一例猪伪狂犬病的诊治

李天芝

（山东绿都生物科技有限公司，山东 滨州 256600）

猪伪狂犬病（P R）是由伪狂犬病病毒（PRV）感染引起的一种急性、热性、高度接触性传染病[1]。各品种和日龄猪均可感染，母猪和仔猪危害严重，母猪主要表现为流产、死胎、木乃伊胎等繁殖障碍性疾病[2]，仔猪则表现为神经症状、呕吐、腹泻及高死亡率；肥育猪常表现为呼吸道疾病，死亡率低，但可以隐性带毒，并不定期排毒[3]。该病在我国广泛流行，给我国养猪业造成了严重的经济损失[4]。世界动物卫生组织（OIE）将其列为B类传染病，我国将其列为二类动物传染病[5]。

2022年2月，山东某养猪场出现妊娠母猪流产、产死胎，2周龄内哺乳仔猪出现神经症状，大量死亡，抗生素治疗无效，送鲁北兽医站诊断中心诊断，确诊为猪伪狂犬病。现将诊治过程报告如下。

1 发病情况调查

2022年2月初，山东滨州某规模猪场妊娠母猪出现流产、产死胎等，流产及产死胎率达 20%。2周龄内仔猪被毛粗乱，出现呕吐、腹泻，抽搐、尖叫、眼球震颤、头向后仰、四肢划水等神经症状，最后昏迷死亡。病程不超过48 h，死亡率高达100%。常规抗生素治疗无效。送鲁北兽医诊断中心诊断，剖检可见病死猪脑充血、出血，肝脏和脾脏有白色坏死点，肾脏出血、坏死，肺脏水肿、出血，淋巴结肿大，扁桃体化脓、坏死。

2 实验室诊断

2.1 病料采集与处理

无菌采集病死仔猪脑、扁桃体、肺脏等组织作为病料。将采集的病料剪碎，按1∶3加入灭菌生理盐水，研磨后制成混悬液，反复冻融3 次后，8 000 r/min 离心10 min取上清液，-80 ℃冰箱保存备用。

2.2 细菌分离

无菌采取病死猪肝脏、脾脏涂片，革兰氏染色、镜检，未发现细菌，将病料划线接种于血琼脂培养基、麦康凯琼脂培养基，37 ℃下培养24 h，均未见细菌生长。

2.3 PCR检测

参照猪伪狂犬病病毒g E基因序列（KC415026.1），采用Primer Premier 5.0引物设计软件，设计1对引物，扩增的片段大小为215 bp。按AxyPrep体液病毒DNA/RNA小量试剂盒使用说明书提取2.1处理的病料样品的DNA，进行PCR扩增，反应程序为95 ℃预变性5 min，然后进入95 ℃5 s、55 ℃ 10 s、72 ℃ 15 s，共35个循环，最后72 ℃延伸10 min。取5 µL PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳。结果显示，在215 bp处有光亮条带，与理论值大小相符（图1），因此可基本确定为猪伪狂犬病病毒感染。

图1 病料PCR扩增结果

2.4 动物回归试验

取2.1处理的病料样品，皮下注射2只非免疫健康家兔，1 mL/只，另设对照组2只，注射生理盐水，2 mL/只，隔离饲养观察，结果2只实验兔24 h后体温升高，精神沉郁，随后注射部位出现奇痒，兔疯狂地啃咬或抓挠痒部，发出惨叫，被毛脱落，皮肤红肿，濒死期抽搐、挣扎，均在96 h内死亡。剖检可见脑出血，肝脏出血、坏死，胃肠黏膜脱落，扁桃体坏死、化脓，对照组兔均健活。

3 处理措施

用0.2%三氯异氰尿酸对猪舍、用具及周围环境杀进行全面消毒，病死猪焚烧或深埋等无害化处理。每天清除猪舍粪便，集中存放进行发酵处理。严格执行生物安全措施，禁止发病猪舍与健康猪舍之间的人流与物流。挑出发病及疑似感染猪，隔离饲养观察，同时注射猪伪狂犬病活疫苗Bartha-K61毒株，剂量为2头份/头。对尚未发病猪群紧急接种猪伪狂犬病活疫苗Bartha-K61毒株，种猪、中大猪全群普免，2头份/头，1个月后加强免疫1次。哺乳仔猪全部产房喷鼻1头份/头+肌注1头份/头。饮水中添加电解质多维和葡萄糖，同时全群用恩诺沙星拌料饲喂，预防细菌继发感染。2周后回访疫情基本得到控制，无新增病例发生。

4 小结与讨论

经询问得知该养殖户2个月前引种过后备种猪，引种时未作相应检测，也没免疫过伪狂犬病疫苗。为节省成本，仅仔猪初生时喷鼻免疫过1次猪伪狂犬病疫苗，此后并未进行加强免疫，猪群并未定期检测抗体水平。估计因引种把关不严，造成了带毒猪只引入，导致伪狂犬病病毒的传播和扩散，而场内肥育猪未进行伪狂犬病疫苗免疫，抗体水平低，存在免疫漏洞。因此，猪场引种时一定要做相应的抗原、抗体监测，引入后做好后备母猪疫苗免疫，增强机体抗病力，坚决杜绝引进伪狂犬病隐性带毒猪。一点式饲养的猪场，要重视肥育猪的伪狂犬病疫苗的免疫，除1日龄喷鼻免疫外，出栏前至少还需肌肉注射加强免疫2次，定期监测猪群伪狂犬病抗体水平，制定合理的免疫程序，猪群抗体水平低时及时补免疫苗，增强猪只免疫力。

此外，为减少伪狂犬病的发生，增强猪群抗病力，猪群日常饲养管理中还应采取综合防控措施。要保证营养充足，饲喂营养全面的优质饲料，避免缺乏氨基酸、维生素和微量元素，饲料要防止霉菌毒素的污染。猪舍保持适宜的温度和湿度，夏天注意降温，冬天注意保暖，降低饲养密度，改善通风条件，保持猪舍干燥，及时更换污染物或潮湿的垫草, 减少驱赶、运输等应激因素，及时清除粪便搞好环境卫生，选用合格的消毒药严格消毒。