慢性免疫性血小板减少症患儿机体免疫功能变化情况研究

张 晴，高长俊，李 旭，任 蓉，韩 静

（唐山市妇幼保健院小儿血液科，河北 唐山 063003）

慢性免疫性血小板减少症患儿临床主要表现为血小板（PLT）水平反复降低、自发性皮肤和黏膜出血且出血时间较长、血块收缩不良等，容易合并感染或其他并发症，对患儿生活质量和生命安全造成严重威胁[1]。临床认为慢性免疫性血小板减少症发病可能与患儿机体免疫功能异常，导致抗PLT抗体大量产生引起PLT降低有关[2]。体液免疫、细胞免疫及T细胞相关因子水平是机体免疫系统重要组成部分，其相关指标水平失衡可导致机体免疫功能异常，可能与慢性免疫性血小板减少症的发生有关[3-4]。本研究通过分析慢性免疫性血小板减少症患儿体液免疫、细胞免疫及T细胞相关因子水平变化，探究慢性免疫性血小板减少症发生的机制，以期为临床治疗慢性免疫性血小板减少症提供参考和依据，报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

回顾性收集2019年1月－2021年2月我院收治的49例慢性免疫性血小板减少症患儿临床资料作为观察组，收集同期来我院进行体检的33例健康儿童体检资料作为健康对照组。观察组，男25例，女24例，平均年龄（8.35±1.11）岁，患儿外周血PLT水平（14.24±7.52）×109·L-1；健康对照组，男18例，女15例，平均年龄（8.28±1.13）岁，患儿外周血PLT水平（189.17±39.65）×109·L-1。观察组与对照组年龄、性别比较，差异无统计学意义（P＞0.05），观察组患儿外周血PLT水平低于健康对照组（P＜0.05）。本研究获本院医学伦理委员会审核批准。

1.2 纳入与排除标准

纳入标准：慢性免疫性血小板减少症诊断标准符合《临床儿科学》[5]中的相关标准者；临床资料完整者；年龄5～12岁。排除标准：合并先天性免疫功能障碍者；合并其他原因引起的造血功能障碍者；合并严重器官功能障碍者；合并恶性肿瘤者等。

1.3 方法与观察指标

1.3.1 一般资料 根据2组临床资料，对患儿性别、年龄、外周血PLT水平等进行统计。PLT检测方法：抽取患儿清晨空腹静脉血5 mL，采用流式细胞仪（CytoFLEX型，美国贝克曼库尔特公司）检测患儿外周PLT水平。

1.3.2 体液免疫 血液采集同1.3.1，离心收集血清，3 500 rpm，10 min，采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测患儿血清免疫球蛋白G（IgG）、免疫球蛋白A（IgA）、免疫球蛋白M（IgM）、补体C3、补体C4水平。

1.3.3 细胞免疫 血液采集同1.3.1，采用流式细胞仪检测患儿外周血自然杀伤细胞（NK）、调节性T细胞（Treg）、B细胞、CD3+、CD4+、CD8+水平，并计算CD4+/CD8+。

1.3.4 T淋巴细胞相关因子 血清制备同1.3.2，采用ELISA检测患儿血清白介素-6（IL-6）、白介素-10（IL-10）、肿瘤坏死因子（TNF）、干扰素-γ（IFN-γ）、白介素-17A（IL-17A）水平。

1.4 统计学方法

使用SPSS 22.0进行数据分析，计量资料使用均数±标准差（±s）表示，采用t检验进行比较。计数资料使用例（%）表示，χ2检验进行比较。以P＜0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 2组体液免疫比较

见表1。

表1 2组体液免疫比较（±s） g·L-1

表1 2组体液免疫比较（±s） g·L-1

注：与健康对照组比较，# P＜0.05

组别 例数 IgG IgA IgM 补体C3 补体C4观察组 49 16.61±8.28# 1.12±0.61 1.16±0.47 1.09±0.29 0.23±0.11健康对照组 33 9.66±3.19 0.98±0.26 1.14±0.38 1.17±0.33 0.25±0.08

2.2 2组细胞免疫比较

见表2。

表2 2组细胞免疫比较（±s）

表2 2组细胞免疫比较（±s）

注：与健康对照组比较，# P＜0.05

组别 例数 NK细胞/% Treg细胞/% B细胞/% CD3+/% CD4+/% CD8+/% CD4+/CD8+观察组 49 9.21±4.86# 4.23±1.68# 8.86±5.62# 72.22±8.26# 31.82±8.22# 33.62±4.62 0.95±0.31#健康对照组 33 13.26±5.63 5.26±0.83 4.39±1.82 76.12±8.26 39.26±6.28 32.22±4.25 1.22±0.33

