彩色多普勒超声联合CYFRA21-1、sTNFR-P55及HE4检测在乳腺癌早期诊断中的应用

杨大才 陈鹤 彭良琴 朱廷玲★

乳腺癌为女性常见恶性肿瘤，有着较高的发病率，据相关数据显示，乳腺癌是影响女性生存及生活质量的重要因素［1］。近年来乳腺癌发病率逐渐上升，且发病年龄逐渐趋于年轻化，早发现早治疗是提高乳腺癌治疗效果及降低死亡率的有效方法［2］。彩色多普勒超声检查是临床中常用的检查方式，在乳腺癌早期筛查中具有一定的使用价值。以往研究表明，相比单独超声检查，联合血清肿瘤标志物可提高乳腺癌检出率［3］。随着分子生物学发展，细胞角质蛋白19 片段（Cytokeratin 19 fragment，CYFRA21-1）、可溶性肿瘤坏死因子受体P55（Soluble tumor necrosis factor receptor p55，sTNFR-P55）、人附睾分泌蛋白4（human epididymis protein 4，HE4）等血清肿瘤标志物也被证实与乳腺癌发生、发展存在密切的联系，研究指出，三者联合超声检查在乳腺癌早期筛查中有一定使用价值［4］。本研究将通过分析CYFRA21-1、sTNFR-P55 及HE4 在乳腺癌中的表达情况，了解三者联合彩色多普勒超声对乳腺癌的诊断效能，以期为临床早期筛查提供参考依据。现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2019年2月至2021年7月重庆市永川区中医院收治的116 例乳腺癌患者（乳腺癌组），所有患者均为女性，平均年龄为（46.69±6.68）岁，根据国际抗癌联盟（International Anti Cancer Alliance，UICC）中TNM 分期［5］分为：Ⅰ期25 例，Ⅱa 期54 例，Ⅱb 期37 例。纳入标准：①临床资料完整；②符合《乳腺癌诊疗规范（2011 版）》中相关诊断标准［6］；③经术后病理检查证实；④术前均进行彩色多普勒超声检查。排除标准：①入院前有行放化疗或手术治疗者；②存在代谢性疾病者；③合并其他脏器肿瘤者。另选取同期收治的乳腺良性疾病105 例作为良性组，包括乳腺囊肿39 例，乳腺增生31 例，纤维腺瘤35 例，所有患者均为女性，平均年龄为（46.88±6.21）岁，两组入选者一般资料比较差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。本研究经院医学伦理委员会批准通过，受试者或家属已签署知情同意书。

1.2 方法

1.2.1 CYFRA21-1、sTNFR-P55 及HE4 检测方法

入院后次日清晨抽取患者静脉血液5 mL，使用离心机离心（转速：3 000 r/min，时间：10 min，半径：10 cm）后获取上清液待检，CYFRA21-1 使用电化学发光法进行检测，仪器及试剂均为德国罗氏公司提供；sTNFR-P55、HE4 使用酶联免疫法进行检测，试剂为瑞典康乃格公司提供，仪器为IMX 酶标分析仪（美国雅培公司）。

1.2.2 彩色多普勒超声检查

乳腺癌组在术前进行超声检查，良性组则在入院当天进行超声检查。仪器为：Acuson Sequoia 512型彩色多普勒超声诊断仪，探头：频率为2.5～5 MHz的腹部4C-1 凸阵探头，对比脉冲序列。患者选择仰卧位，并将双手举上，以便于将腋窝和胸部充分暴露。在检查前需先设置乳腺检查的相关条件，并根据患者病灶的具体情况对检测深度、增益、聚焦部位进行调整，以此获得最佳的图像。乳腺超声检查范围包括双侧乳腺，内侧到达胸骨旁线，外侧则到达腋中线。由2 名专业的超声医生对肿块超声图像进行分析，采用“双盲法”进行评估，在评价前医生均未知患者病理检查结果。彩色多普勒诊断乳腺癌阳性标准［7］：肿块为无规则性团块状、分叶状，呈浸润性生长，边界模糊，边缘毛刺改变，无包膜，实质回声非均匀分布，内部见血流信号，淋巴结血流紊乱，内部点状强回声、后方弱回声，纵横比≥1。

1.2.3 结果判断

血清学指标阳性评估标准［8］：CYFRA21-1 阳性：＞3.3 μg/L，sTNFR-P55 阳性：＞85 ng/mL，HE4阳性：＞105 pg/L。联合检测中有一项为阳性，则判定为阳性。

1.3 观察指标

对比乳腺癌组与良性组患者CYFRA21-1、sTNFR-P55 及HE4 表达水平以及彩色多普勒超声征象差异，计算彩色多普勒超声联合CYFRA21-1、sTNFR-P55、HE4 对乳腺癌的诊断价值。

1.4 统计学方法

采用SPSS 20.0 统计软件进行统计分析，计量资料采用（±s）表示，行t检验；计数资料采用n（%）表示，行χ2检验；均以P＜0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 两组CYFRA21-1、sTNFR-P55 及HE4 表达水平比较

乳腺癌组CYFRA21-1、sTNFR-P55 及HE4 表达水平均明显高于良性组，差异均有统计学意义（P＜0.05）。见表1。

表1 两组CYFRA21-1、sTNFR-P55及HE4表达水平比较（±s）Table 1 Comparison of expression levels of CYFRA21-1，sTNFR-P55 and HE4 between the 2 groups（±s）

