阳泉市犬利什曼病的综合防控

2022-11-22程中平

中国畜禽种业 2022年10期

程中平

（山西省阳泉市畜牧技术服务中心，山西阳泉 045000）

利什曼病是人犬共患传染病，2009 年利什曼病被列入《人畜共患传染病名录》。2015 年以来，阳泉市犬利什曼病呈暴发性流行趋势，与此同时人感染利什曼病病例快速增长，发病率远高于全省、全国水平。为迅速控制犬利什曼病的流行，阳泉市从2020 年开始开展了犬利什曼病的综合防控。从研究犬利什曼病的传染源、传播途径、易感动物这3 个基本环节入手，研究适合本地区疫情防控的有效措施。主要采取运用不同检测方法，探索综合防控措施，最终达到控制犬利什曼病的目的。

1 犬利什曼病的传播途径、分布及形态

1.1 传播途径

犬利什曼病是由利什曼原虫引起的一种人畜共患病，主要依靠媒介昆虫白蛉进行传播。当白蛉在叮咬人或动物的皮肤进行吸血时，可将体内病原虫体传播给宿主。犬利什曼原虫包括婴儿利什曼原虫（也叫恰氏利什曼原虫）、热带利什曼原虫、和硕大利什曼原虫等，犬利什曼病按照临床分型主要包括内脏型、皮肤型和黏膜型等。

1.2 主要分布

本病是由寄生于内脏的杜氏利什曼原虫引起的双源性人畜共患慢性寄生虫病。本型多见于丘陵山区，分布于甘肃、青海、宁夏、川北、陕北、冀北、山西、辽宁和北京等地。杜氏利什曼原虫寄生于病犬的血液、骨髓、肝、脾、淋巴结的网状内皮细胞中。

1.3 形态

在犬体内的虫体称为无鞭毛体（利杜体），呈圆形，直径2.4～5.2μm，有的呈椭圆形，大小为2.9～5.7μm×1.8～4μm。用瑞氏液染色后，胞质呈浅蓝色，胞核呈红色圆形，常偏于虫体一端，动基体呈紫红色细小杆状，位于虫体中央或稍偏于另一端。

图1 显微镜镜检利什曼原虫无鞭毛体

在传播媒介（白蛉）体内的虫体，称为前鞭毛体（鞭毛体或细滴型）。呈细而长的纺锤形，长12～16μm，前端有一根与体长相当的游离鞭毛，在新鲜标本中，可见鞭毛不断摆动，虫体运动非常活泼。当雌性白蛉吸食病犬（人）或其他患病动物血液时，无鞭毛体被摄入蛉胃，随后在白蛉消化道内发育成为前鞭毛体，并逐步向白蛉的口腔集中，当白蛉再吸健康犬或其他动物血液时，成熟的前鞭毛体便进入健康犬体内，而后失去游离鞭毛成为无鞭毛体，随血液循环到达机体各部。无鞭毛体被巨噬细胞吞噬后，在其中分裂繁殖。

2 潜伏期及临床症状

潜伏期数周、数月乃至1 年以上。病犬早期都没有明显症状，晚期则常出现皮肤损害，表现为脱毛、皮脂外溢、结节和溃疡。以头部尤其是耳、鼻、脸面和眼睛周围最为显著。并伴有食欲缺乏，精神萎靡，消瘦，贫血及嗓音嘶哑等症状，最后死亡。

图2 病犬腿部、面部症状

3 检测方法

3.1 胶体金抗体

胶体金试纸是用一定大小的金颗粒标记特异性抗原或抗体等生物大分子，并吸附在金结合垫上。同时在硝酸纤维素层析膜上，固定相应的抗原或抗体，形成检测线及质量控制线，这样当样品及缓冲液经过加样孔混合并进入样品垫后，通过毛细作用而向另一端移动。经过金标垫后，溶解金标记物并发生免疫性结合，继续层析至检测线及质控线上，被固定的抗体或抗原所捕获，形成肉眼可见的红色条带。试纸上进行层析，一般5～10min，等试纸上的免疫反应发生之后，就可以看到胶体金聚集的位置上有没有红色条带出现，肉眼可见的，这样就知道检测结果了。

图3 胶体金抗体检测示意图

如血清样本等在流动介质的稀释下，临床样本里假如有特异性的病毒抗体，这时候就会被结合垫上的金标抗原所识别形成抗原抗体复合物。这时候继续往吸水垫方向流动，在检测线上（T 线），有另一种针对抗体的抗原，这个抗原识别的抗体表位和金标抗原是不一样的，所以同一个抗体能够同时被这两种抗原所识别。此时金标抗原就会在检测线处被截留一部分，这样就在检测线上显色了。

当然，金标抗原的量肯定是富余的，所以不会只在检测线处被截留，还会继续往吸水垫方向流动，这时候就有一条质控线（C 线）。线上面有的是专门针对金标抗原的抗体（也就是抗-抗体，本质是一种抗体，但是它识别的抗原对象也是一种抗体）。因为质控线识别金标抗体的能力非常强，所以这条线就一定会显色，这也是质控的道理，如果这条线没有显色，那么这次检测结果是无效的。

3.2 酶联免疫抗体

ELISA（酶联免疫吸附试验，酶联免疫试剂盒）方法的基本原理是通过化学方法使酶与抗原或抗体共价结合，形成同时保留免疫特性与酶活性的酶标记物。同时在固相载体上吸附相应抗原或抗体。加入样本后，样本中的待检抗体或抗原会与固相载体上的抗原或抗体发生特异性结合，形成抗原抗体复合物；再加入酶标记物与固相载体上的抗原抗体复合物结合；加入底物显色液后，酶会催化底物显色，进而定性或定量判断样本是否阳性。因此，可通过底物的颜色反应来判定有无相应的免疫反应，颜色反应的深浅与标本中相应抗体或抗原的量呈正比。此种显色反应可通过ELISA（酶联免疫吸附试验，酶联免疫试剂盒）检测仪进行定量测定，这样就将酶化学反应的敏感性和抗原抗体反应的特异性结合起来，使ELISA（酶联免疫吸附试验，酶联免疫试剂盒）方法成为一种既特异又敏感的检测方法。

