探讨血清CD4水平联合阴道微生态环境指标与老年女性人类乳头瘤病毒感染的关系

叶扬英，张忠源，杨淑珍

1.南平市第一医院体检科，福建南平 353000；2.南平市第一医院检验科，福建南平 353000

人类乳头瘤病毒（human papilloma virus，HPV）感染每年导致60 多万例癌症［1］。大多数女性会在一生中通过性交感染HPV，大多数HPV 感染会在几个月内自行消退，少数HPV 感染会持续存在并造成不可逆转的病变［1］。虽然大多数HPV 感染会被人体免疫系统清除，但持续感染会导致病毒基因整合到宿主基因组中，并导致HPV 相关性癌症［2-3］。局部菌群失调、上皮表面完整性破坏、免疫调节异常是HPV 向癌症发展的协同因素。大量的研究［4-5］表明，阴道微环境在HPV 感染方面起着重要的作用。此外，机体免疫功能的变化，特别是淋巴T 细胞功能异常，同样与HPV 感染相关。老年女性特有的生理改变与HPV 感染风险相关。随着年龄增大，老年女性因绝经导致阴道乳酸杆菌减少，阴道微生态环境失调风险增大，机体免疫功能不断下降，HPV 感染风险或者由HPV 潜伏期转入HPV 相关肿瘤期的风险增大［6］。为了进一步阐明阴道微生态环境以及T 淋巴细胞与HPV 感染的关系，本研究旨在通过Logistic 回归分析筛选HPV 感染的独立危险因素，对HPV 感染进行评估和干预，具有重要的临床意义。

1 资料与方法

1．1 一般资料选取2021年6月1日—2022年6月1日在南平市第一医院门诊进行高危型HPV 检查的老年女性患者。纳入标准： （1）患者年龄≥60 岁；（2）已经绝经；（3）检查前1 周内未服用抗细菌或真菌药物以及抗病毒药物；（4） 1 周内未接受阴道浸入性操作；（5）患者1 周内无性生活。符合上述所有标准的病例纳入本项研究。排除标准： （1）存在阴道出血症状；（2）患有生殖系统肿瘤；（3）患有严重脏器病变；（4）患有精神性疾病，无自主行为能力；（5）参与了其他临床研究。具有上述任意1 项标准的病例不纳入本研究。

1．2 观察指标与方法

1.2.1 阴道微生态环境检测 收集患者阴道以及宫颈分泌物。阴道环境检查包括念珠菌、滴虫、细菌、阴道清洁度、pH 值、唾液酸苷酶、过氧化氢和白细胞酯酶。阴道清洁度分为Ⅰ～Ⅳ度，Ⅰ度和Ⅱ度表示阴道清洁度正常，Ⅲ度和Ⅳ度表示阴道清洁度异常。

1.2.2 高危型HPV 检查 收集患者宫颈脱落细胞，提取上述标本的DNA，通过杂交捕获检查进行高危型HPV 检测。阳性表示高危型HPV 感染，阴性表示无高危型HPV 感染。HPV 高危型有HPV16 亚型、HPV18 亚型、HPV31 亚型和HPV33 亚型等。

1.2.3 血细胞分化抗原簇检查 收集患者静脉血10 mL，通过细胞流式技术检测患者血细胞分化抗原簇水平，包括CD3，CD4 以及CD8。

1．3 统计学分析本研究所有数据通过SPSS 24.0进行统计学分析。计数资料以例（%）表示，比较采用χ2检验；计量资料以均数±标准差（±s）表示，比较采用t检验；采用单因素和多因素Logistic 回归分析筛选高危型HPV 感染的危险因素；采用受试者工作特征（receiver operating characteristic，ROC）曲线评估临床变量对高危型HPV 的诊断效能。P＜0.05 表示差异有统计学意义。

2 结果

2．1 一般情况本研究共纳入143 例老年女性患者，其中高危型HPV 阳性组患者29 例（20.28%），高危型HPV 阴性组患者114 例（79.72%）。高危型HPV 阳性组患者平均年龄（65.2 ±13.2）岁；初潮平均年龄（13.3 ±1.5）岁；绝经平均年龄（49.0 ±6.2）岁；初次妊娠平均年龄（26.3 ± 8.1）岁；平均孕次（2.63 ±0.83）次。高危型HPV 阴性组患者平均年龄（64.4 ±11.1）岁；初潮平均年龄（13.8 ±1.0）岁；绝经平均年龄（48.8 ±7.3）岁；初次妊娠平均年龄（25.9 ±6.2）岁；平均孕次（2.5 ±0.8）次。2 组患者基线资料差异无统计学意义（P＞0.05）。

2．2 高危型HPV 阳性组和阴性组阴道感染情况及清洁度比较高危型HPV 阳性组细菌感染（P＝0.003）和阴道清洁度异常（P＝0.001）患者比例均高于高危型HPV 阴性组；高危型HPV 阳性组和高危型HPV 阴性组患者在念珠菌感染（P＝0.952）和滴虫感染（P＝0.314）患者比例上的差异均无统计学意义。见表1。

表1 高危型HPV 阳性组和高危型HPV 阴性组阴道感染情况及清洁度比较［例（%）］

2．3 高危型HPV 阳性组和高危型HPV 阴性组阴道微生态环境指标值比较高危型HPV 阳性组阴道唾液酸苷酶阳性患者比例高于高危型HPV 阴性组（P＝0.001）。高危型HPV 阳性组和高危型HPV 阴性组在pH 值（P＝0.862）、过氧化氢异常（P＝0.564）以及白细胞酯酶异常（P＝0.950）上的差异均无统计学意义。见表2。

