肝纤维化四项对肝纤维化的诊断价值

曾丽梅，谢银光

（1.广宁县中医院检验科；2.广宁县中医院中医内科，广东 肇庆 526300）

肝细胞发生炎症或坏死后，肝脏可持续产生修复创伤反应，胶原纤维组织过度沉积后可破坏肝脏组织。肝纤维化指的是在各种致病因子作用下，肝内结缔组织异常增生，造成肝内弥漫性细胞外基质过度沉积的病理过程，为肝硬化前期病变。近年来，随着医学技术的进步，非创伤性检查在肝脏疾病的病情评估、诊断中发挥了重要作用。Ⅳ型胶原（C Ⅳ）、层黏连蛋白（LN）属于基底膜成分，与肝脏纤维化程度密切相关，且LN为非胶原性结构蛋白，可导致门静脉压升高；Ⅲ型前胶原（PC Ⅲ）为氨基酸多肽，肝纤维化早期合成较为活跃，晚期可减慢；血清透明质酸（HA）在肝病活动期、严重期时均呈现为较高水平，故其与肝纤维化程度也可能存在密切关系[1-3]。基于此，本研究旨在探讨肝纤维化四项检测对肝纤维化的临床诊断价值，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料选取2020年4月至2021年4月广宁县中医院收治的160例肝病患者，其中肝炎患者128例，列为肝炎组，肝硬化患者32例，列为肝硬化组；另选取同期进行健康体检的健康者32例，将其作为对照组，开展前瞻性研究。对照组研究对象中男性19例，女性13例；年龄52～76岁，平均（64.03±3.54）岁。肝炎组中男性65例，女性63例；年龄49～79岁，平均（64.02±3.54）岁。肝硬化组中男性18例，女性14例；年龄53～75岁，平均（64.03±3.39）岁。对比3组研究对象一般资料，差异无统计学意义（P＞0.05），可实施组间对比。诊断标准：肝病患者均参照《肝纤维化诊断及治疗共识（2019年）》[4]中的相关诊断标准。纳入标准：肝病患者符合上述诊断标准，且经实验室检查、影像学、病理学等检查确诊者。排除标准：近1个月内服用过影响甲状腺激素表达的药物者；患有严重心、脑血管疾病者；患有下丘脑、垂体肿瘤者等。研究经广宁县中医院医学伦理委员会批准，研究对象均签署知情同意书。

1.2 检测方法告知所有研究对象在采血前禁食12 h以上，采集患者次日清晨空腹静脉血5 mL，在4 h内完成检验。对采集的静脉血进行离心处理，离心半径为10 cm，将转速设置为3 500 r/min，时间为10 min，取上层血清，采用化学发光仪（深圳市新产业生物医学工程股份有限公司，型号：MAGLUMIX8）及相关试剂测定肝纤维化四项，包括C Ⅳ、PC Ⅲ、LN、HA。

1.3 观察指标①对比3组研究对象肝纤维化指标，包括C Ⅳ、PC Ⅲ、LN、HA。②对比不同肝纤维化程度患者肝纤维化四项指标水平，按照Ishak评分系统[5]对肝纤维化程度进行分级，包括轻度（60例，Ishak评分系统1、2期：部分汇管区纤维化，不存在纤维间隔或只有1条纤维间隔）、中度（46例，Ishak评分系统3、4期：大部分汇管区纤维化或伴明显汇管 - 汇管桥接纤维化，有1条以上纤维间隔）、重度（54例，Ishak评分系统5、6期：汇管 - 汇管桥接纤维化明显，或汇管 - 中央桥接纤维化，形成假小叶）。③分析肝纤维化四项指标检测肝纤维化的诊断效能。