图4 酶联免疫抗体检测示意图

图5 分子学荧光定量PCR 示意图

3.3 实时荧光定量PCR

实时荧光定量PCR 技术是指在PCR 反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。通过仪器的热循环系统的升降温变化，使得核酸片段得以复制，仪器光学系统采集伴随核酸扩增产生的荧光信号，并对荧光信号进行分析转化、数学运算后，得到扩增曲线。

4 阳泉市犬利什曼病主要传染情况及临床症状

4.1 主要传染情况

传染源主要是病犬，传播媒介是中华白蛉，犬和人群普遍易感。每年5—9 月为白蛉活动季节，犬与犬之间会通过白蛉叮咬相互传播病原体，如果叮咬病犬的白蛉再叮咬到人，就会将这种疾病传播给人[1]。

4.2 临床症状

犬利什曼病一般表现为犬只体温升高，厌食，体重减轻，脱毛、结痂，精神沉郁，呕吐咳嗽，贫血，肝、脾、淋巴结肿大，皮肤和黏膜病变等临床症状。

5 主要流行情况

阳泉市5 个县（区）均有犬病例报告，主要分布在农村以及城乡接合部，重点在郊区几个农村乡镇。人病例以身体素质或体质较差的人群，以2 岁以内婴幼儿和60 岁以上老年人为主。通过利什曼病专项行动，目前，病例增长趋势虽然已经减缓，但利什曼病防治工作是一项长期的艰巨工作任务，此病潜伏期长，自然界中病原有长期存在的可能性，发病风险依然存在，仍然不能掉以轻心，各项防控工作仍需加强。

6 采取综合防控措施

6.1 加强宣传

广泛开展犬利什曼病防治宣传，提高居民自我保护意识能力。充分利用广播、电视、板报、印制宣传单及新媒体广泛宣传，提升人民群众的防病意识。一是群众知晓率提高，就诊意识和诊疗意识增强。2020年，自开展防控行动以来，本地人诊断比例从2017年的10%增加到2020 年的70%。二是犬只管控得到广泛认同，2020 年检测率达90%。三是2020 年白蛉消杀取得成效，监测结果表明，6 月上旬白蛉密度即达到高峰，后逐渐下降，而往年直到6 月底其密度持续上升。四是群众防控意识提高，包括就医、犬只检测处置、灭蛉防蛉等知识均得到提高。但此病防控因其潜伏期长、犬只中隐性感染较多致病源长期存在，自然界中白蛉广泛存在，遏制疫情仍然任重道远，需要全社会共同参与，打好防治攻坚战。

表1 三种方法优缺点对比表

6.2 防蛉灭蛉

人感染利犬什曼病的传播关键点是犬和白蛉。一是每年5—9 月白蛉活动季节用有机磷杀剂喷洒白蛉滋生场所杀灭白蛉。二是广泛开展利什曼病防治宣传，提高居民自我保护意识能力。三是房屋安装纱门、纱窗，出入随手关门；家里平时可用蚊香、驱避剂来驱蛉；白蛉活跃季节睡觉时使用蚊帐[2]，尽量不要在室外露宿；傍晚或夜间外出时最好穿上长袖长裤，裸露部分涂上驱避剂；居住区50m 内尽量不要建畜圈、犬舍，如果建有畜圈或犬舍，需要经常清理卫生，实行拴养措施，并在白蛉活动季对其周边加强消杀，建议每半月进行一次卫生杀虫剂的滞留喷洒。

6.3 犬只管控

按照规定依法养犬、文明养犬，对犬只加强管理，方可预防犬利什曼病传播给人。阳泉市人感染病例属犬源型，犬是本病的自然保虫宿主。经过调查，阳泉市流浪犬和家养犬的带虫率都很高，且根据国家专家的介绍，流行区犬只的检测结果存在大量假阴性，传播风险极大。因此，管控犬只是一项重点防控措施。对犬利什曼病流行地采取禁养家犬，原有家犬可转移、出售到无白蛉地区[3]。流浪犬因其活动范围大，生活环境复杂，更容易被白蛉叮咬；家犬活动范围较为固定，有专人饲养，通过给家养犬定期检测，可减低传播风险，同时对筛检出感染内脏利什曼原虫的犬应及时管控。开展流浪犬管控和家养犬检疫是有效降低发病率的关键环节和必要手段。依据国家和省级防控专家的建议，犬只感染病原体后症状不明显，目前没有完全治愈的办法，给人治疗的药物对犬只没有明显作用，而且容易产生抗药性，对后续人的治疗带来更大的危害。

6.4 病犬筛查

防控犬利什曼病对控制人感染此病是十分有效的措施。从2020 年开始，阳泉市全市范围内开展了犬利什曼病的筛查，由县区政府组织领导，卫生健康、农业农村、公安部门牵头，乡镇、村、社区参与，依托乡镇兽医站、动物诊疗机构对阳泉市犬只进行全面筛查。由于胶体金抗体检测法方便快捷、时间短适合于现场大量样本筛查检测，我们采用胶体金抗体检测法对犬只进行筛查，阳泉市共筛查犬只40643 只，筛查出阳性犬只3079 只，对阳性犬只进行了集中收容管控。