贵州金丝桃的化学成分研究

周献冬，林亲雄，杨新洲

(中南民族大学 药学院，湖北 武汉 430074)

藤黄科（Guttiferae）金丝桃属（Hypericum）植物在中国各地均有分布，主要集中于华东、川北、贵州、新疆等地，该属植物在民间有2 400 余年的用药历史，主要有清热解毒、散瘀止痛、祛风湿等功效[1].据报道，金丝桃属植物中主要含有黄酮类、氧杂蒽酮类、多环多异戊烯基取代间苯三酚衍生物（PPAPs）等多种化学成分，如邓憬童等[2]从川鄂金丝桃中分离出的15 个化合物中涵盖了黄酮类、甾体类、三萜类、饱和脂肪酸酯类、氧杂蒽酮类、多环多异戊烯基取代间苯三酚衍生物等多种类型.其中PPAPs 因其复杂独特的化学结构和多样的药理活性而倍受关注.

贵州金丝桃（Hypericum kouytchenseLévl）为金丝桃属灌木，生长于海拔1 500～2 000 m 的草地、山坡、河滩、多石地.本种分布较狭，主要分布于贵州威宁、毕节、黔西、金沙、印江、江口、盘县、平坝、普安、息烽、清镇等地[3].该物种资源较少，2013年被列入《中国生物多样性红色名录—高等植物卷》，无危（LC），其果实及根供药用，果作连翘代用品，根能祛风、止咳、下乳、调经补血、并可治跌打损伤[4].从金丝桃属其他植物中已分离出许多有价值的化合物，而目前关于贵州金丝桃的化学成分报道较少.本课题组认为贵州金丝桃有较大的研究价值和前景，因此综合利用各种分离提取技术对产自于贵州省黔西南盘县的贵州金丝桃乙酸乙酯提取部位中的化学成分进行了分离纯化，最终分离鉴定了17 个化合物，其中有16 个化合物为首次从该植物中分离得到，涵盖了三萜类、氧杂蒽酮类、二苯并呋喃类以及酚酸类等多种类型化合物.

1 实验材料与方法

1.1 仪器和材料Bruker DRX-600 MHz 核磁共振仪（德国Bruker 公司）；Waters ACQUITY SQD MS液相质谱联用仪，Waters 2535 半制备型HPLC 仪、Waters 2998 DAD 检测器、Waters 2707 自动进样器（美国Waters 公司）；YMC-Pack diol 柱（150 mm ×φ10 mm,5 μm，日本YMC公司）；Betasil C18 柱(250 mm ×φ10 mm,5 μm,美国Thermo 公司）；HP-20 大孔树脂（日本三菱公司）；柱层析硅胶、GF254薄层硅胶板（烟台江友硅胶开发有限公司）；Sephadex LH-20 葡聚糖凝胶（美国Amersham 公司）；色谱级乙腈、正己烷、异丙醇（美国TEDIA 试剂公司）.

1.2 植物来源植物样品于2018 年8 月采集于贵州省黔西南盘县，由中南民族大学药学院万定荣教授鉴定为藤黄科金丝桃属植物贵州金丝桃（Hypericum kouytchenseLévl）.植物标本样品（No.SC0876）现存放于湖北省武汉市中南民族大学药学院植物标本库.

1.3 提取与分离取40 kg 贵州金丝桃的干燥地上部分，粉碎后用80%的乙醇冷浸提取5次，合并提取液，减压浓缩，得到浸膏3.9 kg.总浸膏用适量热蒸馏水悬浮分散后，依次使用乙酸乙酯、正丁醇对其进行萃取，分别得到1.6 kg 的乙酸乙酯部位以及1.4 kg 的正丁醇部位提取物.采用正相硅胶柱层析对乙酸乙酯部位浸膏（1.6 kg）进行粗分，以二氯甲烷-甲醇梯度洗脱（体积比 100∶1→80∶1→50∶1→30∶1→15∶1→10∶1→5∶1→3∶1→0∶1），采用TLC 对收集得到的浓缩液进行检测，合并后得到10 个组分，记为Fr.A～ Fr.J.

