,具有免疫毒性、致癌诱变作用。由于铬的性质稳定、溶解度低,难以进入植物体内,所以正常情况下食品中铬的含量较低,预包装食品中铬的来源主要为食品原材料的污染。为了保证食品安全和保障公众体健康,GB 2762—2017《食品安全国家标准食品中污染物限量》标准中对不同产品中铬的限量做了明确规定,食品中铬的限量范围为0.5 mg/kg~2.0 mg/kg,因此对预包装食品中铬测定结果的准确度和灵敏度有较高要求。本文旨在对石墨炉原子吸收光谱法测定食品中铬的方法的检出限、定量限、重复性、精密度、准确度等指标进行验证,证明该方法适于测定食品中铬元素的含量。
1 材料与方法
1.1 仪器与试剂
ZEEnit 700P石墨炉原子吸收分光光度计,德国耶拿;MARS One微波消解仪,美国CEM;EHD-24电热消解仪,北京东航科仪仪器有限公司;TD465可调式电热板,天津拓至明实验仪器技术开发有限公司;GS 系列12 孔压力消解器,南京瑞尼克科技开发有限公司;SX-8-10 箱式电阻炉;北京中兴伟业仪器有限公司;恒温干燥箱;电子天平。
铬单元素标准溶液,标准物质编号GBW08614,标准值1 000μg/mL;纯硝酸,优级纯;磷酸二氢铵溶液,质量浓度20 g/L;超纯水。
1.2 试验方法
1.2.1 试样前处理
将食品试样粉碎均匀,备用。样品消解方法参照GB 5009.123—2014《食品安全国家标准食品中铬的测定》,处理方法略有修改。
微波消解:准确称取试样0.1 g~0.5g(精确至0.001 g)于微波消解罐中,加入5 mL硝酸,按照微波消解条件(见表1)消解试样。冷却后取出消解罐,在电热板上于150 ℃赶酸至0.5 mL~1.0 mL。消解罐放冷后,将消化液转移至10 mL 容量瓶中,用少量水洗涤消解罐3 次,合并洗涤液,用水定容至刻度。同时做试剂空白试验。
表1 微波消解条件
湿法消解:准确称取试样0.5 g~3.0 g(精确至0.001 g)于锥形瓶中,加入10 mL 硝酸、1 mL 高氯酸,在可调式电热炉上消解。消解至冒白烟,消化液呈无色透明或略带黄色,取出消化管,冷却后用水定容至10 mL。同时做试剂空白试验。
高压消解:准确称取试样0.3 g~1.0 g(精确至0.001 g)于消解内罐中,加入5 mL 硝酸,盖好内盖,旋紧不锈钢外套,放入恒温干燥箱,于150 ℃消解4 h~5 h。在箱内自然冷却至室温,缓慢旋松外罐,去除消解内罐,在电热板上于150 ℃赶酸至0.5 mL~1.0 mL。冷却后将消化液转移至10 mL 容量瓶中,用少量水洗涤消解罐3 次,合并洗涤液,用水定容至刻度。同时做试剂空白试验。
干法灰化:准确称取试样0.5 g~3.0 g(精确至0.001 g)于坩埚中,小火加热,炭化至无烟,转移至马弗炉中,于550 ℃恒温3 h~4 h。灰化至试样呈白灰状,取出冷却,用硝酸溶液(1+1)溶解并用水定容至10 mL。同时做试剂空白试验。
1.2.2 标准溶液的配制
将铬标准储备液用1%硝酸溶液逐级稀释至铬质量浓度100 ng/mL,制成铬标准使用液。吸取5 mL铬标准使用液于25 mL 容量瓶中,用1%硝酸溶液稀释至刻度,混匀。采用石墨炉自动进样器自动配制,标准系列溶液为0.0 ng/mL、4.0 ng/mL、8.0 ng/mL、12.0 ng/mL、16.0 ng/mL、20.0 ng/mL。
1.3 试样测定
将石墨炉原子吸收分光光度计工作条件调至最佳状态,仪器测定参数见表2。测定标准系列溶液的吸光度值,得到标准曲线方程。在与测定标准溶液相同的试验条件下,分别测定空白溶液和样品溶液,测其吸光度值,与标准系列溶液比较定量。
表2 原子吸收分光光度计仪器参数
1.4 统计分析
数据经录入整理后,采用SPSS 25.0软件对采用4 种样品前处理方式检测结果的加标回收率、精密度和准确性进行统计学分析。
2 结果与分析
2.1 方法的线性
对质量浓度分别为0.0 ng/mL、4.0 ng/mL、8.0 ng/mL、12.0 ng/mL、16.0 ng/mL、20.0 ng/mL 标准系列溶液的吸光度进行测定,结果见下页表3。以铬溶液质量浓度为横坐标,吸光度值为纵坐标,绘制标准曲线(图1),得到线性回归方程为y=0.023x+0.009 3,R=0.999 2>0.999,故能满足分析检测要求。
表3 铬标准系列溶液测定结果
2.2 检出限和定量限
采用微波消解前处理方式,连续测定21次样品空白(见表4),得到空白值的标准偏差(SD)0.030,根据检出限的测定方法,得到该方法的检出限为0.090μg/L,定量限为0.30μg/L。当称样量为0.5 g,定容体积为10 mL 时,方法检出限为0.001 8 mg/kg,定量限为0.006 mg/kg。
表4 方法检出限的测定 μg/L
2.3 回收率和精密度
随机选择某小米样品,分别采用4 种样品消解方式,测定样品中铬的含量,每组试验制备6 个平行试样,同时进行加标回收试验,计算相对标准偏差(RSD)。在样品中分别加入低、中、高浓度的标准溶液,分别测定经过4 种消解方式后样品中铬的加标回收率,结果见表5。由表5 可知,该方法测定食品中铬的平均回收率为94%~104%,精密度为1.21%~2.35%。由统计学分析可知,4 种消解方式测定食品中铬的回收率无统计学意义(F=1.081,P>0.05),精密度差异无统计学意义(F=0.681,P>0.05)(表6)。根据GB/T 27404—2008《实验室质量控制规范食品理化检测》中对回收率和精密度的规定,被测组分含量范围为100 mg/kg~1 000 mg/kg的回收率要求为95%~105%,精密度要求为RSD<5.3%,故本试验测定结果满足需求。
表5 4种样品消解方式测定的回收率和精密度
表6 4种样品消解方式测定结果的统计学分析
2.4 方法重复性
采用4 种样品消解方式,每种消解方式的样品中分别加入低、中、高浓度的标准溶液,每组样品分别制备6 个平行试样,相对标准偏差(RSD),试验结果见表5。由表5 可知,该方法测定食品中铬的RSD为1.21%~2.35%,满足GB/T 27417—2017《合格评定化学分析方法确认和验证指南》中的规定,即被测组分含量为100 mg/kg~1 000 mg/kg,实验室变异系数<5.3%。
3 结论
本试验对食品中铬测定方法的检出限、线性范围、精密度、回收率、重复性、准确度等进行了方法学验证。采用微波消解、湿法消解、高压消解和干灰化法4 种样品消解方式,所得试验结果无明显差异。通过对该方法各项指标的验证,可知该方法均能符合检验检测要求,故本试验方法能满足食品风险监测中对铬的测定。