875 例儿童食物特异性IgG 抗体检测结果分析

崔 敏，林 宏，王青波

（1 北京新世纪儿童医院检验科 北京 100045）

（2 北京市肛肠医院检验科 北京 100120）

食物不耐受与疾病的关系已经得到医学界广泛关注。食物不耐受由IgG 抗体介导，具有发病迟缓、起病隐匿、无特异性等特点，食物不耐受可导致儿童出现呕吐、急慢性腹痛、腹泻等胃肠道症状，湿疹、荨麻疹、血管神经性水肿、其他皮疹等皮肤症状，哮喘、腺样体肥大等呼吸道症状，头痛、运动行为异常等神经系统症状，部分儿童在确诊前存在发育不良的情况[1-2]。基于此，本研究对疑似食物不耐受疾病血清样本特异性抗体检测结果进行分析，初步了解儿童食物不耐受种类和特点，为疾病预防和儿童饮食计划制定提供参考。

1.资料与方法

1.1 一般资料

选取2017 年1 月—2021 年12 月北京新世纪儿童医院收治的食物不耐受896 例患儿。符合《赫尔辛基宣言》要求。

纳入标准：①临床有食物不耐受相关表现；②同一患者首次就诊确诊；③标本留取符合要求；④检测结果显示IgG 抗体阳性；⑤符合医院伦理委员会审查要求。排除标准：①患儿有先天性疾病；②早产患儿；③使用免疫抑制剂治疗患者；④近期使用血制品患者；⑤其他可能影响诊断判定的疾病。

1.2 方法

（1）标本采集：患儿空腹至少4 h，取静脉血3 ～4 mL，3 000 r/min 离心10 min，分离血清样本进行检测，标本的保存严格按照试剂说明书要求进行。（2）试剂和方法：采用美国Biomeric 公司生产的食物特异性IgG 抗体（sIgG）检测试剂盒，定性检测血清中14 种食物：牛肉、鸡肉、猪肉、鳕鱼、玉米、螃蟹、虾、鸡蛋、牛奶、蘑菇、大米、小麦、大豆、西红柿sIgG。首先制备浓度为50 U/mL、100 U/mL、200 U/mL、400 U/mL 的标准血清，将稀释液（作为空白对照）、标准血清、阳性质控和1:100稀释的患者血清100 μL 分别加入反应板相应位置，封口膜封闭反应板室温（22 ～25 ℃）孵育1 h；用300 μL 清洗液清洗每个反应孔3 次，将反应板拍干；在每个反应孔加入100 μL 结合物，室温孵育30 min；清洗微孔板；在反应孔加入100 μL 底物液，室温孵育10 min；在每个反应控加50 μL 终止液。用酶标仪在450 nm 读取各孔吸光度值，以标准血清浓度为横坐标，相应吸光度值为纵坐标，绘制标准曲线，根据标准曲线及每个反应孔的吸光度值计算sIgG 水平。

1.3 观察指标

酶联免疫法（enzyme-linked immuno sorbent assay,ELISA）检测结果＜50 U/mL，判定结果为0 级阴性；检测结果≥50 U/mL，结果判定为阳性，50 ～100 U/mL为1 级轻度敏感，100 ～200 U/mL 为2 级中度敏感，≥200 U/mL 为3 级高度敏感。

1.4 统计学方法

使用SPSS 23.0 统计软件进行数据处理。符合正态分布的计量资料采用（± s）表示，行t检验；计数资料用频数（n）和百分率（%）表示，组间比较采用χ2检验。P＜0.05 为差异有统计学意义。

2.结果

2.1 食物不耐受检测情况

896 份检测血清中，875 份血清sIgG 阳性，阳性率97.7%。患儿平均年龄（5.3±3.07），其中男性患者581例，平均年龄（5.3±3.07）岁；女性患儿294 例，平均年龄（4.9±3.07）。在所测定的14 种食物中，sIgG 阳性率由高到低依次为鸡蛋、牛奶、小麦、西红柿、大豆、大米、鳕鱼、玉米、鸡肉、虾、螃蟹、蘑菇、猪肉、牛肉。鸡蛋、牛奶sIgG 阳性率较高，均在80%以上，蘑菇、猪肉、牛肉的sIgG 阳性率低，在5%以下，见表1。

表1 875 例阳性标本对不同食物sIgG 阳性检测结果汇总

2.2 不同年龄、性别病例食物不耐受分布情况

将875 例病例分为3 组。婴儿组：年龄＜1 岁，幼儿组：1 ≤年龄＜3 岁，儿童组：年龄≥3 岁。不同年龄段鸡蛋、小麦、西红柿、大豆、大米、玉米、虾、牛肉sIgG 检测结果比较，差异有统计学意义（P＜0.05）；不同年龄段病例牛奶、鳕鱼、鸡肉、蘑菇、螃蟹、猪肉sIgG 检测结果比较，差异无统计学意义（P＞0.05）；鸡蛋、鳕鱼、鸡肉、蘑菇阳性率随年龄增长呈增加趋势，牛奶、西红柿、大豆、小麦、大米、玉米、虾、牛肉sIgG 阳性率随着年龄的增长而下降，详见表2。不同性别儿童中sIgG 阳性率比较，差异无统计学意义（P＞0.05），见表3。

