肺炎支原体肺炎患儿血清及肺泡灌洗液MIF 水平与气道黏液栓的关系探讨

阳池娇，陈进喜，林业辉，张洁妍，郑 芬，马玉花

（佛山市妇幼保健院儿科，广东 佛山 528000）

肺炎支原体肺炎（mycoplasma pneumonia pneumonia，MPP）是社区获得性肺炎（community-acquired pneumonia，CAP）中常见的一种非典型肺炎，占儿童CAP 病例的10%～40%[1，2]。临床上，一些比较难治的MPP 患儿纤维支气管镜下气道黏液呈现出一种高分泌状态，甚至有一些会形成大量的气道黏液栓或支气管塑型，导致气道狭窄或者阻塞，并最终导致严重后果。同时，由于缺乏特异性的临床和影像学表现，MPP 形成气道黏液栓早期很容易造成临床误诊和漏诊。因此，如何早期诊断并及时治疗对改善患儿预后具有重要的临床意义。巨噬细胞移动抑制因子（macrophage migration inhibitory factor，MIF）是一种前炎性因子，参与多种炎症和免疫反应，并参与了多种呼吸系统疾病的发生和发展[3-5]。因此，本研究通过探讨MIF 与MPP 气道黏液栓的关系，以期为临床诊断及病情评估提供依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料 收集2019 年6 月-2021 年4 月佛山市妇幼保健院儿科收治的45 例2～6 岁MPP 患儿的肺泡灌洗液（BALF）及血液标本，其中根据纤维支气管镜下是否观察到黏液栓堵塞气道[6]将MPP 患儿分为黏液栓组（一个及一个以上肺段支气管腔内可见黏稠分泌物呈条块状堵塞管腔，甚至呈塑型，不易吸出，需要借助异物钳或细胞刷）20 例及非黏液栓组（表现为黏膜充血水肿、黏膜糜烂、滤泡增生、少许稀薄分泌物未形成痰栓等）25 例。另收集同期因急性气道异物行气管镜检查的20 例患儿的肺泡灌洗液（BALF）及血液标本并将其设为对照组。纳入标准:①MPP 诊断标准均符合第8 版《诸福棠实用儿科学》肺炎的诊断标准[7]；②对照组患儿为气管镜检查明确诊断为气道异物的患儿。排除标准：①病程迁延，入院时病程＞2 周；②合并有早产、先天性心脏病或免疫功能缺陷者。MPP 黏液栓组男13 例，女7例；年龄1 岁3 个月～6 岁5 个月，平均年龄（3.42±0.76）岁。MPP 非黏液栓组男15 例，女10 例；年龄8个月～6 岁8 个月，平均年龄（3.18±0.65）岁。对照组男10 例，女10 例；年龄1～4 岁，平均年龄（2.57±0.77）岁。三组性别、年龄比较，差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。所有患儿均经家属知情同意，于病程2 周内行支气管镜检查及治疗，且经过医院医学伦理委员会批准。

1.2 方法

1.2.1 血清标本采集 行纤维支气管镜检查及肺泡灌洗术当天清晨空腹抽外周静脉血3 ml，在室温放置2 h，1000 r/min 离心10 min，取血清置于-20 ℃冰箱保存用于MIF 的测定。

1.2.2 BALF 标本采集 使用纤维支气管镜前端插入病变管腔内，37 ℃9 g/L 生理盐水灌洗病变肺段（10 ml/次，总量2～5 ml/kg）3 次。随即进行抽吸以获取灌洗液标本入灭菌痰液收集器。灌洗液全部分装成1.5 ml 于离心管中，3000 r/min 离心10 min，留取上清液，并将处理后标本保存于-20 ℃冰箱用于MIF 测定。

1.2.3 血清及BALF MIF 检测 采用双抗体夹心ELISA 法检测血清、肺泡灌洗液MIF 水平，试剂盒由上海通蔚生物技术有限公司提供，由专人严格按试剂盒说明书进行操作。