Fr.A 有白色晶体析出，过滤后得到化合物1（95.6 mg）.Fr.B 用大孔树脂柱色谱进一步分离，以乙醇-水梯度洗脱（体积分数 30%→50%→60%→70%→75%→80%→85%→90%），TLC 检测后合并为10 个组分，记为Fr.Ba～Fr.Bj.Fr.Bb 有黄色沉淀析出，过滤后经高效液相色谱（Betasil C18柱，乙腈-水，体积比10∶90→100∶0，流动相含有0.1%的甲酸）分离得到化合物3（71.7 mg，tR=11.49 min）、化合物16（50.1 mg，tR=16.19 min）.Fr.Bd 有黄色沉淀析出，过滤后经高效液相色谱（Betasil C18柱，乙腈-水，体积比45∶55 等度洗脱，流动相含有0.1%的甲酸）分离得到化合物9（12.2 mg，tR=10.80 min）、化合物8（94 mg，tR=16.54 min）、化合物10（35.1 mg，tR=18.31 min）.Fr.Be 经过正相硅胶柱层析初步分离，以石油醚-乙酸乙酯梯度洗脱（体积比 100∶0→70∶1→50∶1→30∶1→20∶1→15∶1→5∶1→3∶1→0∶1），经TLC 检测合并分为Fr.Be-1～Fr.Be-9 共9 个组分.Fr.Be-2 经高效液相色谱（Betasil C18柱，乙腈-水，体积比50∶50→100∶0，流动相含有0.1%的甲酸）分离得到化合物4（5.2 mg，tR=12.50 min）.Fr.Be-3 有黄色晶体析出，抽滤得到化合物14（62.3 mg）.Fr.Be-4经高效液相色谱（Betasil C18柱，乙腈-水，体积比35∶65→100∶0，流动相含有0.1%的甲酸）分离得到化合物15（27.8 mg，tR=19.91 min）、化合物7（21.7 mg，tR=20.27 min）.Fr.Be-5 经Sephadex LH-20 凝胶柱色谱分离后再进一步经高效液相色谱（Betasil C18柱，乙腈-水，体积比35∶65→100∶0，流动相含有0.1%的甲酸）纯化得到化合物17（5.4 mg，tR=11.20 min）、化合物5（3.2 mg，tR=17.91 min）、化合物6（12 mg，tR=20.61 min）.Fr.Be-6 高效液相色谱（Betasil C18柱，乙腈-水，体积比50∶50→90∶10，流动相含有0.1%的甲酸）分离纯化得到化合物12（7.7 mg，tR=15.12 min）.Fr.Be-7 经正相半制备色谱（YMC-Pack diol柱，正己烷-正己烷/异丙醇（体积比7∶3），体积比65∶35→30∶70）分离纯化得到化合物13（3 mg，tR=13.48 min）、化合物11（7.9 mg，tR=15.56 min）.Fr.Bh 结晶析出化合物2（5 mg）.

2 结果与讨论

2.1 实验结果综合应用HP-20 大孔树脂柱层析、正相硅胶柱层析、Sephadex LH-20 凝胶柱色谱、半制备高效液相色谱等多种分离方法对贵州金丝桃（H.kouytchense）乙酸乙酯部位进行分离纯化，运用NMR、MS 等现代波谱方法鉴定化学结构，从贵州金丝桃乙酸乙酯部位提取物中分离得到了17 个化合物，分别鉴定为无羁萜（1）、白桦脂酸（2）、3,4-二羟基-2-甲氧基氧杂蒽酮（3）、1,3-二羟基-2-甲氧基氧杂蒽酮（4）、1,3-二羟基-5-甲氧基氧杂蒽酮（5）、1,5-二羟基-6,7-二甲氧基氧杂蒽酮（6）、2,3-二甲氧基氧杂蒽酮（7）、cadensin D（8）、subalatin（9）、kielcorin（10）、异巴西红厚壳素（11）、toxyloxanthone B（12）、2-deprenylrheediaxanthone B（13）、1,7-二羟基氧杂蒽酮（14）、3-羟基-1,4,7-三甲氧基二苯并呋喃（15）、咖啡酸乙酯（16）、苯甲酸（17）.化合物按照结构类型可以分为三萜类、氧杂蒽酮类、二苯并呋喃类以及酚酸类化合物.结构见图1.

