SLCO1B1和ApoE基因多态性对老年ASCVD患者血脂水平的影响
2022-09-30黄人杰邓凡治
黄人杰 邓凡治
(重庆市永川区人民医院,重庆 402160)
动脉粥样硬化性心血管疾病(atherosclerotic cardiovascular disease,ASCVD)是多种临床表型组合血管综合征,主要包括急性冠脉综合征、稳定或不稳定的心绞痛、脑卒中和其他动脉粥样硬化性血管疾病,是人类致残和致死的首要原因。有研究表明,老年人群发生ASCVD的风险是年轻人的近40倍[1],随着我国老龄化步伐的进一步加快,ASCVD给患者及社会带来的经济负担也会越来越大。LDL-C升高是ASCVD主要风险因素[2],临床中通常使用的降脂药他汀具有抗炎症、抗氧化、改善血管内皮功能、稳定动脉粥样硬化性斑块等功能,是降低LDL-C水平和ASCVD死亡率的最广泛的药物[3]。但是,不同的个体对于他汀的降脂效果存在差异,基因组学研究发现,有机阴离子转运蛋白1B1(SLCO1B1)基因和载脂蛋白E(ApoE)基因在血脂调控中发挥重要作用,是影响降脂效果个体化差异的主要原因之一[4]。以往已有部分关于ASCVD患者他汀降脂疗效与SLCO1B1和ApoE基因多态性的研究[5],但缺乏老年ASCVD患者的相关研究,因此,本研究通过探索老年ASCVD患者服用阿托伐他汀后的血脂水平与SLCO1B1 521T>C、ApoE 526 C>T和ApoE 388 T>C基因多态性的相关性,旨在为中国老年ASCVD患者的精准降脂提供理论基础。
1 资料和方法
1.1 一般资料
选取2020年10月至2021年12月于重庆市永川区人民医院心内科就诊的ASCVD患者266例,其中男性138例,女性128例。纳入标准:(1)年龄≥60岁;(2)临床诊断为冠状动脉粥样硬化性心脏病或冠状动脉粥样硬化症;(3)只服用阿托伐他汀一种降脂药物,且超过3个月。排除标准:(1)中重度的肝、肾功能不全;(2)慢性心力衰竭、、恶性肿瘤、血液系统疾病;(3)妊娠妇女。
1.2 方法
纳入的患者均口服阿托伐他汀钙片(厂家:浙江乐普药业股份有限公司,批号:国药准字H20133127,规格:20 mg)20 mg均超过3个月,患者入院时收集性别、身高、体重、年龄、吸烟史、饮酒史、用药情况等基础资料。
另外采集EDTA抗凝血2 mL,采用商业试剂盒(西安天隆科技有限公司)进行SLCO1B1 521T>C、ApoE 526 C>T和ApoE 388 T>C基因多态性检测,具体步骤如下:(1)吸取血样中央位置10 μL加入样本稀释液中,涡旋混匀后静置3 min,充分裂解血细胞;(2)分别取2 μL稀释血样、2 μL阳性对照和2 μL阴性对照按照AB顺序孔位分别加入8联管,盖紧管盖,6000 rpm离心10 s后40℃温浴5 min;(3)采用Fascan48多通道荧光定量分析仪(西安天隆科技有限公司)进行测序并读取荧光信号,判读SLCO1B1 521T>C、ApoE 526 C>T和ApoE 388 T>C基因型。
1.3 观察指标
患者入院第一天采集空腹外周静脉血,测定总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平。
记录基因型:SLCO1B1 521位点可分为TT、TC和CC 3种基因型,ApoE分型也可分为3种基因型,分别为E2型(ApoE 526 CT/TT,ApoE 388 TT)、E3型(ApoE 526 CT,ApoE 388 TC或ApoE 526 CC,ApoE 388 TT)、E4型(ApoE 526 CC,ApoE 388 TC/CC)。
1.4 统计学方法
应用SPSS 23.0统计软件进行数据处理。计量资料以M(P25,P75)表示,组间比较采用t检验,若数据不符合正态分布,采用Wilcoxon秩和检验;计数资料以n(%)表示,组间比较采用χ2检验。不满足χ2检验条件的采用Fisher确切概率法检验。以P<0.05表示差异有统计学意义。
2 结果
2.1 一般资料
本研究共纳入266例老年ASCVD患者,收集其性别、年龄、身高、体重、吸烟史、饮酒史情况,采用Wilcoxon秩和检验分析各指标在SLCO1B1 521 T>C、ApoE 526 C>T和ApoE 388 T>C不同基因型中的分布情况(表1、表2),结果发现SLCO1B1基因521位点TT、TC、CC基因型之间各指标,ApoE基因E2型、E3型、E4型之间各指标分布均无统计学意义(P>0.05)。
表1 不同SLCO1B1521 T>C基因型之间的一般资料比较
表2 不同Apoe基因型之间的一般资料比较
