安徽省临泉地区羊几种病毒抗体检测

卢昌杨， 刘德义*， 张留君， 贺绍君， 冯 星， 辛洪雷

(1.安徽科技学院 动物科学学院，安徽 凤阳 233100；2.临泉县中原牧业发展中心，安徽 临泉 236400)

口蹄疫(FMD)、小反刍兽疫(PPR)、羊口疮(CPD)和羊痘(SGP)分别是由口蹄疫病毒(FMDV)、小反刍兽疫病毒(PPRV)、羊口疮病毒(ORFV)和羊痘病毒(SGPV)引起的高度接触性传染病[1-2],给世界养羊业造成重大经济损失,也是严重危害我国羊生产最常见的几种重要疫病。其中,FMDV、ORFV和SGPV因能感染人类还具有重要的公共卫生学意义[3-4]。FMD是一种偶蹄动物的高度传染性疾病,传染性极强、发病率较高,且幼龄动物感染后死亡率也较高,一旦暴发可给养殖业带来巨大灾难,因此在许多国家一直被认为是畜牧业面临的最大持续性挑战[3]。PPR是一种小反刍动物的病毒性传染病,主要影响山羊、绵羊和野生反刍动物,感染率及致死率均高达90%,已成为大规模养羊场首要防控的重大疫病之一[4]。CPD是一种高度传染性的人畜共患病毒性疾病,严重威胁山羊、绵羊及养殖人员健康。该病在各年龄段的羊群中均具有较高的发病率,但成年羊感染后病死率不高,而羔羊感染后可引起大批死亡[5]。CPD的病原(ORFV)是副痘病毒属的原型,对外界环境具有较强的适应能力并具有很强的再次感染宿主能力,从而有助于ORFV在众多物种间广泛传播和引发持续性感染,羊群中一旦存在该病原,将很难被清除[6]。SGP是一种在亚洲地区广泛分布的人和多种动物共患的传染病,不仅能够通过空气传播,而且还可通过蚊虫叮咬、直接或间接接触传播[7]。本病可导致羊产奶量严重下降和妊娠母羊早产、流产、死胎等,羔羊比成年羊更为易感且病死率较高,并且SGPV与PPRV在羊群中还可发生共感染[8]。

安徽临泉地处皖西北,年均肉羊存栏量超过130万只,是安徽省肉羊养殖重点区域之一。但是该地区羊群中上述几种常见重大传染病疫苗免疫情况及疫苗免疫后羊群血清中病毒抗体水平究竟如何并不清楚, 缺乏有效的、可用于指导生产实践的免疫抗体检测与监测数据。对疫苗接种后的羊群进行病毒血清抗体水平检测,了解羊群群体免疫状况对传染病免疫防控具有重要意义,对生产实践具有一定的指导作用。鉴于此,本研究通过对2021-2022年随机采集自临泉县部分养殖场羊群中的113份血液样品进行血清学调查,旨在了解羊群中几种常见重大传染病病原的血清抗体水平及接种疫苗后的抗体水平,以期为该地区羊疫病防控提供参考与指导。

1 材料与方法

1.1 供试材料

1.1.1 样品采集 113份羊血液样品于2021-2022年随机采集于临泉县瓦店镇、鲖城镇、长官镇和张新镇部分羊场,按照常规方法分离血清后于-80 ℃保存备用。各羊场免疫情况见表1。

表1 各羊场免疫情况Table 1 Immunization status of sheep and goat farms

1.1.2 主要试剂和仪器 口蹄疫病毒O型和A型ELISA抗体检测试剂盒和小反刍兽疫病毒ELISA抗体检测试剂盒(深圳市绿诗源生物技术有限公司);羊口疮病毒ELISA抗体检测试剂盒和羊痘病毒ELISA抗体检测试剂盒(江苏晶美生物科技有限公司);Multiskan FC全波长酶标仪(美国Thermo Fhisher公司)。

1.2 实验方法

参照各ELISA抗体检测试剂盒说明书进行实验操作及结果判定。

2 结果与分析

2.1 O型口蹄疫病毒抗体检测结果

在113份受检血清中,阳性共75份,总阳性率为66.4%,低于国家免疫防控要求。各乡镇的阳性率分别为瓦店75.0%,鲖城71.4%,长官60.7%,张新58.6%,其中瓦店和鲖城达到国家免疫防控要求(表2)。

表2 O型口蹄疫病毒抗体检测结果Table 2 Detection results of antibody for FMDV type O

2.2 A型口蹄疫病毒抗体检测结果

在113份受检血清中,阳性共68份,总体阳性率60.2%,低于国家免疫防控要求。各乡镇的阳性率分别为瓦店60.7%,鲖城57.1%,长官71.4%,张新51.7%,其中长官达到国家免疫防控要求(表3)。