1.3 统计学方法 应用SPSS 22.0 统计学软件进行数据处理，计量资料采用（）表示，组间比较采用独立样本t检验或单因素方差分析，组间两两比较采用LSD 法；计数资料以（n）表示，组间比较采用χ2检验；采用Pearson 相关性分析MPP 患儿血清MIF水平与BALF MIF 水平的关系。P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 三组血清、BALF MIF 水平比较 MPP 黏液栓组血清及BALF MIF 水平均高于MPP 非黏液栓组及对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）；MPP 非黏液栓组血清及BALF MIF 水平均高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05），见表1。

表1 三组血清、BALF MIF 水平比较（，ng/L）

表1 三组血清、BALF MIF 水平比较（，ng/L）

2.2 MPP 患儿血清MIF 水平与BALF MIF 水平的关系 Pearson 相关性分析显示，MPP 黏液栓组血清MIF 水平与BALF MIF 水平呈正相关（r=0.675，P＜0.05）；MPP 非黏液栓组血清MIF 水平与BALF MIF水平亦呈正相关（r=0.814，P＜0.05），见图1、图2。

图1 MPP 黏液栓组血清MIF 水平与BALF MIF 水平的关系

图2 MPP 非黏液栓组血清MIF 水平与BALF MIF 水平的关系

3 讨论

气道黏液栓是由支气管黏膜的炎症、坏死、出血及支气管黏液分泌异常而致黏液排除障碍，导致黏液在支气管内积聚、结块而形成[8]，严重者可发生肺不张、闭塞性细支气管炎、支气管扩张等并发症，严重危害患儿的身体健康[9-11]。MPP 发病机制主要为病原直接损伤和其导致过强的免疫炎症反应[12，13]，首先，肺炎支原体进入呼吸道后主要通过P1 蛋白等结构与气道上皮细胞膜上的受体相结合，释放毒性代谢产物引起氧化应激反应，造成黏液分泌过多及上皮细胞损伤、坏死[14，15]；其次，肺炎支原体感染机体后，引起炎性细胞浸润和细胞因子释放，导致气道上皮细胞通透性增加及气道壁水肿狭窄，同时促进黏液蛋白的表达[14，16]，致使分泌物增多不易排出，最终容易导致黏液栓堵塞气道[17]。

MIF 是一种具有趋化功能的多效免疫调节细胞因子，参与炎症级联反应。它是一种含115 个氨基酸的蛋白质，最早在活化的T 淋巴细胞中发现，淋巴细胞、单核巨噬细胞是MIF 的重要来源[18，19]。MIF作为一种前炎性因子，主要作用是巨噬细胞活化功能，包括巨噬细胞的粘附、迁移、吞噬作用，还具有促炎症反应并促进细胞的定向迁移及其他促炎因子的释放等功能。有研究表明[3-5]，MIF 参与了多种呼吸系统疾病的发生和发展，特别是炎症的初始阶段。但关于MIF 与儿童MPP 气道黏液栓关系的研究报道甚少。本研究结果发现，MPP 黏液栓组血清及BALF中MIF 水平高于MPP 非黏液栓组及对照组，MPP非黏液栓组高于对照组（P＜0.05），与既往研究结果类似[20]，提示MIF 在MPP 所致的强烈炎症反应中发挥重要作用。同时，本研究Pearson 相关性分析显示，MPP 黏液栓组血清MIF 水平与BALF MIF 水平呈正相关（r=0.675，P＜0.05）；MPP 非黏液栓组血清MIF 水平与BALF MIF 水平亦呈正相关（r=0.814，P＜0.05），提示血清MIF 水平有可能作为MPP 黏液栓形成早期诊断的较敏感指标应用于临床。

综上所述，MIF 可能参与MPP 发病过程，特别是MPP 黏液栓的形成，早期检测血清MIF 水平对MPP 黏液栓形成的判断及治疗决策具有重要的参考价值。