表2 高危型HPV 阳性组和高危型HPV 阴性组阴道微生态环境指标值比较［例（%）］

2．4 高危型HPV 阳性组和高危型HPV 阴性组血细胞簇分化抗原比较高危型HPV 阳性组血清CD4 水平（P＝0.001）以及CD8 水平（P＝0.008）均低于高危型HPV 阴性组。高危型HPV 阳性组和高危型HPV阴性组在血清CD3 水平（P＝0.156）上差异无统计学意义。见表3。

表3 高危型HPV 阳性组和高危型HPV 阴性组血细胞簇分化抗原比较

2．5 单因素Logstic 回归分析筛选高危型HPV 感染危险因素阴道清洁度异常（OR＝2.18，P＝0.034）、阴道细菌感染（OR＝4.44，P＝0.005）、血清CD4 降低（OR＝3.16，P＝0.001）、血清CD8 降低（OR＝1.53，P＝0.004）是高危型HPV 感染的危险因素。见表4。

表4 单因素Logstic 回归分析筛选高危型HPV 感染危险因素

2．6 多因素Logstic 回归分析筛选高危型HPV 感染独立危险因素在阴道微生态和血清抗原分化簇中，细菌感染（OR＝2.36，P＝0.016）、血清CD4 降低（OR＝1.83，P＝0.002）是高危型HPV 感染的独立危险因素。见表5。

表5 多因素Logstic 回归分析筛选高危型HPV 感染危险因素

2．7 独立危险因素诊断效能评估ROC 曲线表明，阴道细菌感染曲线下面积为0.54 （P＝0.034）；血清CD4 水平曲线下面积为0.61 （P＝0.008）；血清CD4水平联合细菌感染曲线下面积为0.73 （P＝0.004）。见表6。

表6 独立危险因素诊断效能评估

3 讨论

在本研究中，高危型HPV 阳性率20.28%，较人群感染率高，这可能与样本选择偏倚有关。本研究的样本为主动进行高危型HPV 筛查的老年女性患者。本研究发现，老年女性中高危型HPV 阳性组细菌感染以及阴道清洁度异常患者比例高于高危型HPV 阴性组。细菌感染是高危型HPV 感染的独立危险因素。刘润丽等［9］研究发现，在高危型HPV 感染的患者中，患有细菌性阴道炎的患者比例高于高危型HPV 感染阴性组。该研究指出细菌感染是高危型HPV 感染的独立危险因素。老年女性阴道微环境具有区别于年轻女性的特点。在绝经之后，阴道微环境中乳酸菌减少，阴道粘膜变薄。微环境和生理结构的改变导致老年女性更容易发生阴道感染。Gillet 等［7］的研究显示，细菌性阴道炎患者更容易发生高危型HPV 感染，而Guo 等［8］研究了细菌性阴道炎对高危HPV 感染患者预后的影响，结果发现，在研究开始时，持续高危型HPV 组和清除组的细菌性阴道炎发生率相似；在研究结束时，持续高危型HPV 组细菌性阴道炎患者患病率为11.2%，而清除组细菌性阴道炎患病率明显更低为5.0%。与未感染细菌性阴道炎的女性相比，细菌性阴道炎可能延长了高危型HPV 感染的持续时间和消退时间。

还有研究［10－11］指出，阴道微环境紊乱与HPV 感染有关。与无细菌性阴道病的女性相比，患有细菌性阴道病患者的高危型HPV 感染率增加。阴道微环境紊乱与炎症因子增加、粘膜损伤和慢性炎症有关。有研究［14］指出，作为阴道微环境的重要组成部分，代谢组对菌群的致病性起着重要作用。细菌感染可能导致乳酸杆菌缺乏，从而导致阴道微生态环境pH 值改变。乳酸杆菌产生的过氧化氢可以催化过氧化物酶，进一步产生次氯酸盐。这一过程可以防止HPV 侵入宫颈上皮细胞，防止宫颈病变。白细胞酯酶是一种细胞内酶。当阴道发生炎症时，大量白细胞聚集起来吞噬病原体，导致白细胞膜破坏，从而检测出白细胞酯酶。但没有发现这些反映阴道微生态环境指标与HPV 感染之间相关性。这可能与本研究纳入的样本量过小有关，也可能与样本仅针对老年患者有关，今后需要扩大样本量进行验证。

本研究发现，高危型HPV 阳性组阴道唾液酸苷酶阳性患者比例高于高危型HPV 阴性组。唾液酸苷酶是1 种切割唾液酸末端残基的酶，与组织破坏、免疫反应逃避、细菌入侵和获得细菌相关营养物质有关［12］。唾液酸苷酶可降解粘膜保护因子，引起阴道上皮细胞溶解和排出［13］。

本研究还发现，高危型HPV 感染阳性组与阴性组患者外周血T 细胞亚群水平存在差异。与高危型HPV 阴性组相比，阳性组患者血清CD4 和CD8 水平显著降低，血清CD4 水平降低是高危型HPV 感染的独立危险因素。这与既往的研究相符。李军等［15］研究表明，外周血T 细胞标志物与HPV 感染相关。此外，本研究通过ROC 曲线证实，细菌感染联合血清CD4 水平对HPV 具有较好的诊断效能。

本研究针对老年女性患者，在阴道微生态环境指标和血清免疫学标志物种筛选了HPV 感染的独立危险因素。本研究中的联合独立危险因素为老年女性HPV 感染风险的评估和预防干预提供了参考依据。

本研究存在一些不足之处，包括样本量偏小，缺乏外部数据验证和机制研究等，在后续的研究中需要扩大样本量进一步验证，以及进行体外和体内实验阐明标志物变化的机制。

综上所述，本研究中老年女性的阴道微生态和血清抗原分化簇中，细菌感染、血清CD4 是高危型HPV感染的独立危险因素。细菌感染联合血清CD4 水平检测对老年女性HPV 感染具有一定的评估价值。