1.4 统计学方法应用SPSS 23.0统计学软件处理数据，计数资料以[ 例(%)]表示，采用χ2检验；计量资料均符合正态分布且方差齐则以(±s)表示，两组间比较行t检验，多组间计量资料比较采用重复测量方差分析；通过受试者工作特征曲线（ROC）分析HA、LN、PC Ⅲ、C Ⅳ诊断肝纤维化的诊断效能。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 3组研究对象肝纤维化四项指标比较与对照组比，肝炎组和肝硬化组患者的血清HA、LN、PC Ⅲ、C Ⅳ水平均升高，且肝硬化组高于肝炎组，差异均有统计学意义（均P＜0.05），见表1。

表1 3组研究对象肝纤维化四项指标比较(±s , ng/mL)

表1 3组研究对象肝纤维化四项指标比较(±s , ng/mL)

注：与对照组比，*P＜0.05；与肝炎组比，#P＜0.05。HA：透明质酸；LN：层黏连蛋白；PC Ⅲ：Ⅲ型前胶原；C Ⅳ：Ⅳ型胶原。

组别 例数 HA LN PC Ⅲ C Ⅳ对照组 32 52.01±8.18 71.09±7.69 24.67±1.56 41.28±3.28肝炎组 128 312.37±25.89* 189.27±10.17* 213.38±51.92* 213.27±22.34*肝硬化组 32 534.28±55.34*# 281.37±45.38*# 320.67±86.96*# 351.18±43.28*#F值 1 938.943 857.050 241.237 1 201.966 P值 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05

2.2 不同肝纤维化程度患者肝纤维化指标比较重度患者HA、LN、PC Ⅲ、C Ⅳ水平均高于轻、中度患者，且中度患者高于轻度患者，差异均有统计学意义（均P＜0.05），见表2。

表2 不同肝纤维化程度患者肝纤维化指标比较(±s , ng/mL)

注：与轻度组比，△P＜0.05；与中度组比，▲P＜0.05。

程度 例数 HA LN PC Ⅲ C Ⅳ轻度患者 60 152.17±20.15 124.27±12.36 122.35±12.25 64.47±5.47中度患者 46 289.27±27.61△ 185.28±25.48△ 198.37±33.63△ 204.26±28.56△重度患者 54 564.27±39.76△▲ 312.36±36.72△▲ 376.62±73.02△▲ 398.29±40.62△▲F值 2 728.562 738.061 436.182 1 981.293 P值 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05

2.3 肝纤维化四项指标检测肝纤维化的诊断效能ROC曲线分析结果显示，HA、LN、PC Ⅲ、C Ⅳ诊断肝纤维化的曲线下面积（AUC）分别为0.822、0.685、0.765、0.776，HA诊断肝纤维化的AUC值最大，其次为C Ⅳ，且HA诊断肝纤维化的约登指数高于C Ⅳ、PC Ⅲ、LN，差异均有统计学意义（均P＜0.05），见图1、表3。

表3 肝纤维化四项指标检测肝纤维化的诊断效能

3 讨论

肝病包括肝炎、肝硬化、肝癌等，其发生与自身免疫性疾病、脂肪肝、病毒感染、过度饮酒等有关。肝病早期患者起病隐匿，当有明显的临床表现而确诊时，常发展至肝硬化甚至肝癌。肝炎患者由于肝细胞受到炎症刺激，肝脏对慢性损伤的病理性修复反应，导致纤维结缔组织异常增生，会出现肝纤维化，早期肝纤维化是可逆的，如肝纤维化未能及时阻断，进一步发展可引起肝小叶结构紊乱，肝细胞结节性再生，发展为肝硬化，此时病理改变不可逆，严重威胁患者的生命安全[6-7]。目前，肝活检组织病理学检查仍是肝纤维化诊断的金标准，但其属于创伤性检查，具有疼痛、出血、感染等并发症，且费用较高，限制了其临床应用[8-9]。因此在肝病早期选择有效的诊断方法具有重要的意义。

