影响兽医实验室抗体检测结果的因素及对策

张文兴

贵州省黔西南州兴仁市农业农村局，贵州黔西南 562300

在兽医的实验室中进行抗体检测，会无可避免的受到各种各样因素的影响。笔者就当前兽医实验室抗体检测的影响因素进行分析，并提出了尽可能避免影响结果的各种因素出现的措施，期望能够提高兽医实验室抗体检测结果的准确性。

1 免疫因素

1.1 实验物种因素

在进行兽医实验室抗体检测的过程中，需要进行实验物种的选择，那么在进行实验物种的选择过程中，要综合性的根据各个方面的情况来进行选择，进行一个正确的物种选择，能够大大增加兽医实验室抗体检测结果的准确性。例如：在进行实验物种选择的过程中，需要进行10 ～20 d 的物种饲养，这样能够在进行饲养的过程中进行观察，观察其饮食状况，判断其是否存在营养不良的情况；观察其生活状态，判断其是否存在隐性的遗传病，并且这样能够更好的了解其健康状态，防止物种自身的原因造成疾病或者死亡[1]。

1.2 实验疫苗因素

如果兽医实验室选择的疫苗存在着质量不合格以及过期的现象，就会影响整个实验的结果，那么对于疫苗的来源要通过正常渠道购买，部分实验室人员为节省成本，通过不合法的渠道购买疫苗，对兽医实验室抗体检测结果造成影响，甚至造成了不可挽回的后果。另外，在进行兽医实验室抗体检测的过程中，要使用单一变量法，每次进行兽医实验室抗体检测只进行一种疫苗的注射，防止多种疫苗的注射造成物种的反应，进而影响检测结果。

2 样品因素

2.1 样品的采集时间

样本的采集时间对于兽医实验室抗体检测也会造成一定的影响，一般情况下，在进行疫苗注射一段时间后，实验室人员要分时间段的进行疫苗作用的记录，尤其是对于记录结果的数值方面，包括极大值和极小值。同时在进行样本的采集和记录过后，还要进行不同物种以及不同疫苗之间的对比，防止偶然性情况对试验检测结果造成干扰。

2.2 样品的采集方法

在兽医实验室抗体检测过程中，样品的采集方法也会直接影响兽医实验室的检测结果，尤其是在面对血清这种采集以及实验都具有一定难度的样本时，一旦出现采集的物种在采集前后出现死亡的情况，就会影响实验结果的准确性。在采集时要采用血清采集的方式，并且要在无菌的条件下进行，这样能够在一定程度上提高整个兽医实验室抗体检测结果的准确性。

2.3 样品的处置和保管

在实验物种血清样品中会有一些凝血因子，这使得其特别容易凝固。那么在样品的保管和处理过程中，通常会在其中添加一些化学试剂，在添加完化学试剂过后，还需要进行离心处理，这样才能够让样品的保管更加妥当。在实际进行化学试剂的添加过程中，有许多实验室人员会直接添加抗凝剂，这样的方式也会造成实验检测结果出现偏差。另外就是在完成前期的各项准备工作之后，还需要采取正确的方式来进行实验样品的保存，可以采用低温冷冻的方式来进行保存，也要注意实验样品的使用期限，防止过期造成的各项检测结果不准确[2]。

2.4 样品的分装

在进行样品的分装过程中，也需要特别的注意，一旦不细致就可能对整个兽医实验室抗体检测造成影响，尤其是对于实验这种需要极其细致的工作来说，更需要认知和严谨。对于不同种类的样品甚至同一种类的样本的不同实验都需要单独的使用滴管和分装瓶来进行，每一个离心管和注射器只能对应一份血清样本，这样能够在样品分装方面给兽医实验室抗体检测的影响降到最低。

3 实验室因素

3.1 实验器械的检测

在进行兽医实验室抗体检测的过程中，需要用到大量的器械，无论是一个器械进行检测，还是多个器械共同进行检测，一旦检测的器械出现了质量问题或者老化和损坏，那么整个兽医实验室抗体检测的结果都会受到影响。在这样的情况下就需要实验室的工作人员在进行仪器采购时，选择质量过关的器械，并且在进行兽医实验室抗体检测之前，要进行误差的测试实验，防止新引进的仪器本身存在着误差，最终导致兽医实验室抗体检测结果出现偏差，也防止其影响整个兽医实验室后期的实验检测。