表3 A型口蹄疫病毒抗体检测结果Table 3 Detection results of antibody for FMDV type A

2.3 小反刍兽疫病毒抗体检测结果

在113份受检血清中,阳性共79份,总体阳性率69.9%,低于国家免疫防控要求。各乡镇的阳性率分别为瓦店78.6%,鲖城64.3%,长官82.1%,张新55.2%,其中瓦店和长官达到国家免疫防控要求(表4)。

表4 小反刍兽疫病毒抗体检测结果Table 4 Detection results of antibody for PPRV

2.4 羊口疮病毒抗体检测结果

在113份受检血清中,阳性共78份,总体阳性率69%,存在广泛感染。各乡镇的阳性率分别为瓦店71.4%,鲖城64.3%,长官64.3%,张新75.9%,均普遍遭受感染(表5)。

表5 羊口疮病毒抗体检测结果Table 5 Detection results of antibody for ORFV

2.5 羊痘病毒抗体检测结果

在113份受检血清中,阳性共42份,总体阳性率37.2%,明显低于国家免疫防控要求。各乡镇的阳性率分别为：瓦店35.7%,鲖城42.9%,长官28.6%,张新41.4%,均未达到国家免疫防控要求(表6)。

表6 羊痘病毒抗体检测结果Table 6 Detection results of antibody for SGPV

3 结论与讨论

传染病目前仍是严重阻碍养羊业健康可持续发展的重要因素之一,尤其是常见重大病毒性传染病,如FMD、PPR、CPD、SGP等,一旦暴发可给养羊业带来毁灭性打击和巨大经济损失[9]。另外,FMD、CPD、SGP还是人和多种动物共患的传染病,传染性极强且传播迅速,在严重威胁动物健康的同时还可在人与不同动物物种间循环传播,从而引发重大公共卫生学问题[10]。截至目前,尚无针对FMD、PPR、CPD和SGP的特效抗病毒药物及有效治疗方法,因此这几种传染病重在平时预防[11]。当前,在养羊生产实践中,FMD、PPR和SGP的防控措施主要是基于以产生抗体为主的常规商品化疫苗免疫预防。但由于受饲养管理水平、疾病本身特征、疫苗自身问题、免疫程序、接种方式、接种途径等诸多因素的影响,致使疫苗免疫接种无法总能达到令人满意的防控效果[12-13]。况且,国内尚无可供利用的商品化CPD疫苗用于CPD的免疫防控。同时,ORFV还具有免疫逃逸机制,诱发宿主体液免疫应答后血液中抗体水平维持的时间很短,这势必在一定程度上加大CPD的防控难度[14-15]。

安徽省位于华东地区,是我国的畜牧业大省,养殖业体量庞大。而临泉县又是安徽省的养殖大县,主要的肉羊集中饲养区域之一,其羊肉及其相关产品主要满足“长三角”地区的市场需求,养羊业现已成为该县区重要的经济支柱产业[16-17]。对疫苗接种前后的羊群进行血清抗体水平检测,了解群体免疫状况对传染病免疫防控具有促进作用,进而有利于养羊业健康发展。然而,目前临泉地区羊群中缺乏对常见重大病毒性传染病病原的有效免疫抗体检测与监测。鉴于此,本研究对临泉县部分乡镇主要羊场羊群采集的113份血清样品进行几种常见病毒抗体水平的检测与分析。结果显示,已免疫羊群血清中O型口蹄疫病毒(Type O FMDV)、A型口蹄疫病毒(Type A FMDV)、小反刍兽疫病毒(PPRV)和羊痘病毒(SGPV)的抗体总体阳性率均低于70%,不符合国家规定的免疫防控要求,提示应加强免疫接种,提高羊群的总体特异性免疫力。但是,瓦店和鲖城Type O FMDV血清抗体、长官Type A FMDV血清抗体、瓦店和长官PPRV血清抗体阳性率均高于70%,免疫效果较好。研究发现SGPV血清抗体总体阳性率(37.2%)及在各乡镇羊群中的阳性率均很低(瓦店35.7%、鲖城42.9%、长官28.6%、张新41.4%)。可能是因为SGP疫苗主要通过羊尾根内侧皮内注射,而皮内注射相对于肌肉或皮下等接种方式而言,需要接种人员具有更高的操作技术,如若疫苗接种人员技术生疏或操作不当,则容易造成免疫失败[18]。这也提示应加强免疫接种人员专业技术培训或开发新型SGP疫苗。研究还发现ORFV血清抗体总体阳性率(69%)及在各乡镇羊群中的阳性率均很高(瓦店71.4%、鲖城64.3%、长官64.3%、张新75.9%),表明该地区羊群普遍遭受ORFV感染,这与之前的报道相一致[19-20]。提示开发特效抗ORFV药物或研制有效CPD疫苗对于国内CPD防控刻不容缓。

综上,研究表明安徽省临泉地区养殖场羊群中Type O FMD、Type A FMD、PPR和SGP总体免疫效果较差,各乡镇不同疫病免疫效果存在差异较大,且羊群中还广泛存在ORFV感染现象。这些数据为该地区羊常见重大疫病的进一步防控提供了参考和指导。