图1 化合物 1～17 结构Fig.1 Chemical structures of compounds 1-17

2.2 化合物的波谱数据化合物1 C30H50O，白色晶体，ESI-MS：m/z427 [M+H]+.1H NMR (600 MHz，CDCl3)δH：2.39 (2H，m，H-2)，2.27 (1H，m，H-4)，1.96 (1H，m，H-1a)，1.75 (1H，m，H-6b)，1.67 (1H，m，H-1b)，1.18 (3H，s，H-28)，1.05 (3H，s，H-27)，1.00(6H，s，H-26，30)，0.95 (3H，s，H-29)，0.88 (3H，d，J=6.9 Hz，H-23)，0.87 (3H，s，H-25)，0.72 (3H，s，H-24).13C NMR (150 MHz，CDCl3)δC：213.5 (C-3)，59.6 (C-10)，58.4 (C-4)，53.2 (C-8)，42.9 (C-18)，42.3(C-5)，41.7 (C-2)，41.4 (C-6)，39.8 (C-22)，39.4 (C-13)，38.4 (C-14)，37.6 (C-9)，36.1 (C-16)，35.8 (C-19)，35.5(C-11)，35.2 (C-29)，32.9 (C-21)，32.5 (C-28)，32.2 (C-15)，31.9 (C-30)，30.6 (C-12)，30.1 (C-17)，28.3 (C-20)，22.4 (C-1)，20.4 (C-26)，18.8 (C-27)，18.4 (C-7)，18.1(C-25)，14.8 (C-24)，7.0 (C-23).其波谱数据与文献报道的化合物基本一致[5]，故鉴定该化合物为无羁萜.

化合物2 C30H48O3，白色针晶，ESI-MS：m/z457 [M+H]+.1H NMR (600 MHz，CDCl3)δH：4.74(1H，d，J=1.7 Hz，H-29b)，4.61(1H，brs，H-29a)，3.19(1H，dd，J=11.4，4.8 Hz，H-3)，1.70 (3H，s，H-30)，0.97 (3H，s，H-27)，0.96 (3H，s，H-26)，0.93 (3H，s，H-23)，0.82 (3H，s，H-25)，0.75 (3H，s，H-24).13C NMR(150 MHz，CDCl3)δC：180.7 (C-28)，150.6 (C-20)，109.8 (C-29)，79.2 (C-3)，56.4 (C-17)，55.5 (C-5)，50.6(C-9)，49.4 (C-18)，47.0 (C-19)，42.6 (C-14)，40.8 (C-8)，39.0 (C-4)，38.8 (C-1)，38.5 (C-13)，37.3 (C-10)，37.2 (C-22)，34.4 (C-7)，32.3 (C-16)，30.7 (C-21)，29.8(C-15)，28.1 (C-23)，27.5 (C-2)，25.6 (C-12)，21.0 (C-11)，19.5 (C-30)，18.4 (C-6)，16.3 (C-25)，16.2 (C-26)，15.5 (C-24)，14.8 (C-27).其波谱数据与文献报道的化合物基本一致[6]，故鉴定该化合物为白桦脂酸.