表2 不同年龄组病例食物不耐受sIgG 结果比较[n（%）]

表3 不同性别病例食物不耐受结果比较[n（%）]

3.讨论

当前食物不耐受发病机制尚不明确，被广为接受的观点是食物不耐受是一种复杂的变态反应性疾病，进入机体的食物因消化酶的缺乏或消化酶分解能力不足，导致食物不能充分消化为小分子物质，人体的免疫系统将进入人体的某种或多种大分子食物当成异物，从而针对这些物质产生特异性IgG 抗体，IgG 抗体与食物颗粒形成免疫复合物，免疫复合物不能从体内排除，长期积聚，从而引起机体发生炎性反应，表现为相应系统的疾病或症状，因表现隐匿，不易察觉。相关研究显示，肠易激综合征（irritable bowel syndrome, IBS）、炎性肠病（inflammatory bowel disease, IBD）、重度抑郁症（major depressive disorder, MDD）、抽动症（tourette syndrome,TS）、强直性脊柱炎（ankylosing spondylitis, AS）、湿疹及荨麻疹等皮肤病与食物不耐受发生有关[3-7]。

不耐受食物通常是人们常食用的食物，本研究中的不耐受食物依次为鸡蛋（88.46%）、牛奶（83.20%）、小麦（55.43%）、西红柿（44.23%），不耐受发生率较低的是蘑菇（4.69%）、猪肉（2.86%）、牛肉（2.17%）。不同地区儿童食物不耐受发病相关报道结果并不一致[8-9]。这种情况的出现，一方面，由于不同地域人们饮食习惯有差异，另一方面，由于遗传因素的影响，不同地区人群对不同食物的消化吸收能力不同。鸡蛋和牛奶是主要不耐受食物，鸡蛋富含优质蛋白，营养丰富，价格低廉，常作人们膳食中的主要营养物质，鸡蛋中的卵类黏蛋白和卵清蛋白、牛奶中的酪蛋白是引起食物不耐受的主要原因[10-11]。婴幼儿辅食添加过程中，尤其要注意由少到多，由单一种类开始的原则。条件允许情况下，应坚持母乳喂养婴儿，对于必须使用奶粉喂养而婴儿表现为不耐受的，应根据情况选择深度水解奶粉或氨基酸奶粉等特殊配方奶粉。

本文结果显示，不同性别儿童食物不耐受检测结果比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。不同年龄段儿童对鸡蛋、小麦、大豆、大米、玉米、虾、牛肉比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。因接触食物种类少，牛奶是婴儿期主要不耐受食物，随着辅食的添加，接触的食物种类不断丰富，一岁以后不耐受食物种类及阳性率随之增加。鸡蛋、鳕鱼、鸡肉、蘑菇阳性率随年龄增长呈增加趋势，牛奶、西红柿、大豆、小麦、大米、玉米、虾、牛肉sIgG 阳性率均随着年龄的增长而下降[12]。既往研究表明，在儿童期不耐受检测阳性率呈上升趋势的食物，随年龄增长呈下降趋势，因婴幼儿消化系统酶含量少，酶活性低，对淀粉、脂肪和蛋白质消化功能差，随年龄增长，消化系统功能不断完善，对食物消化吸收能力亦逐渐增加。

食物不耐受发生具有多种食物引发，较少由单一食物引起的特点[13]。蛋白类食物通常是引起食物不耐受的主要原因，本文结果显示，牛奶与鸡蛋、牛肉，鸡蛋与大豆常同时表现为不耐受，淀粉类的大米和玉米常同时不耐受。α-半乳糖（α-Gal）是哺乳动物红肉中的主要天然抗原[5]，对一种红肉类食物表现为不耐受的患儿在添加其他肉类食物时应注意观察有无不适症状。螃蟹和虾抗原有显著的交叉反[14]；对一种甲壳类不耐受的患儿，应注意其他甲壳类食物食入是否会产生不耐受。

食物不耐受发病隐匿，不易被发现，通过检测sIgG，可以确定不耐受食物，及时规避不耐受食物，能有效避免免疫复合累积造成机体免疫系统超负荷而引起各器官系统症状。对于检测结果显示为0 级的食物可以正常食用，在不耐受食物少的情况下，所有检测阳性的食物均忌食即可。如不耐受食物多，先将检测级别为2 级和3 级的阳性食物忌食，检测级别为1 级的食物轮替，如果忌食食物太多，则需在忌食同时改变烹调习惯或调整饮食结构。益生菌作为非特异性免疫调节因子可以激活免疫细胞，促进B 细胞产生抗体，增强免疫功能。提升患者肠道黏膜的自身预防机制、刺激免疫球蛋白A（IgA）分泌，促使患者体内炎性细胞因子水平升高，改善肠道功能，经血清学检验结果诊断为有食物不耐受表现的患儿，可以适当补充益生菌缓解儿科疾病、呼吸系统疾病、消化系统疾病、心血管疾病、神经系统疾病的症状[15]。

婴幼儿及儿童处于生长发育的阶段，及时发现不耐受食物，制定科学的个人饮食计划，对儿童生长发育和疾病的防治有重要意义。