表2 各基因多态性位点Hardy-Weinberg平衡评估(n=266)
2.2 Hardy-Weinberg平衡分析
采集266例老年ASCVD患者的外周血进行SLCO1B1 521 T>C、ApoE 526 C>T和ApoE 388 T>C基因多态性检测,对各基因多态性进行Hardy-Weinberg平衡分析,各基因型均符合Hardy-Weinberg平衡(P>0.05),见表3,说明该群体具有群体代表性,数据可以进行后续分析。
表3 不同SLCO1B1 521 T>C基因型血脂比较[M(P25,P75)]
2.3 SLCO1B1 521T>C对阿托伐他汀降脂疗效的影响
纳入的老年ASCVD患者SLCO1B1基因521位点主要以TT型为主,稳定单药服用阿托伐他汀3个月后发现,TC+CC型血脂TC、TG、LDL-C水平均高于TT型,而HDL-C低于TT型,但两组比较,差异均无统计学意义(P>0.05),见表4。
表4 不同ApoE基因型血脂比较[M(P25,P75)]
2.4 ApoE基因对阿托伐他汀降脂疗效的影响
纳入的老年ASCVD患者ApoE基因主要以E3型为主,稳定单药服用阿托伐他汀3个月后,E4型患者TC水平均高于E2型和E3型,HDL-C水平最低,但差异无统计学意义(P>0.05)。与E2型相比,E4型患者LDL-C水平较高,且差异有统计学意义(P<0.05)。见表5。
3 讨 论
心血管疾病一直以来都是造成全球人口死亡的主要原因,根据《中国心血管病报告2020》,心血管疾病死亡已经位居我国城乡居民总死亡原因的首位[6]。中国人口老龄化程度严重,2020年全国第七次人口普查结果显示,我国60岁以上的人口比例已经占据18.7%,这也是导致心血管患病人数逐年上升的主要原因。ASCVD在危险分层中被列入极高危型[7],包括本研究纳入的冠状动脉粥样硬化性心脏病和冠状动脉粥样硬化症,具有高致残率及高致死率,降低血脂中的LDL-C或TC是治疗ASCVD的首要干预措施[8,9]。越来越多的证据表明,使用他汀治疗可以有效降低LDL-C水平,使斑块进展缓解、停止甚至逆转。但是他汀的疗效存在个体化差异,可能与SLCO1B1和ApoE基因多态性有关。因此,本研究通过纳入266名老年ASCVD患者,研究其服用阿托伐他汀3个月后的血脂情况与SLCO1B1和ApoE基因多态性的关系。
SLCO1B1基因位于12号染色体短臂(12p12),全长108 kb,该基因编码有机转运阴体OATP1B1[10],阿托伐他汀吸收入血后,需要通过OATP1B1转运进肝脏,作用于胆固醇合成限速酶,起到降低血脂的作用。研究发现,SLCO1B1 521 T>C基因多态性会使OATP1B1转运功能下降,影响他汀疗效和肌肉毒性[5]。Meyer等[11]在一项队列研究中发现,SLCO1B1基因521C变体与接受辛伐他汀、普伐他汀、洛伐他汀和氟伐他汀的血脂异常患者降脂疗效下降存在统计学显著相关性,与阿托伐他汀的疗效无关,ASCVD患者使用阿托伐他汀的疗效也不受SLCO1B1基因的影响[12,13]。本研究结论与以上结果一致,SLCO1B1基因521 T>C位点基因型对阿托伐他汀的降脂效果没有显著相关性,由于SLCO1B1基因大部分研究都集中在肌肉毒性方向,且国外CPIC指南已经将其列为1A级证据[14],提示后续我们的研究也应该关注SLCO1B1与肌肉毒性的关系。
ApoE基因位于染色体19号染色体长臂3区(19q3),在脂蛋白合成、转化和代谢中扮演着重要角色。ApoE基因有3个等位基因E2、E3、E4,分别由ApoE 526 C>T和ApoE 388 T>C基因位点组合而成。目前,对于ApoE在ASCVD中研究已经比较多,E4基因携带者降脂效果普遍偏差[15]。刘艳辉等研究发现缺血性脑卒中伴血脂异常患者服用阿托伐他汀3个月后,TG和LDL-C值降低幅度E2、E3优于E4(P<0.01)[5]。Kirac等报道E4突变型冠状动脉疾病患者对于阿托伐他汀治疗无效[16]。本研究发现ApoE基因与阿托伐他汀降脂疗效相关,与E2型相比,E4型患者LDL-C水平较高,且具有统计学意义(P<0.05),说明在老年ASCVD患者中,ApoE对阿托伐他汀降脂影响与以往研究一致,但本研究是回顾性研究,未考虑患者基线水平,可能会导致结论偏差,后续需继续探讨。
综上所述,本研究发现ApoE基因型与阿托伐他汀降脂疗效有关,而SLCO1B1基因型对血脂没有显著影响。因此,临床在对老年ASCVD进行降脂治疗时,可以考虑增加ApoE基因多态性检测,评估他汀降脂效果,为临床精准治疗提供更安全用药参考。但本研究属于回顾性研究,样本数量有限,后续需要多中心、前瞻性的研究来进一步验证结果。