化合物3 C14H10O5，黄色粉末，ESI-MS：m/z259 [M+H]+.1H NMR (600 MHz，DMSO-d6)δH：8.17(1H，dd，J=8.0，1.7 Hz，H-8)，7.82 (1H，ddd，J=8.7，7.2，1.7 Hz，H-6)，7.63 (1H，m，H-5)，7.43 (1H，ddd，J=8.0，7.2，1.0 Hz，H-7)，7.14 (1H，s，H-1)，3.90 (3H，s，2-OCH3).13C NMR (150 MHz，DMSO-d6)δC：175.0(C-9)，155.4 (C-5a)，146.0 (C-2)，142.4 (C-3)，141.8(C-4)，134.5 (C-6)，133.5 (C-4a)，125.8 (C-8)，123.9(C-7)，120.7 (C-8a)，118.0 (C-5)，112.9 (C-1a)，95.9(C-1)，55.9 (2-OCH3).其波谱数据与文献报道的化合物基本一致[7]，故鉴定该化合物为3,4-二羟基-2-甲氧基氧杂蒽酮.

化合物4 C14H10O5，黄色晶体，ESI-MS：m/z259 [M+H]+.1H NMR (600 MHz，CDCl3)δH：13.12(1H，s，OH)，8.25 (1H，dd，J=8.1，1.5 Hz，H-8)，7.72(1H，ddd，J=8.4，7.2，1.5 Hz，H-6)，7.45 (1H，dd，J=8.4，1.0 Hz，H-5)，7.38 (1H，ddd，J=8.1，7.2，1.0 Hz，H-7)，6.60 (1H，s，H-4)，4.05 (3H，s，2-OCH3).13C NMR (150 MHz，CDCl3)δC：181.6 (C-9)，156.5 (C-4b)，156.2 (C-4a)，153.6 (C-3)，153.5 (C-1)，135.2 (C-6)，129.7 (C-2)，125.9 (C-8)，124.1 (C-7)，120.3 (C-8a)，117.8 (C-5)，104.2 (C-8b)，93.6 (C-4)，61.1 (2-OCH3).其波谱数据与文献报道的化合物基本一致[8]，故鉴定该化合物为1,3-二羟基-2-甲氧基氧杂蒽酮.

化合物5 C14H10O5，黄色晶体，ESI-MS：m/z259 [M+H]+.1H NMR (600 MHz，DMSO-d6)δH：12.80 (1H，s，1-OH)，7.65 (1H，dd，J=8.0，1.4 Hz，H-8)，7.49 (1H，dd，J=8.0，1.4 Hz，H-6)，7.37 (1H，t，J=8.0 Hz，H-7)，6.38 (1H，d，J=2.0 Hz，H-4)，6.19 (1H，d，J=2.0 Hz，H-2)，3.96 (3H，s，5-OCH3).13C NMR (150 MHz，DMSO-d6)δC：179.6 (C-9)，166.8 (C-3)，162.8(C-1)，157.2 (C-4a)，147.9 (C-5)，145.4 (C-4b)，124.0(C-7)，120.6 (C-8a)，116.6 (C-8)，115.7 (C-6)，101.9(C-8b)，98.5 (C-2)，94.3 (C-4)，56.2 (5-OCH3).其波谱数据与文献报道的化合物基本一致[9]，故鉴定该化合物为1,3-二羟基-5-甲氧基氧杂蒽酮.

化合物6 C15H12O6，黄色粉末，ESI-MS：m/z289 [M+H]+.1H NMR (600 MHz，DMSO-d6)δH：12.88 (1H，s，OH)，7.67 (1H，t，J=8.4 Hz，H-3)，7.28(1H，s，H-8)，7.09 (1H，d，J=8.4 Hz，H-4)，6.78 (1H，d，J=8.4 Hz，H-2)，3.92 (3H，s，6-OCH3)，3.91 (3H，s，7-OCH3).13C NMR (150 MHz，DMSO-d6)δC：180.4 (C-9)，160.8 (C-1)，155.5 (C-4a)，148.1 (C-7)，146.5 (C-6)，146.3 (C-10a)，136.5 (C-3)，135.0 (C-5)，111.3 (C-8a)，109.9 (C-2)，107.7 (C-9a)，107.2 (C-4)，99.4 (C-8)，61.0 (6-OCH3)，56.1 (7-OCH3).其波谱数据与文献报道的化合物基本一致[10]，故鉴定该化合物为1,5-二羟基-6,7-二甲氧基氧杂蒽酮.