肝纤维化是肝炎、肝硬化、肝癌等肝病的病理基础，肝纤维化四项为临床常用指标，C Ⅳ、PC Ⅲ、LN、HA均是肝细胞外基质代谢时沉积并导致肝纤维化的主要指标。肝脏纤维化过程中，肝星状细胞发挥着重要作用，肝星状细胞大量增生、分解、转化，可合成较多的蛋白多糖、胶原、糖蛋白的细胞外基质（ECM）[10-11]。ECM的主要成分为C Ⅳ、PC Ⅲ、LN、HA，其中HA是一种大分子多糖，主要由肝内间质细胞合成并经肝窦内皮细胞降解，肝纤维化时，其肝窦内皮细胞摄取和分解的HA减少，因此其血清含量增加，可反映肝脏纤维化活动程度与损伤程度；C Ⅳ与LN均为基底膜主要成分，当发生肝纤维化时，胶原合成异常增多，致使胶原沉积，基底膜增生，降解的胶原进入血液循环中，导致C Ⅳ水平升高；LN为基底膜中特有的非胶原性结构蛋白，通常以共价键与基底膜其他成分结合，其可与C Ⅳ结合，大量沉积于肝窦内皮细胞的间隙，促使肝窦毛细血管化，此为纤维化肝脏微血管新生的重要形式，而血管新生又会加重肝纤维化；PC Ⅲ是一种氨基端多肽，是Ⅲ型胶原的前体，肝纤维化胶原形成早期即以Ⅲ型胶原为主，因此其可反映肝纤维化早期Ⅲ型胶原的代谢情况[12-14]。本研究中，与对照组比，肝炎组和肝硬化组血清HA、LN、PC Ⅲ、C Ⅳ水平均升高，且肝硬化组高于肝炎组，表明肝纤维化四项指标与肝脏疾病的发生及发展存在密切联系。

肝组织损伤程度以炎症分级和纤维化分期来表示，分期是依据纤维化程度和炎症的程度，表示病变的活动程度，与病程有关。Ishak评分系统是对界面肝炎、汇管区炎症及肝细胞损伤等不同损伤程度的评估系统，将肝纤维化评估为0～6期，是目前评估肝纤维化最敏感和最常用的方法，可区分1、2期的短纤维间隔，3、4期的完全纤维间隔形成及5、6期假小叶形成，该分期还可以明确分辨汇管区 - 中央静脉桥接纤维和汇管区 - 汇管区桥接纤维，从而评估肝病患者的肝纤维化进程[15-16]。本研究中，重度患者HA、LN、PC Ⅲ、C Ⅳ水平均高于轻、中度患者，且中度患者高于轻度患者，表明通过检测肝纤维化四项，可综合评估病情，进而反映肝脏肝纤维化程度。

PC Ⅲ与肝纤维化形成密切相关，但是其主要反映早期肝纤维化进程，晚期其代谢减慢，因此仅作为活跃期肝纤维化的指标；肝纤维指标中，除LN外，均与炎症关系非常密切，因此LN诊断的灵敏度较低；C Ⅳ的含量与肝纤维化程度呈正相关，在增生的胶原中，C Ⅳ是最先增生的，且转换率快，但发生急性肝炎时，虽然有大量肝细胞被破坏，因无明显结缔组织增生，因此其浓度与健康人无显著差异，采用该指标检测准确度较低；肝脏是合成和降解HA的主要场所，当肝脏组织发生病变时，内皮细胞受损，HA降解不足，以致其水平升高，且随着肝纤维化程度进展，其升高的绝对值和阳性率也增加，诊断价值优于其他肝纤维化指标[17-18]。本研究进一步进行ROC曲线分析，结果显示，HA诊断肝纤维化的AUC值最大，其次为C Ⅳ，且HA诊断肝纤维化的约登指数高于C Ⅳ、PC Ⅲ、LN，表明肝纤维化四项均可以对肝纤维化进行诊断，其中HA的诊断价值最高，与陈康荣等[19]的研究结果相符。

综上，肝纤维化四项指标与肝脏疾病的发生及发展存在密切联系，且均可以对肝纤维化进行诊断，其中HA的诊断价值最高，通过对肝纤维化四项进行检测，可反映肝脏肝纤维化程度，有利于全面评估疾病，对临床诊治、改善患者预后具有重要作用，值得临床推广应用。