2.3 2组T淋巴细胞相关因子比较

见表3。

表3 2组T淋巴细胞相关因子比较（±s） ng·L-1

表3 2组T淋巴细胞相关因子比较（±s） ng·L-1

注：与健康对照组比较，# P＜0.05

组别 例数 IL-6 IL-10 TNF IFN-γ IL-17A观察组 49 7.21±6.35 1.81±1.26# 3.26±2.61 5.59±4.22 10.26±7.26#健康对照组 33 5.33±4.39 4.56±2.33 2.57±0.37 4.92±4.62 2.97±1.04

3 讨论

慢性免疫性血小板减少症主要发生于2～5岁儿童，是一种常见的获得性自身免疫性出血性疾病[6-8]，可引发患儿重要脏器及颅内出血，甚至导致患儿死亡[9]，研究[10]发现，重症慢性免疫性血小板减少症患儿年病死率为1%～3%。慢性免疫性血小板减少症的发生与机体体液免疫和细胞免疫异常引起的PLT破坏增多或生成减少有关。本研究结果显示，观察组外周血PLT水平低于健康对照组，说明与健康儿童相比，慢性免疫性血小板减少症患儿机体PLT水平显著降低，与研究[11]结果一致。

本研究结果显示，观察组血清IgG水平及外周血B细胞水平高于健康对照组，而外周血NK细胞、Treg细胞、CD3+、CD4+水平及CD4+/CD8+低于健康对照组，说明慢性免疫性血小板减少症患儿存在体液免疫和细胞免疫异常。B细胞可合成分泌抗PLT抗体IgG与PLT表面糖蛋白结合而促进PLT裂解，可通过调节补体的细胞毒作用等方式溶解PLT，导致慢性免疫性血小板减少症患儿机体PLT水平降低[12]。Treg细胞可通过合成免疫抑制因子导致机体免疫抑制发生，可通过分泌细胞表面免疫抑制分子、颗粒酶、穿孔素等使得效应T淋巴细胞失活，导致机体免疫功能异常，促进PLT被免疫西包或免疫因子破坏，此外，其还可与CD4+竞争抗原呈递细胞的结合位点进一步影响机体免疫功能[13-14]。CD3+、CD4+水平及CD4+/CD8+是重要的T淋巴细胞亚群[15-17]，其水平变化受Treg细胞及体液免疫的多重影响，水平降低可引起机体免疫功能异常，导致患儿PLT水平降低；NK细胞作为人体固有的免疫细胞，对机体体液免疫和细胞免疫均有较好的调节作用，可在一定程度上缓解体液免疫和细胞免疫异常引起的PLT水平降低[18-20]。

T淋巴细胞相关因子IL-10、TNF、IFN-7、IL-17A与机体免疫功能异常的发生密切相关。本研究结果显示，观察组血清IL-10水平低于健康对照组，血清IL-17A水平高于健康对照组，说明IL-10、IL-17A与患儿慢性免疫性血小板减少症的发生密切相关[21-23]。IL-17A主要来自Th17细胞[24-25]，其参与了树突状细胞、中性粒细胞的增殖分化过程，促进固有免疫和获得性免疫之间的联系加强，介导炎性细胞对局部的浸润及组织损伤，对机体免疫功能异常引起的PLT水平降低具有促进作用[26]。IL-10可抑制单核巨噬细胞释放炎症介质，促进抗炎性因子释放，并具有抑制单核巨噬细胞活性的功能，增强机体细胞的免疫耐受功能，在缓解PLT水平降低方面具有一定作用效果[27]。研究[28]结果显示，慢性免疫性血小板减少症患儿经治疗后血清IL-10水平显著升高，进一步说明IL-10具有降低机体PLT损伤的作用。

综上所述，慢性免疫性血小板减少症患儿机体存在体液免疫、细胞免疫及T淋巴细胞相关因子水平异常，这可能与慢性免疫性血小板减少症的发病有关。本研究纳入的病例数较少，使得部分指标检测结果可能存在偏倚，后续可扩大病例数进一步研究慢性免疫性血小板减少症患儿体液免疫、细胞免疫及T淋巴细胞相关因子水平变化与疾病发生的关系。