化合物7 C15H12O4，黄色粉末，ESI-MS：m/z257 [M+H]+.1H NMR (600 MHz，DMSO-d6)δH：8.23(1H，dd，J=7.9，1.7 Hz，H-8)，7.79 (1H，ddd，J=8.7，7.1，1.7 Hz，H-6)，7.56 (1H，s，H-1)，7.54 (1H，m，H-5)，7.43 (1H，ddd，J=7.9，7.1，1.0 Hz，H-7)，7.10 (1H，s，H-4)，4.02 (3H，s，3-OCH3)，3.94 (3H，s，2-OCH3).13C NMR (150 MHz，DMSO-d6)δC：175.6 (C-9)，156.9 (C-4a，10a)，153.2 (C-3)，148.0 (C-2)，135.0 (C-6)，126.8(C-8)，124.7 (C-7)，122.3 (C-8a)，118.7 (C-5)，115.4(C-9a)，105.8 (C-1)，100.8 (C-4)，56.8 (2-OCH3)，56.3(3-OCH3).其波谱数据与文献报道的化合物基本一致，故鉴定该化合物为2,3-二甲氧基氧杂蒽酮.

化合物8 C25H22O9，浅黄色粉末，ESI-MS：m/z467 [M+H]+.1H NMR (600 MHz，DMSO-d6)δH：8.21(1H，dd，J=8.0，1.6 Hz，H-8)，7.85 (1H，m，H-6)，7.69(1H，d，J=8.3 Hz，H-5)，7.48 (1H，m，H-7)，7.21 (1H，s，H-1)，6.79 (2H，s，H-2′，6′)，5.11 (1H，t，J=5.2 Hz，H-8′)，5.07 (1H，d，J=7.9 Hz，H-7′)，4.45 (1H，m，H-9′)，3.87 (3H，s，2-OCH3)，3.78 (6H，s，3′，5′-OCH3)，3.46(1H，m，H-9′).13C NMR (150 MHz，DMSO-d6)δC：174.8 (C-9)，155.3 (C-10a)，148.0 (C-5′，3′)，145.9 (C-2)，141.3 (C-4a)，139.6 (C-3)，136.3 (C-4′)，134.8 (C-6)，132.6 (C-4)，125.9 (C-8)，125.6 (C-1′)，124.4 (C-7)，120.8 (C-8a)，118.2 (C-5)，114.0 (C-9a)，105.7 (C-2′，6′)，96.5 (C-1)，77.8 (C-8′)，76.7 (C-7′)，59.9 (C-9′)，56.2 (3′，5′-OCH3)，55.8 (2-OCH3).其波谱数据与文献报道的化合物基本一致[11]，故鉴定该化合物为cadensin D.

化合物9 C24H20O9，浅黄色粉末，ESI-MS：m/z453 [M+H]+.1H NMR (600 MHz，DMSO-d6)δH：9.93(1H，s，2-OH)，8.59 (1H，s，4′-OH)，8.17 (1H，dd，J=8.0，1.6 Hz，H-8)，7.83 (1H，ddd，J=8.0，7.1，1.6 Hz，H-6)，7.66 (1H，d，J=8.0 Hz，H-5)，7.46 (1H，m，H-7)，7.16 (1H，s，H-1)，6.80 (2H，s，H-2′，6′)，5.08 (1H，d，J=7.8 Hz，H-7′)，4.42 (1H，m，H-8′)，3.78 (6H，s，3′，5′-OCH3)，3.74(1H，m，H-9′)，3.46 (1H，dt，J=12.0，4.6 Hz，H-9′).13C NMR (150 MHz，DMSO-d6)δC：174.9 (C-9)，155.4 (C-10a)，148.0 (C-5′，3′)，143.8 (C-2)，140.0 (C-4a)，139.3 (C-3)，136.2 (C-4′)，134.7 (C-6)，132.7 (C-4)，125.9 (C-8)，125.8 (C-1′)，124.1 (C-7)，120.7 (C-8a)，118.1 (C-5)，114.3 (C-9a)，105.6 (C-2′，6′)，100.1 (C-1)，77.7 (C-8′)，76.5 (C-7′)，59.9 (C-9′)，56.2 (3′，5′-OCH3).其波谱数据与文献报道的化合物基本一致[12]，故鉴定该化合物为subalatin.

