不同程度新生儿呼吸窘迫综合征患儿血清细胞因子水平的临床分析

包志丹，万 俊

(东南大学医学院附属江阴医院新生儿科，江苏 江阴 214400)

新生儿呼吸窘迫综合征(neonatal respiratory distress syndrome，NRDS)是由于缺乏肺表面活性物质(pulmonary surfactant，PS)引起的严重疾病，多见于早产儿和剖宫产新生儿。尽管在产前、产时和新生儿期进行了较多的干预，在超未成熟早产儿及超低体重出生儿中，发生率仍高达89%，后期支气管肺发育不良(bronchopulmonary dysplasia，BPD)的发生率也达72.2%[1]。既往研究表明，宫内炎症反应能够促进肺发育成熟，降低NRDS的发生率[2-3]。临床中，仍有部分早产儿发生不同程度的NRDS，对于这些已经发生NRDS的患儿，细胞因子水平的表达如何，是否能够通过检测细胞因子水平辅助评估NRDS的严重程度尚不明晰。因此，本文对80例早产儿NRDS患儿进行了细胞因子方面的前瞻性研究，总结如下。

1 研究对象与方法

1.1 研究对象

选取2017年4月至2020年8月期间入住东南大学医学院附属江阴医院新生儿科新生儿重症监护病房(NICU)的NRDS早产儿80例为研究对象。

纳入标准：①胎龄为27～35周；②生后12h内入院；③患儿家属知情同意并签署同意书。排除标准：①入院前接受过PS治疗；②先天性呼吸道畸形，如先天性气道狭窄、食管气管瘘等；③出生时存在气胸、胎粪吸入综合征等其它呼吸道疾病；④复杂型先天性心脏病，如法洛四联征、完全型肺静脉异位引流、大血管转位等；⑤有遗传代谢性疾病、先天性染色体疾病等；⑥存在其他危及生命的先天畸形；⑦出生时重度窒息；⑧入院存在新生儿败血症；⑨未达到出院标准自动出院者。

1.2 分组情况

根据患儿的病史、临床表现及肺X线变化进行诊断，NRDS的诊断参考《实用新生儿学(第5版)》[4]中早产儿呼吸窘迫综合征诊断标准。无NRDS表现者入对照组(30例)；1级和2级早产儿NRDS入轻症组(30例)；3级和4级早产儿NRDS入重症组(20例)。

1.3 研究方法

患儿入院后立即予进入NICU，监测生命体征，根据病情需要给予相应治疗，摄片了解肺部情况。记录各组临床资料，包括使用PS的情况、呼吸支持的数据等。患儿入院后获取血液样本1.0mL，静置10min后，以2 000r/min离心10min，分离获得血清，置于-80℃冰箱待检。采用Luminex多功能液相芯片系统检测血清细胞因子白介素(IL)-1β、IL-6、IL-8和肿瘤坏死因子(TNF)-α水平。试剂盒购于美国Merck Millipore公司，严格按照试剂盒相关说明进行操作。

1.4 统计学方法

2 结果

2.1 三组患儿的一般资料

三组患儿的胎龄、出生体重、胎膜早破时间、5min Apgar评分，以及性别、分娩方式、双胎、妊娠期糖尿病、母亲产前未用激素及母亲绒毛膜羊膜炎的分布比较，差异均无统计学意义(P>0.05)，具有可比性，见表1。

2.2 三组患儿的血清细胞因子表达水平

三组患儿的IL-8、IL-1β和TNF-α水平比较差异均无统计学意义(P>0.05)；三组患儿的IL-6水平比较差异有统计学意义(P<0.05)，重症组患儿的IL-6水平均高于轻症组(t=6.737，P=0.012)和对照组(t=9.009，P<0.001)，差异均有统计学意义，而轻症组与对照组患儿的IL-6水平比较差异无统计学意义(t=1.732，P=0.088)，见表2。

2.3 三组患儿IL-6水平与部分呼吸支持参数的相关性

多次使用PS者包括2次及2次以上使用PS的患儿。部分NRDS患儿在第1次使用PS后肺部透亮度无明显好转甚至恶化，伴有呼吸支持参数无法下调者，需给予2次或2次以上PS。部分呼吸支持参数包括多次使用PS的例数、入院1周内有创通气的例数、BPD发生例数及总呼吸支持时间，三组间比较差异均有统计学意义(P<0.05)，见表3。

表1 三组早产儿一般资料的比较Table 1 Comparison of general clinical data of the premature infants among the three

表2 三组患儿血清细胞因子表达水平的比较Table 2 Comparison of serum cytokine expression levels of the premature infants among the three

表3 三组患儿部分呼吸支持参数及合并症的比较Table 3 Comparison of partial respiratory support parameters and complications of the premature infants among the three

