宫颈癌组织中CHI3L1、NRIP1蛋白及LCoR的表达与临床病理特征、预后的相关性

敬文娜 朱峥燕

宫颈癌为临床常见的女性生殖系统恶性肿瘤，患病率较高，且呈逐年上升趋势[1-2]。现阶段，临床针对宫颈癌患者多通过放化疗、手术等措施进行治疗，虽能在一定程度上控制病情，然而治疗效果与临床的预期尚存一段距离，患者死亡几率仍处于较高水平[3]。伴随临床医学手段的快速进步，分子靶向治疗现已逐步发展为临床诊治宫颈癌的新型方式，但临床尚未对该病的具体发病机制进行全部明晰，因而临床缺少与之对应的分子治疗靶点。因此，临床需积极的寻求宫颈癌的发病机制，探寻有关分子标志物，以指导临床施行个体化的治疗。几丁质酶-3样蛋白-1(CHI3L1)由巨噬细胞、中性粒细胞、肿瘤细胞等多种细胞释放，在多种肿瘤细胞内均存异常表达。而核受体相互作用蛋白1(NRIP1)在肿瘤细胞的增殖、凋亡内存在重要的调控能力，在各不相同的肿瘤细胞内均异常表达[4]。而配体依赖性辅助抑制因子(LCoR)是核受体有关蛋白的配体依赖辅助抑制因子，能够对肿瘤的发生、发展造成一定影响[5]。本研究以72例宫颈癌患者为研究对象，探究CHI3L1、NRIP1、LCoR在宫颈癌组织内的表达意义及其与临床病理特征、预后的联系，报告如下。

1 材料与方法

1.1 一般资料

选取本院2018年2月至2019年2月收治的72例宫颈癌患者为研究对象。纳入标准：全部宫颈癌患者均经病理检查证实；所有患者的病历资料齐全；患者纳入均遵循自愿原则，依从性较高，且签署知情同意书。排除标准：存在精神疾患者；伴有凝血功能异常者；合并严重的脑器质性疾病者；存在其他恶性肿瘤者；合并其他妇科疾病者；存在血液系统病症者。所有患者年龄34～62岁，平均年龄(49.57±5.36)岁；体重指数18.3～27.6 kg/m2，平均体重指数(23.59±1.46)kg/m2；国际妇产科联盟(FIGO)分期：13例Ⅰ期，15例Ⅱ期，32例Ⅲ期，12例Ⅳ期；肿瘤浸润深度：31例浅肌层，41例深肌层；肿瘤最大直径：40例<3 cm、32例≥3 cm；淋巴结转移：34例未转移，38例转移；病理类型：35例鳞癌，37例腺癌。

1.2 方法

标本采集：于手术过程中采集全部患者的癌组织与癌旁组织(距肿瘤组织边缘≥5 cm)标本，用10%甲醇溶液固定24 h，常规石蜡包埋处理，制作为4 μm的组织切片。免疫组织化学法测定CHI3L1、NRIP1、LCoR表达情况：将制作完毕的石蜡标本放在二甲苯溶液之中施行10 min的脱蜡处理，然后调换二甲苯溶液再一次的放置10 min，以梯度酒精施以脱水；将标本放在蛋白酶修复液中，并于常温环境之下进行30 min的孵育，之后将标本放在3%过氧化氢溶液内，以去过氧化物酶封闭液封存，孵育10 min过后用磷酸缓冲盐溶液(PBS)清洗；放入山羊血清后封闭30 min，滴加一抗，于室温下静置3 h，并采用PBS清洗3次，2 min/次，滴加二抗，于室温环境之下孵育0.5 h，PBS清洗3次，2 min/次，然后采用苏木精施行染色，脱水并封片。由两名高年资的病理医师进行结果的判读，在显微镜下观察，依照染色细胞百分比与染色程度评分评判表达情况。染色细胞百分比：0分：在5%之下；1分：≥5%～25%；2分：>25%～50%；3分：>50%之上。染色强度：0分：无色；1分：浅黄色；2分：棕黄色；3分：棕褐色，染色细胞百分比与染色强度得分相乘为总分，0～2分为阴性，3～9分为阳性。

1.3 观察指标

(1)癌组织及癌旁组织中CHI3L1、NRIP1、LCoR阳性表达率。(2)CHI3L1、NRIP1、LCoR阳性表达与临床病理特征的关系。(3)CHI3L1、NRIP1、LCoR阳性表达与预后的关系。