化合物10 C24H20O8，浅黄色晶体，ESI-MS：m/z437 [M+H]+.1H NMR (600 MHz，DMSO-d6)δH：9.24 (1H，s，4′-OH)，8.20 (1H，dd，J=8.0，1.6 Hz，H-8)，7.85 (1H，m，H-6)，7.68 (1H，d，J=8.4 Hz，H-5)，7.48(1H，dd，J=8.0，2.0 Hz，H-7)，7.20 (1H，s，H-1)，7.07(1H，d，J=1.9 Hz，H-2′)，6.91 (1H，dd，J=8.1，1.9 Hz，H-6′)，6.84 (1H，d，J=8.1 Hz，H-5′)，5.09 (1H，d，J=7.9 Hz，H-7′)，4.41 (1H，m，H-8′)，3.86 (3H，s，3′-OCH3)，3.79 (3H，s，2-OCH3)，3.74 (1H，m，H-9′)，3.44 (1H，m，H-9′).13C NMR (150 MHz，DMSO-d6)δC：174.8 (C-9)，155.3 (C-10a)，147.7 (C-3′)，147.3(C-4′)，145.9 (C-2)，141.3 (C-4a)，139.6 (C-3)，134.9(C-6)，132.5 (C-4)，126.6 (C-1′)，125.9 (C-8)，124.3(C-7)，120.9 (C-6′)，120.8 (C-8a)，118.1 (C-5)，115.4(C-5′)，113.9 (C-9a)，112.1 (C-2′)，96.5 (C-1)，77.8(C-8′)，76.4 (C-7′)，59.9 (C-9′)，55.8 (2，3′-OCH3).其波谱数据与文献报道的化合物基本一致[13]，故鉴定该化合物为kielcorin.

化合物11 C18H14O6，黄色固体，ESI-MS：m/z327 [M+H]+.1H NMR (600 MHz，CD3OD)δH：7.60(1H，d，J=8.7 Hz，H-8)，7.05 (1H，d，J=10.1 Hz，H-14)，6.89 (1H，d，J=8.7 Hz，H-7)，6.14 (1H，s，H-2)，5.69(1H，d，J=10.1 Hz，H-13)，1.47 (6H，s，15，16-CH3).13C NMR (150 MHz，CD3OD)δC：182.0 (C-9)，164.2(C-1)，161.7 (C-3)，153.6 (C-4a)，153.2 (C-6)，147.8(C-10a)，133.9 (C-5)，128.2 (C-13)，117.8 (C-8)，116.2(C-14)，114.9 (C-8a)，113.9 (C-7)，103.8 (C-9a)，102.6(C-4)，99.7 (C-2)，79.3 (C-12)，28.5 (C-15，16).其波谱数据与文献报道的化合物基本一致[14]，故鉴定该化合物为异巴西红厚壳素.

