噬菌体治疗在水产养殖动物细菌性疾病中的研究现状

○刘海荣

（鄄城县水产服务中心 山东鄄城 274600）

据实证资料分析可得，噬菌体在食源性病原微生物的应用效果显著。在水产养殖领域的多种菌群等引起的细菌性疾病中，以噬菌体为主要介质的治疗成效明显，也充分彰显了噬菌体在水产养殖的广阔前景。

一、防控水产养殖动物细菌性病害的优势

第一，针对性强。在以往运用抗生素治疗疾病时，也会杀死水产动物的消化系统中正常细菌和有益菌，进而影响自身机能的微生态平衡，从而引起其他有益的耐受菌群的生长，由此造成腹泻、胃肠道感染等症状，并会导致因机体抵抗力降低引起疾病感染。噬菌体因其自身的繁殖特性与作用效益，能够针对特定的菌株进行毁灭处理，再利用时又不至于给其中的其他有益菌种群造成定性损害，最大化保障其中微生态的稳定运行。

第二，应用基数少。噬菌体繁殖能力较强，具备指数式增殖的能力，仅需极小量就可以杀死一定的病原菌，起到了防止或减少细菌性感染的效果。

第三，筛选分离快，在应用治疗中的保存我物质消耗低。其物种丰度较大，在生物界中具有指定细菌相对应的噬菌体，较易分离，并可在常温下储存，方便于运用流通和使用。

第四，给药的方法多样，且效果持久。噬病毒体的给药途径有很多种，包括皮下注射、口服、外用以及身体外用药物等。在预防细菌性疾病过程中，噬病毒体既可以单一使用，也可以与成群基数以上的噬病毒体共同使用，也可以与抗菌素共同使用以增强防治效果，而且还因为噬病体的自身繁殖作用，也可以繁殖和传播，并通过对生物体的自身加以治愈而效果持久。

第五，无药品的残留。大量应用抗菌素容易导致药品在饲养动物身上的残留，而噬病毒体环境高度依赖于相应的微生物，会因为微生物宿主的消失而死去，嫌少残留至生物体内。如表1为部分应用试验结果。

表1 水产养殖动物噬菌体治疗应用试验

二、噬菌体治疗在水产养殖动物中的应用研究

1.节肢动物养殖中的噬菌体治疗

现阶段，由于诸多养殖过程中节肢动物的差异化的疾病频频出现，则会导致水产养殖业出现巨大的经济损失。以弧菌病为代表的细菌性疾病是近年来引起虾养殖业损失最为惨重的主要致病菌，其染病致死概率为百分之百。由副溶血性弧菌引起细菌性疾病也是东南亚区域中最为盛行且导致损失惨重的病症之一。

Jun等人研究噬菌体对治疗急性肝胰坏死病的效果，基于实验发现，以噬病毒体pVp-1为主要的治疗介质对患有染副溶血性弧菌引起病变的南美白对虾其治疗效益显著，并且能极大程度保护其存活。以喂养为治疗实行手段的实验组其死亡率高达百分之五十，而且采用浸浴法的实验组其累积死亡率约为1/4和1/2，由此可得，pVp-1在病菌预防方面比治疗方面的效果更为显著。

Vinod等也基于试行用噬菌体治疗在虾群体上产生的发光病。据实验结果表明，在十七天的试验时间内，对照组中的斑节对虾仅有17%的虾群存活，噬菌体介入治疗的存活率可高达86%，与应用抗生素进行治疗的观察组的存活率相比有显著的差异，其治疗效果显著，并且伴随着浓度的提升，其存活率也成正向表现。

2.软体动物养殖中的噬菌体治疗

基于近年来的水产养殖情况而言，弧菌致病菌给予养殖业带来不可逆性的影响，同时也造成不同程度的损坏，制约水产规模化养殖的多元化发展。

胡蝶等以质量分数1g/kg噬菌体添加到饲料中投喂方斑东风螺，基于试验的结果表明，从对照组的数据显示，其中宿主细菌数量有效降低96%，水体中宿主菌有效减少至72%。由此表明微胶囊的应用最大化控制宿主弧菌的平均基数，从而降低了水产养殖动物弧菌病的暴发。而柏仕杰等人认为当土壤和水域中都存在着相当含量的噬病毒体时，可将其平均基数不断减少至相对较低浓度，且能长时间内达到持续抑制的治疗效果，并有效减少其弧菌病的暴发。

李太武等人应用噬病毒体，对河流弧菌II型引起的皱纹盘鲍脓疱病开展了应用调查研究。结果显示，应用了相应含量的噬病体能够有效地防止或推迟由脓疱病造成的盘鲍凋亡过程，并使盘鲍的成活率提升50%以上。

3.棘皮动物养殖中的噬菌体治

疗腐皮综合症已是水产养殖中普遍常见的疾病，其中以刺参为疾病高发生物集群，并且其中造成的经济损失极高，在一定程度上制约该行业的优化发展。

Zhang等从某市场的排水管中噬菌体PVA1和PVA2，并制备成噬菌体鸡尾酒，溶液浓度分别为105、106、107PFU/mL。试验对象刺参基于浸泡处理，并由数据对比得出，空白对照组仅有3%的存活率，且其中三种浓度的存活率分别为47%、50%、73%。与卡那霉素组相比，其试验结果并无明显差距。

Li等在刺参养殖池水中筛选出对嗜环弧菌的噬菌体Vc1，并通过口服和静脉注射的差异化给药方法对其抑疫效应进行细致化探讨。试验结果显示，以60天为周期进行饲料投喂后，刺参生存概率为81%，同对照组比增长63%；但在进行注射给药处理后，刺参的存活率却只有58%。数据表明，基于刺参的治疗而言，口服能直观地彰显其治疗效益。

4.脊索动物养殖中的噬菌体治疗

Verner-Jeffreys等将噬菌体O，R和B制备成混合制剂，对大西洋鲑鱼进行腹腔注射，从数据表明可以有效缓解细菌对其的死亡侵害。攻毒后及时注射混合制剂的鱼群其死亡速率明显慢与对照组，但最终的死亡结果并无显著差异。

Silva等筛选出杀鲑气单胞菌的噬菌体AS-A。在实际试验中，采用浸浴的方法给药，在3天内对照组累积死亡率为36%，而对照组的累积死亡为零。据实验结果表示，在进行浸浴法给药后，其对病原菌的抵抗力明显提高。并也从发现，在宿主微生物存活的前提下添加噬病毒体，影响效果趋向平缓。所以，噬菌体在娃娃鱼繁殖环境中，能有效而安全地防治疖疮病。

综上所述，噬菌体治疗在水产养殖业中也初显成效，但由于现阶段对大规模用于细菌病毒感染的有效防治方法尚不完善，因此关于噬病体的各种研究也持续进行。而作为抗菌药，由于噬病体具备的多重特性，使之可以作为抗生素的有力替代品，而所有可作为有效治疗的噬病体都应该具备有效配方，以及更多的临床实验结果及其详细的噬病体制剂使用方式。和早期的噬病体疗法比较，现阶段对噬病体有了更广泛的认识，也为其多元化的疗法提供新的发展机遇。