1.4 统计学分析

2 结果

2.1 CHI3L1、NRIP1、LCoR阳性表达率

癌组织中CHI3L1、NRIP1、LCoR阳性表达率均高于癌旁组织，有统计学差异(P<0.05)。见表1。

表1 CHI3L1、NRIP1、LCoR阳性表达率对比(例，%)

2.2 CHI3L1、NRIP1、LCoR阳性表达与临床病理特征的关系

宫颈癌组织内CHI3L1、NRIP1、LCoR表达水平与年龄、病理类型无关(P>0.05)，与FIGO分期、肿瘤浸润深度、肿瘤最大直径、淋巴结转移有关(P<0.05)。见表2。

表2 宫颈癌组织中CHI3L1、NRIP1、LCoR阳性表达与临床病理特征的关系(例，%)

2.3 CHI3L1、NRIP1、LCoR阳性表达与预后的关系

Kaplan-Meier结果显示：CHI3L1、NRIP1、LCoR阳性表达患者的3年生存率均低于阴性表达，有统计学差异(P<0.05)。见图1-3。

图1 CHI3L1阳性表达者Kaplan-Meier生存曲线分析

图2 NRIP1阳性表达者Kaplan-Meier生存曲线分析

图3 LCoR阳性表达者Kaplan-Meier生存曲线分析

3 讨论

宫颈癌在临床的患病率较高，在女性恶性肿瘤中仅次于乳腺癌[6]。宫颈癌发病早期临床表现较为隐匿，或缺乏典型性，患者常不重视，继而造成大部分的患者经临床证实时病情已发展到中晚期，从而错过最佳手术根治时间，加大临床治疗难度，给患者生命安全造成威胁[7-8]。伴随分子诊断与靶向治疗措施的持续改进，宫颈癌患者的短期死亡率呈明显降低趋势，然而此类患者的整体预后情况仍处在相对较差水平[9-10]。由于临床对于宫颈癌检查缺乏早期的诊断标志物，从而导致误诊、漏诊率处于较高水平，探寻相关生物标志物对宫颈癌患者预后进行准确预测至关重要[11]。

CHI3L1为分泌型糖蛋白，属哺乳动物几丁质酶样蛋白家族，可通过调节氧化损伤、炎症小体激活等，在抵抗病原体、抗原诱导的损伤等方面发挥重要作用[12]。CHI3L1在多种人类肿瘤中过高表达，如乳腺癌、卵巢癌等，CHI3L1表达的异常与转移性癌患者预后不良与生存周期缩短联系紧密。NRIP1可与各不相同的蛋白发生相互作用，以此对细胞凋亡与机体免疫等信号传导过程进行干扰[13]。LCoR可通过与甲状腺激素受体相互结合来起到抑制功效，从而对炎症、肿瘤发生构成影响。本研究结果显示，癌组织中CHI3L1、NRIP1、LCoR阳性表达率均高于癌旁组织，提示在宫颈癌患者的病灶组织内CHI3L1、NRIP1、LCoR呈明显的异常表达状态，对上述三项指标进行早期的检测，可及时明晰宫颈癌患者病情。其原因为肿瘤细胞之中的凋亡抑制因子会使得NRIP1产生泛素化，且还能够改变泛素化NRIP1的构象，使得其与生存激酶1结合，最终加速肿瘤细胞的增殖。本研究结果显示，宫颈癌组织内CHI3L1、NRIP1、LCoR与FIGO分期、肿瘤浸润深度、肿瘤最大直径、淋巴结转移有关，表明三项指标与宫颈癌的局部浸润与远处转移联系紧密。本研究Kaplan-Meier结果显示：CHI3L1、NRIP1、LCoR阳性表达患者的3年生存率均低于阴性表达。由此可见，临床可将CHI3L1、NRIP1、LCoR作为宫颈癌患者预后评估的重要参考指标。

综上所述，宫颈癌患者的病灶组织内CHI3L1、NRIP1、LCoR表现为过高水平，三者与患者FIGO分期、肿瘤浸润深度等密切联系，参与癌症的发生、发展过程，且阳性表达患者的生存率更低，预后更差，监测CHI3L1、NRIP1、LCoR可为宫颈癌患者预后评估及治疗方案的制定提供参考。