化合物12 C18H14O6，黄色粉末，ESI-MS：m/z327 [M+H]+.1H NMR (600 MHz，Acetone-d6)δH：13.39 (1H，s，1-OH)，8.03 (1H，d，J=10.2 Hz，H-14)，6.82 (1H，s，H-5)，6.33 (1H，d，J=2.1 Hz，H-4)，6.20(1H，d，J=2.1 Hz，H-2)，5.93 (1H，d，J=10.2 Hz，H-13)，1.46 (6H，s，H-15，16).13C NMR (150 MHz，Acetoned6)δC：183.1 (C-9)，165.5 (C-1)，164.8 (C-3)，158.2 (C-6)，154.1 (C-4a)，153.8 (C-10a)，138.8 (C-7)，133.6 (C-13)，121.5 (C-14)，120.9 (C-8)，108.4 (C-8a)，103.9 (C-9a)，103.5 (C-5)，98.7 (C-2)，93.9 (C-4)，76.8 (C-12)，27.1 (C-15，16).其波谱数据与文献报道的化合物基本一致[15]，故鉴定该化合物为toxyloxanthone B.

化合物13 C18H16O6，黄色固体，ESI-MS：m/z329 [M+H]+.1H NMR (600 MHz，CD3OD)δH：7.58(1H，d，J=8.7 Hz，H-8)，6.88 (1H，d，J=8.7 Hz，H--7)，6.13 (1H，s，H-2)，4.53 (1H，q，J=6.6 Hz，H-12)，1.62(3H，s，H-14)，1.40 (3H，d，J=6.6 Hz，H-16)，1.33 (3H，s，H-15).13C NMR (150 MHz，CD3OD)δC：181.9 (C-9)，167.3 (C-1)，165.3 (C-3)，154.4 (C-4a)，153.2 (C-6)，147.8 (C-4b)，134.2 (C-5)，117.6 (C-8)，115.1 (C-8a)，114.4 (C-4)，113.4 (C-7)，103.9 (C-8b)，94.1 (C-2)，92.3 (C-12)，44.9 (C-13)，25.9 (C-14)，21.4 (C-16)，14.6 (C-15).其波谱数据与文献报道的化合物基本一致[16]，故鉴定该化合物为2-deprenylrheediaxanthone B.

化合物14 C13H8O4，黄色针晶，ESI-MS：m/z229 [M+H]+.1H NMR (600 MHz，CD3OD)δH：7.62(1H，t，J=8.4 Hz，H-3)，7.51 (1H，d，J=3.0 Hz，H-8)，7.43 (1H，d，J=9.0 Hz，H-5)，7.31 (1H，dd，J=9.0，3.0 Hz，H-6)，6.95 (1H，dd，J=8.4，0.8 Hz，H-4)，6.73 (1H，dd，J=8.4，0.8 Hz，H-2).13C NMR (150 MHz，CD3OD)δC：183.5 (C-9)，162.9 (C-1)，157.8 (C-4a)，155.6 (C-7)，151.5 (C-10a)，137.9 (C-3)，126.4 (C-6)，122.2 (C-8a)，120.3 (C-5)，110.7 (C-2)，109.5 (C-9a)，109.2 (C-4)，108.1 (C-8).其波谱数据与文献报道的化合物基本一致[17]，故鉴定该化合物为1,7-二羟基氧杂蒽酮.

化合物15 C15H14O5，ESI-MS：m/z275 [M+H]+.1H NMR (600 MHz，CDCl3)δH：6.84 (1H，d，J=8.8 Hz，H-9)，6.57 (1H，d，J=2.9 Hz，H-6)，6.44 (1H，dd，J=8.8，2.9 Hz，H-8)，6.23 (1H，s，H-2)，3.91 (3H，s，4-OCH3)，3.83 (3H，s，1-OCH3)，3.74 (3H，s，7-OCH3).13C NMR (150 MHz，CDCl3)δC：156.2 (C-7)，144.3 (C-4a)，143.9 (C-1)，142.0 (C-5a)，136.5 (C-3)，134.8 (C-9a)，128.3 (C-4)，125.4 (C-9b)，116.6 (C-9)，108.8 (C-8)，102.5 (C-6)，93.7 (C-2)，61.8 (4-OCH3)，56.4 (1-OCH3)，55.7 (7-OCH3).其波谱数据与文献报道的化合物基本一致[18]，故鉴定该化合物为3-羟基-1,4,7-三甲氧基二苯并呋喃.

