槲蕨（骨碎补）根茎繁殖技术研究

2022-11-29刘燕琴韩蓉蓉刘春雷吴廷和

南方农业 2022年19期

刘燕琴，肖忠，韩蓉蓉,*，刘春雷，王黎，吴廷和

（1.重庆市药物种植研究所，重庆南川 408435；2.特色生物资源研究与利用川渝共建重点实验室，重庆南川 408435；3.酉阳县农业农村委员会，重庆酉阳 409800）

骨碎补入药早期记载于《开宝本草》，后收录入《本草纲目》；现《中国药典》2020版（一部）的水龙骨科植物槲蕨[Drynaria fortunei(Kunze)J.Sm.][1]，即是《中国植物志》记载的水龙骨科槲蕨属植物槲蕨（Drynaria roosiiNakaike）[2]，其以干燥根状茎入药，柚皮苷（C27H32O14）≥0.50%为控制指标。骨碎补性苦、温；归肝、肾经；具有疗伤止痛、补肾强骨、消风祛斑，治疗跌扑闪挫、筋骨折伤、肾虚腰痛、筋骨痿软、耳鸣耳聋、牙齿松动及斑秃、白癜风的功效[3-4]。现代医学研究证明，骨碎补在抗炎症、预防和治疗骨质疏松[5-6]、促进骨折愈合[7-9]、预防牙齿松动[10-11]、改善记忆力[12-13]等方面药理效果显著。槲蕨因野生资源采集、破坏严重，资源锐减，已于2002年被建议列入珍稀植物三级保护[14]，发展育苗、人工种植成为必然趋势；根茎育苗技术具有生长周期短、易于推广等优势，研究根茎繁殖技术对发展槲蕨人工种植具有重要意义[15]。

1 材料与方法

1.1 试验材料

供试材料采自于重庆市南川区水江镇乐村石壁（海拔1 386 m，经纬度N29° 09.4734′、E107°05.9559′），经重庆市药物种植研究所植物资源专家刘正宇鉴定，为《中国药典》（2020 年版）中药材骨碎补基原植物。

1.2 试验地点

重庆市南川区华尔寺种植园（海拔701 m，经纬度为N 29°05.4104′、E 107°03.1580′），环境郁闭度为0.5～0.6。

1.3 试验方法

1.3.1 材料前处理及定植方法

选取生长龄为2～3 年的健壮根茎，剪去孢子叶，保留营养叶、毛状鳞片和须根，切成长度为8～12 cm的根状茎段，作为繁殖材料；切断口用0.2%～0.3%的高锰酸钾水溶液喷湿创口消毒，待表面水分风干备用。

树上定植法：选取树皮紧致、胸径在5 cm 以上的香樟树、栎树、青冈树等的树干为附着物，将根茎须根贴在树皮上，用带状布条缠绕固定，单株间距5～6 cm处绑缚苔藓，呈0.2～0.5 m2小片定植。

基质扦插法（垄栽）：选取林下郁闭度为0.5～0.6、土壤类型为棕色壤土的坡地（坡度≥15°），起高约40 cm、宽30～50 cm 的垄。以V(粗泥炭土)∶V(粗河沙)=2∶3 为基质铺厚约10 cm，根茎插入基质3～4 cm深，株间距8～10 cm，行间距10～12 cm。

1.3.2 定植时间筛选

在2021 年2—11 月，每月以树、垄定植，观测其生根、叶片生长、新根茎生长等情况。

1.3.3 药剂筛选

于2021 年4 月，以NAA+6-BA+GA 组合[1#，50 mg∶5 mg∶1 mg (为NAA、6-BA、GA 之比，下同)；2#，90 mg∶5 mg∶1 mg；3#，130 mg∶5 mg∶1 mg；4#，清水对照组]喷湿根茎并风干表面水分，定植，每个处理3个重复，研究药剂对根茎繁殖的影响。

1.3.4 田间管理及观测

根茎定植后，定期用喷雾器喷水（10～20 d 喷水1次）保持湿度。

观测统计指标包括生根时间、新生须根数、新叶生长情况、新根茎生长情况、成活率、植株生长势。

1.4 数据统计分析

采用Excel与SPSS 23.0对数据进行处理和分析。

2 结果与分析

2.1 定植时间对槲蕨根茎繁殖的影响

由表1、表2可知，在不同定植时间下，槲蕨根茎的生根时间、生根数、新根茎萌发时间及增殖系数、成活率有显著差异，其中以2—8月扦插繁殖的效果较好；树上定植、基质扦插法在2—8月时间段成活率均可达到78%以上，其中4—6月扦插繁殖的生根、新根茎生长数、成活率方面表现最好。

表1 不同定植时间对树上定植槲蕨繁殖的影响

表2 不同定植时间对基质扦插槲蕨繁殖的影响

可以看出，树上定植与基质扦插的成活率随定植时间呈现相似的趋势，并均在4—6月达到最高。

2.2 药剂处理对槲蕨根茎繁殖的影响

由表3、表4可知，药剂处理对扦插根茎生长有一定的促进作用，如对新生须根数、新生根茎数有促进作用，但对孢子叶的萌发有延缓效果。本试验中，1#、2#、3#药剂的6-BA 和GA 浓度相同，只是NAA浓度随编号扩大而逐渐增大，可见随着NAA 浓度增加其启动效果呈现先上升后下降的趋势，2#药剂处理在两种定植方法中均表现较好。

表3 药剂处理对树上定植槲蕨根茎繁殖的影响

表4 药剂处理对基质扦插槲蕨繁殖的影响

3 讨论与小结

3.1 讨论

3.1.1 槲蕨根茎繁殖时间与其生物学特性有较大关系

槲蕨为附生蕨类植物，附着在树皮、石壁等地方生长，生物学特性及生境特别[4]。目前槲蕨资源大都是野生孢子繁殖，但是孢子繁殖周期长，成本高，限制了人工种植。采用树上定植、基质扦插可以有效地模拟槲蕨附生特性，实现其快速人工繁殖。

根据西南地区槲蕨生长周期及特点，发现在10—12 月及次年1 月温度较低、空气湿度低，不利于槲蕨生长，生长缓慢；在温度较高、空气湿度高的7—8月，也不利于槲蕨生长。而在温度、湿度适宜的2—6月，其单株平均新生根数、新生块茎数、成活率等方面均呈现出优势。

3.1.2 药剂处理对槲蕨根茎繁殖的影响

药剂处理槲蕨根茎，对槲蕨新根生长、新根茎萌发等有一定的促进作用。文伟等以槲蕨的茎、叶片、叶柄等为外植体，研究不同培养基对其生根效果的影响，发现以1/2MS+NAA0.1 mg·L－1培养基的生根效果最好[16]；严福林等研究发现，适当的药剂处理、扦插基质对槲蕨的扦插繁殖有促进作用[17]；这些研究结果与本研究结果相似。