3.2 实验试剂的检测

每个兽医实验室抗体进行检测的过程中，都会使用到一种或者几种的实验试剂，在这样情况下，实验试剂的准确性以及浓度和纯净度就会直接的影响兽医实验室抗体检测结果。另外，由于每个实验几乎都会使用到实验试剂来进行检测，那么在进行实验试剂的选择时就需要更加谨慎，在进行兽医实验室抗体检测的过程中，也要对实验试剂所需温度、湿度等相关环境因素进行保证，只有在最好的发挥实验试剂的效果之下，进行兽医实验室抗体检测，才能体现整个兽医实验室抗体检测结果的准确性。

3.3 实验室温度

由于兽医实验室抗体检测的科学性，那么对于实验室的温度要求也十分高，一些兽医实验室抗体检测在不同的温度下会产生不同的结果，只有将温度控制在一个实验需要的温度，才能更好的进行兽医实验室抗体检测。正常情况下，要进行兽医实验室抗体检测，温度必须保持在24 ～26 ℃之间，一旦超出这个温度范围，那么这个温度差的缺口将会对许多的分离试验造成影响，可能还会存在一定的催化反应，这就不利于实验人员进行实验过程和结果的记录，这样较快的实验速度会给整个实验过程出现误差造成机会。

4 人为操作因素

4.1 加样操作因素

在人为的操作因素中，尤其要注意加样操作的因素，因为在这样的情况下容易产生气泡，这样就会影响兽医实验室抗体检测结果的准确性，并且对于所加样品的数量要严加控制，因为很多样品都是被冷藏或者冷冻，那么在进行加样之前要将其进行“解冻”，不能让其与所要加入的样品之间的温度差过大，这些加样方面的因素，如所加样品的温度、数量、气泡等等都会影响兽医实验室抗体检测结果，要想保证兽医实验室抗体检测结果的准确性，应减少人为因素的影响。

4.2 洗板次数因素

ELISA 检测相关抗体时，加完二抗进行孵育后需进行洗板，通常对于兽医实验室抗体检测来说有手工和机洗两种，那么在洗板时要注意次数方面的影响。如果洗板次数太少，可能还会残留着一些药液；如果洗板次数太多也会让接下来使用的反应时间延长，这就会间接的导致兽医实验室抗体检测结果不准确。

4.3 结果判定因素

在完成显色之后，就需要进行结果的判定，在进行兽医实验室抗体检测结果的判定时，需要在完成显色反应的20 min 以内完成，在这个过程中，一旦超过查看结果的时间，那么整个兽医实验室抗体检测的实验就会被废弃。要想获得准确的结果，就需要重新进行实验，将之前的各个步骤重复进行操作，在这个过程中不仅浪费了大量的时间，同时也浪费了一定的人力和物力，往往一些兽医实验室抗体检测实验在最终的结果判定过程出现偏差，导致整个兽医实验室抗体检测的失败，这是目前在进行兽医实验室抗体检测过程中浪费性最大的影响因素。

5 环境因素

同在样本因素中的实验室温度因素一样，整个兽医实验室抗体检测过程的环境也是影响兽医实验室抗体检测结果准确性的重要因素，在这样的情况下需要将整个兽医实验室抗体检测操作过程的温度控制在19 ～24 ℃之间，这样才有利于各个实验过程对于不同温度要求的控制，减少环境因素对兽医实验室抗体检测的影响，能够在很大程度上确保兽医实验室抗体检测结果的准确性。

综上所述，在兽医实验室抗体检测的过程中，要想保持兽医实验室抗体检测结果的准确性，要从人为因素、免疫因素以及样品因素入手，避免这三种因素的出现造成整个兽医实验室抗体检测出现错误或者误差，由于造成兽医实验室抗体检测出现误差的因素较多，那么在实际进行兽医实验室抗体实验的过程中，需要尽可能的避免能够控制的因素，以提高兽医实验室抗体检测的准确性。