化合物16 C11H12O4，浅棕色固体，ESI-MS：m/z209 [M+H]+.1H NMR (600 MHz，CD3OD)δH：7.53 (1H，d，J=15.9 Hz，H-α)，7.03 (1H，d，J=2.1 Hz，H-2)，6.94 (1H，dd，J=8.2，2.1 Hz，H-6)，6.77 (1H，d，J=8.2 Hz，H-5)，6.25 (1H，d，J=15.9 Hz，H-β)，4.21(2H，q，J=7.1 Hz，-OCH2-)，1.31 (3H，t，J=7.1 Hz，-CH3).13C NMR (150 MHz，CD3OD)δC：169.3 (C=O)，149.6 (C-α)，146.8 (C-3)，146.7 (C-4)，127.7 (C-1)，122.9 (C-6)，116.5 (C-5)，115.2 (C-2)，115.0 (C-β)，61.4 (-OCH2-)，14.6 (-CH3).其波谱数据与文献报道的化合物基本一致[19]，故鉴定该化合物为咖啡酸乙酯.

化合物17 C7H6O2,白色粉末，ESI-MS：m/z123 [M+H]+.1H NMR (600 MHz，CD3ODδH)：8.03(2H，m，H-2，6)，7.59 (1H，m，H-4)，7.44 (2H，m，H-3，5).13C NMR (150 MHz，CD3OD)δC：169.9 (C-7)，134.0 (C-4)，132.0 (C-1)，130.7 (C-2，6)，129.5 (C-3，5).其波谱数据与文献报道的化合物基本一致[20]，故鉴定该化合物为苯甲酸.

3 结论

运用NMR、MS 等现代波谱方法鉴定化合物的化学结构，从贵州金丝桃（H.kyouytchense）乙酸乙酯部位提取物中分离鉴定了17 个化合物，分别鉴定为无羁萜（1）、白桦脂酸（2）、3,4-二羟基-2-甲氧基氧杂蒽酮（3）、1,3-二羟基-2-甲氧基氧杂蒽酮（4）、1,3-二羟基-5-甲氧基氧杂蒽酮（5）、1,5-二羟基-6,7-二甲氧基氧杂蒽酮（6）、2,3-二甲氧基氧杂蒽酮（7）、cadensin D（8）、subalatin（9）、kielcorin（10）、异巴西红厚壳素（11）、toxyloxanthone B（12）、2-deprenylrheediaxanthone B（13）、1,7-二羟基氧杂蒽酮（14）、3-羟基-1,4,7-三甲氧基二苯并呋喃（15）、咖啡酸乙酯（16）、苯甲酸（17）.除化合物14外，其余化合物均为首次从该植物中分离得到.现有研究表明，多环多异戊烯基取代的间苯三酚衍生物（PPAPs）类天然产物是藤黄科植物的标志性化学成分[21]，但目前在贵州金丝桃中尚未分离得到该类化合物，而本课题组也正在对该植物的其他组分进行研究，争取分离得到该类结构新颖复杂的天然产物.本文报道的17 个化合物主要是以氧杂蒽酮类为主，其中化合物1～2 为三萜类化合物，化合物3～14 为氧杂蒽酮类化合物，化合物15 为二苯并呋喃类化合物，化合物16～17 为酚酸类化合物.分离得到的化合物1、化合物6、化合物13 在已有报道中表明具有良好的生物活性：无羁萜在基础状态下能明显改善L6 肌细胞的胰岛素抵抗状态[22]，1,5-二羟基-6,7-二甲氧基氧杂蒽酮有较好的抗氧化活性[10]，2-deprenylrheediaxanthone B 表现出一定的抗炎活性[23].