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孕妇血清IgG型抗A(B)抗体效价联合新生儿网织红细胞水平在新生儿溶血病诊断中的应用价值

2022-11-28吴海燕汪光斌

解放军医药杂志 2022年9期
关键词:效价阳性率红细胞

黄 进,吴海燕,汪光斌

新生儿溶血病(hemolytic disease of newborn, HDN)是因母体与新生儿血型不合导致的溶血,母体产生抗体后通过胎盘输入胎儿体内,引起胎儿红细胞破坏,以ABO溶血较为常见。HDN可引起患儿贫血、黄疸、肝脾大、水肿等症状,严重者可导致神经系统后遗症或死亡[1]。目前HDN的常规治疗以补液、蓝光照射、静脉注射免疫球蛋白等为主,严重者需要接受换血治疗[2]。早期预测HDN的发生有助于临床早期给予积极的治疗,对患儿预后有益。血清IgG抗A(B)抗体是红细胞膜上抗原簇诱导产生的抗体,可形成免疫性复合物,诱导红细胞膜的破坏、溶解,与HDN的发生密切相关[3]。网织红细胞是外周血中尚未成熟的红细胞,溶血发生时,骨髓造血细胞代偿性增生,导致血液循环中网织红细胞增多,因此在HDN早期网织红细胞水平会升高[4]。既往研究只针对单一指标,而二者联合检测的研究报道较少,故本研究探讨孕妇血清IgG型抗A(B)抗体效价联合新生儿网织红细胞水平检测在HDN诊断中的应用价值。

1 资料与方法

1.1临床资料 选取2021年1月—2022年1月在我院进行全程产检的O型血孕妇270例,年龄21~40(29.92±4.11)岁;胎龄37~41(39.20±1.21)周;配偶血型A型105例,B型91例,AB型74例。纳入标准:单胎妊娠;配偶ABO血型为A型、B型或AB型;夫妻Rh血型均为阳性;孕妇无输血史;孕妇及家属知情同意。排除标准:有妊娠高血压综合征等并发症;合并有肝肾功能障碍、恶性肿瘤、血液系统疾病等严重疾病。

1.2IgG型抗A(B)抗体效价检查 采用微柱凝胶法检测孕妇IgG型抗A(B)抗体效价。入院后当日或次日清晨抽取孕妇空腹状态下静脉血标本3 ml,置于EDTA抗凝管,离心处理,转速3000 r/min,离心10 min,取上层血清50 μl,加入巯基乙醇50 μl。充分混匀后密封放置于37 ℃水浴,充分破坏IgM抗体。吸取经2-ME处理后的血清,加入生理盐水稀释,稀释度分别为1∶2、1∶4、1∶8、1∶16、1∶32、1∶64、1∶128、1∶256、1∶512、1∶1024、1∶2048,采用微柱凝胶抗人球蛋白检测卡检测IgG抗体效价,采用DiaMed公司的空白微柱,将生理盐水稀释的血清加入微柱孔,25 ℃孵育30 min,离心、洗涤,加入50 μl MASPAT抗人IgG,加入指示细胞,震荡、离心后观察结果。将效价≥1∶64定义为阳性。

1.3网织红细胞水平检查 于新生儿娩出后次日采集新生儿末梢血标本检测网织红细胞水平,取试管加入碱性染料2滴,加入新鲜全血2滴混匀,室温放置15 min,取染色血标本1滴制成薄血涂片,自然干燥后于显微镜低倍镜下选择红细胞分布均匀、着色好的部位。将Miller窥盘放置于目镜内,在Miller窥盘的小格A内计数成熟红细胞,在大格B内计数网织红细胞。

2 结果

2.1HDN发生情况 270例新生儿中,最终确诊HDN 22例,发生率为8.15%。HDN组和非HDN组产妇年龄、新生儿胎龄、性别、出生体质量、出生时C反应蛋白、白细胞、中性粒细胞、总胆红素、血红蛋白水平等比较差异无统计学意义(P>0.05);HDN组出生时网织红细胞水平高于非HDN组(P<0.01)。见表1。

表1 发生和未发生HDN新生儿一般资料比较

2.2不同血清IgG型抗A(B)抗体效价产妇HDN发生情况比较 IgG型抗A(B)抗体效价<1∶64、1∶64、1∶128、≥1∶256的产妇HDN发生率分别为2.22%(4/180)、12.50%(7/56)、27.27%(6/22)、41.67%(5/12)。IgG型抗A(B)抗体效价<1∶64的产妇HDN发生率低于IgG型抗A(B)抗体效价1∶64、1∶128和≥1∶256的产妇(P<0.05);IgG型抗A(B)抗体效价1∶64、1∶128和≥1∶256的产妇HDN发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。