采用Spearman相关性分析结果显示，患儿的IL-6水平与多次使用PS呈正相关(P<0.01)，即IL-6水平越高，多次使用PS的可能性增大；患儿的IL-6水平与入院1周内有创通气呈正相关(P<0.01)，即IL-6水平越高，入院1周内有创通气的可能性越大；患儿的IL-6水平与合并BPD发生呈正相关(P<0.05)，即IL-6水平越高，合并BPD发生的可能性越大。采用Pearson相关性分析结果显示，患儿的IL-6水平与总呼吸支持时间呈正相关(P<0.01)，即IL-6水平越高，总呼吸支持时间越长。见表4。

表4 患儿IL-6水平与部分呼吸支持参数的相关性分析Table 4 Correlation between serum IL-6 level and some respiratory support parameters in the premature infants

3 讨论

随着医学的发展、辅助生殖技术及NICU诊疗技术的进步，越来越多的超早产儿、超低出生体重儿得到救治存活，因此肺发育相关性疾病如NRDS和BPD的发生率较前明显升高。NRDS仍然是威胁早产儿生命健康的首要疾病[5]。产前激素的使用及产后PS的预防性使用显著减少了早产儿NRDS的发生率，减轻了早产儿NRDS发生的严重程度，使NRDS的救治成功率有了很大程度的提升[6]。但无论孕周大小，仍有部分早产儿发生较严重的NRDS。重症早产儿NRDS的死亡率较高，存活者后期可合并出现慢性肺病及BPD等情况[7]。目前临床上主要通过早产儿的临床表现结合胸片结果评估NRDS的严重程度，也有研究显示通过肺部超声评估NRDS的严重程度[8]，但对一些进行性加重的病例无法在早期进行预测。

3.1 IL-6与早产儿NRDS严重程度的相关性

本研究分析了不同程度早产儿NRDS早期细胞因子IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-α的水平，结果发现，三组患儿的IL-1β、IL-8和TNF-α比较均无显著性差异，三组患儿的IL-6水平比较有显著性差异，且重症组与对照组、重症组与轻症组的IL-6水平比较均有显著性差异，提示患儿早期IL-6水平与NRDS的严重程度相关，即NRDS程度越重，IL-6水平越高，与有关研究结果[9-10]符合；本研究显示轻症组与对照组患儿的IL-6水平比较无显著性差异，考虑可能在宫内炎症反应未引起瀑布级联样改变时，其可能对NRDS有保护作用，与既往相关研究结果[2-3]相符，提示IL-6水平可能具有双向调节作用，在IL-6水平轻度增高时，诱导胎儿肺组织表面活性蛋白表达，使PS合成增加，促进了胎儿肺组织的发育、成熟，并减少了NRDS的发生，这一作用已被既往研究证实[2，11]。在宫内炎症发生瀑布级联反应时，IL-6水平增高程度更大，提示早产儿肺损伤程度更重。有既往研究[11]支持相关结论。

3.2 IL-6与呼吸支持相关参数及合并症的相关性

IL-6是一种多效性细胞因子，在免疫调节、造血、炎症和肿瘤发生等方面具有广泛的生物活性[12]。有研究表明，当IL-6水平>30pg/mL时可诊断宫内感染[13]。有文献提示，当脐血IL-6水平>11pg/mL，孕妇发生早产、胎膜早破及新生儿发生严重疾病的机会增加[4]。本研究对早产儿早期的IL-6水平与呼吸支持部分参数进行了相关性分析，结果显示，患儿早期的IL-6水平与多次使用PS和入院1周内有创通气均呈正相关，即对于NRDS患儿而言，早期IL-6水平越高，需多次使用PS的可能性及入院1周内有创通气使用的可能性均增大，提示IL-6水平越高的NRDS患儿，对PS治疗的反应性越差，更加需要有创机械通气辅助呼吸。此外，本研究显示患儿的IL-6水平与合并BPD发生呈正相关，提示IL-6水平越高，合并BPD的可能性越大，与既往研究结果[14]符合；至于IL-6水平与合并BPD发生呈弱相关性，考虑与本研究纳入病例孕周偏大有关。本研究还显示患儿的IL-6水平与总呼吸支持时间亦呈正相关，即IL-6表达水平越高，总呼吸支持时间越长。因此，对于早产儿NRDS，IL-6水平越高，早期治疗的难度越大。

本研究发现，早产儿NRDS程度越重，IL-6水平越高。早期的IL-6表达水平对早产儿NRDS严重程度的判断具有较高的预测价值，亦对BPD的早期预测有一定的价值。但应注意的是，本研究样本量有限，因此仍需大样本随机对照研究、并增加细胞因子种类加以进一步佐证，以期寻找敏感性更高、特异性更强的NRDS早期诊断标志物，更准确地对NRDS患儿进行目标治疗，减少并发症，改善新生儿的长期预后，减轻家庭及社会的负担。