表1 两组CYFRA21-1、sTNFR-P55及HE4表达水平比较（±s）Table 1 Comparison of expression levels of CYFRA21-1，sTNFR-P55 and HE4 between the 2 groups（±s）

组别良性组乳腺癌组t 值P 值n 105 116 CYFRA21-1（μg/L）1.36±0.26 5.69±1.34 32.554＜0.001 sTNFR-P55（ng/mL）59.69±5.66 108.54±6.94 56.982＜0.001 HE4（pg/L）80.26±5.25 149.65±6.78 84.428＜0.001

2.2 两组彩色多普勒超声征象比较

乳腺癌组患者肿瘤形态不规则、边界不清晰、毛刺征、后方回声衰减、存在微小钙化、血流Ⅱ～Ⅲ级、纵横比为≥1 所占比例明显高于良性组，差异均有统计学意义（P＜0.05）。见表2。

表2 两组彩色多普勒超声征象比较［n（%）］Table 2 Comparison of color Doppler ultrasound signs between the 2 groups［n（%）］

2.3 彩色多普勒超声联合CYFRA21-1、sTNFRP55、HE4 对乳腺癌的诊断价值

依据ROC 曲线可知，彩色多普勒超声联合CYFRA21-1、sTNFR-P55、HE4 检测对乳腺癌诊断敏感度和特异度分别为0.817、0.857，AUC=0.858（95% CI：0.705～0.974），明显高于三者单独诊断（P＜0.05）。见表3、图1。

表3 彩色多普勒超声联合CYFRA21-1、sTNFR-P55、HE4对乳腺癌的诊断价值Table 3 diagnostic value of color Doppler ultrasonography combined with CYFRA21-1，sTNFR-P55 and HE4 in breast cancer

图1 诊断价值Figure 1 diagnostic value

2.4 典型病例

本研究中1 例患者经超声检查可见：左乳2 点位距乳头1.6 cm 扫及1.5 cm×0.7 cm 低回声团块，边界欠清，形态不规则，边缘不规则，内部见点状强回声。见图2A。团块内未见明显血流信号。见图2B。

图2 乳腺癌超声图Figure 2 ultrasonogram of breast cancer

3 讨论

早期诊断是改善乳腺癌预后的关键，既往数据指出，乳腺癌患者早期精确诊断可提升5年生存率［9］。早期正确诊断是治疗的前提，以往临床中乳腺癌早期筛查手段主要为乳腺钼靶，其可为乳腺癌早期诊断提供重要参考信息，但对致密型乳腺癌显示效果不佳，且对于微小病灶检出率低，同时由于存在一定电离辐射，使其临床使用价值受限。彩色多普勒超声检查则可弥补上述缺点，但由于检查结果主要依赖医生主观判断，也存在一定误诊、漏诊的情况。为更好地提高乳腺早期诊断效能，本研究采用多种肿瘤标志物与彩色多普勒超声进行联合诊断。

CYFRA21-1 是构成细胞骨架的一种丝状物质，在细胞出现癌变、坏死、溶解后CYFRA21-1 在血液中的表达呈明显升高趋势。研究显示，在恶性肿瘤患者中CYFRA21-1 阳性率与患者的临床分期、预后复发情况有关，临床分期越高、出现转移复发的患者其CYFRA21-1 水平明显增加［10］。但CYFRA21-1 并非器官特异性的肿瘤标志物，其除在乳腺癌患者中表达升高，在肺癌、肝癌等患者中其表达也可明显升高。HE4 是乳清酸性4-二硫化中心蛋白中的一员，具有类似胰蛋白酶抑制剂的特性［11］。以往研究显示，HE4 可在附睾、生殖道、呼吸道上皮中表达，在乳腺癌、卵巢癌等患者中阳性表达明显升高，对女性盆腔恶性肿瘤诊断有较高的诊断价值，同时可为患者预后评估提供参考［12］。本研究中，与良性组患者相比，乳腺癌患者中CYFRA21-1、HE4 表达均明显升高，与以往研究结果相符［13］，提示CYFRA21-1、HE4 与乳腺癌发生之间存在一定联系。sTNFR-P55 是由膜结合肿瘤坏死因子受体裂解形成的肿瘤坏死因子-α 的主要受体，通常在蛋白激酶的作用下裂解形成，临床中认为sTNFR-P55 是肿瘤坏死因子-α 的主要受体［14］。以往研究显示，在恶性肿瘤患者中sTNFR-P55 表达明显升高［15］。本研究也发现，与良性组相比，乳腺癌患者sTNFR-P55 表达水平明显上升，分析可能与肿瘤细胞导致机体细胞因子调节紊乱有关，乳腺癌患者机体的防御能力下降，细胞免疫功能受抑，刺激机体产生大量sTNFR-P55；也可能是因机体肿瘤过度生长，刺激单核—巨噬细胞合成和释放过量的sTNFR-P55，导致其在患者血液中为高表达［16］。

本研究发现，上述指标在单独检测时均存在一定局限性，虽然均可为乳腺诊断提供一定的参考信息，但诊断效能一般，敏感度及灵敏度均不理想。进一步分析显示，彩色多普勒超声联合CYFRA21-1、sTNFR-P55、HE4检测对乳腺癌诊断敏感度和特异度分别为81.70%、85.70%，提示相比单独诊断，超声联合血清因子检测诊断乳腺癌效果更佳，诊断效能更佳。

综上所述，彩色多普勒超声联合CYFRA21-1、sTNFR-P55、HE4 检可有效弥补单项检测的不足，对乳腺癌早期诊断有重要的临床使用价值，可为临床早期诊断提供更全面参考信息。