2.3IgG型抗A(B)抗体阳性的影响因素 经产妇IgG型抗A(B)抗体阳性率高于初产妇(P<0.05);年龄≥30岁孕妇IgG型抗A(B)抗体阳性率高于年龄<30岁孕妇(P<0.01);不同体质量指数、母-父血型组孕妇IgG型抗A(B)抗体阳性率比较差异无统计学意义(P>0.05)。见表2。

表2 孕妇IgG型抗A(B)抗体阳性的影响因素[例(%)]

2.4HDN发生的影响因素 不同产次、年龄、体质量指数及母-父血型产妇HDN发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。见表3。

表3 HDN发生的影响因素分析[例(%)]

2.5IgG型抗A(B)抗体效价联合网织红细胞水平预测HDN的价值 IgG型抗A(B)抗体效价联合网织红细胞水平预测HDN的ROC曲线下面积为0.981,明显大于二者单独预测的0.764[IgG型抗A(B)抗体效价]和0.876(网织红细胞水平),差异有统计学意义(P<0.05),其预测HDN的敏感度和特异度分别为91.00%和96.00%,见图1。

图1 IgG型抗A(B)抗体效价联合网织红细胞水平预测HDN价值的ROC曲线

3 讨论

HDN属于同种免疫性溶血性疾病,轻症者症状不明显或仅出现黄疸,严重者可导致中枢神经系统永久性损伤[5]。分析原因,由于溶血发生后过量的红细胞被破坏,产生大量的胆红素等代谢产物,而新生儿肝脏功能尚不成熟,不能及时将代谢产物排出体外,可引起高胆红素血症。而血液中胆红素水平过高时,会沉积在脑干、基底核等中枢神经系统重要部位,损伤神经细胞[6]。本研究发现,270例O型血孕妇中确诊HDN 22例,发生率为8.15%。提示HDN在临床中比较常见。

HDN的发生机制与抗原抗体反应有关,胎儿从父体得到母体没有的红细胞抗原,经胎盘进入母体血液循环,诱导母体产生IgG类抗体。IgG类抗体通过胎盘进入胎儿体内,引起胎儿红细胞发生抗原抗体反应而遭到破坏[7]。邓虹艳等[8]研究认为,随着孕妇血清IgG抗A(B)抗体效价的升高,HDN的发生率随之增高,本研究结果与其报道一致。有报道认为,与初产妇相比,经产妇HDN的发生风险更高[9]。本研究还发现,IgG型抗A(B)抗体阴性孕妇HDN发生率明显低于IgG型抗A(B)抗体阳性孕妇。经产妇IgG型抗A(B)抗体阳性率明显高于初产妇,年龄≥30岁孕妇IgG型抗A(B)抗体阳性率明显高于年龄<30岁孕妇。提示妊娠次数、孕妇年龄与血清IgG抗A(B)抗体效价具有一定的相关性,也可能与HDN的发生有关。这可能是由于每次妊娠结束,胎盘绒毛膜受损,胎儿红细胞进入母体血液循环中,并刺激其产生抗体,而多次妊娠可受到抗原的反复刺激,导致IgG类抗体水平较高,引起胎儿红细胞抗原抗体反应更加严重[10-11]。对于本研究中得出的高龄产妇血清IgG抗A(B)抗体阳性率更高的结果,推测可能与高龄产妇机体免疫功能较差、接触抗原的机会较多有关,但目前有关年龄对血清IgG型抗A(B)抗体阳性率影响的相关报道较少,确切机制尚有待于进一步研究阐释。

网织红细胞是反映骨髓造血能力的常规指标,临床常用于贫血、骨髓抑制后造血功能的评估[12]。有研究发现,当HDN发生时,其网织红细胞计数有所升高[13]。本研究发现,HDN患儿出生时网织红细胞水平明显高于非HDN患儿。这是由于溶血发生时,可导致骨髓造血细胞代偿性增生,未成熟细胞参与血液循环,从而引起血中网织红细胞水平升高[14-15]。

本研究采用ROC曲线分析发现,IgG型抗A(B)抗体效价联合网织红细胞水平预测HDN的ROC曲线下面积高于二者单独预测,其预测HDN的敏感度和特异度分别为91.00%和96.00%。提示IgG型抗A(B)抗体效价监测联合新生儿网织红细胞水平检测有助于预测HDN,具有较高的敏感度和特异度。在今后的临床工作中,应对O型血孕妇进行IgG型抗A(B)抗体效价监测,并对新生儿进行网织红细胞水平检测,以便及早发现HDN风险,并及时处理。

综上所述,IgG型抗A(B)抗体效价监测联合新生儿网织红细胞水平检测有助于预测HDN,同时IgG型抗A(B)抗体效价与孕妇年龄、产次有关。

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