乳腺癌MRI征象与ER、Her⁃2及Ki⁃67生物学指标的关系

卢艳丽 万宏燕 吴俊

乳腺癌是临床妇科最常见的恶性肿瘤，具有高发病率、高死亡率的特征［1］。近年来，乳腺癌发病率呈上升趋势，且逐渐年轻化，对女性生命安全造成严重威胁。影像学检查是临床诊断乳腺癌常用的辅助方法，其中磁共振成像（Magnetic reso⁃nance imaging，MRI）因具有高软组织分辨率、多方面成像等优势在乳腺癌的诊断中得以广泛应用［2］。随着MRI 技术的发展和广泛普及，乳腺癌MRI 征象与其病理学之间的关系备受关注。理论上来说，基因及细胞因子的存在与表达诱发的病理改变均可通过影像学方法呈现。相关学者认为，乳腺癌MRI 征象与雌激素受体（estrogen recep⁃tor，ER）、人表皮生长因子受体⁃2（Human epider⁃mal growth factor receptor⁃2，Her⁃2）等因子表达可能存在一定相关性［3］。本研究通过分析乳腺癌患者的临床资料，探讨其ER、Her⁃2 及核蛋白抗原（Ki⁃67）表达情况，并分析上述指标与MRI 征象的相关性，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

收集2019年4月至2021年7月北京市隆福医院收治的94 例乳腺癌患者，均为女性，平均年龄为（49.68±8.24）岁；临床分期：Ⅰ期15 例，Ⅱ期57 例，Ⅲ期22 例。纳入标准：均符合乳腺癌诊断标准［4］，且经手术或病理检查确诊；影像学资料和病理资料无丢失或缺损；既往无手术史；年龄>18 岁，且无意识障碍者。排除标准：存在MRI 检查禁忌症者；存在自身免疫疾病或全身感染性疾病；哺乳期或妊娠期孕妇；循环功能严重障碍、肝肾功能严重损伤者。本研究经院医学伦理委员会批准通过，受试者或家属已签署知情同意书。

1.2 方法

1.2.1 MRI 检查

设备：3.0T MRI（GE Healthcare，750W，Waukesha，WI）扫描仪。选用7 通道专用乳腺相控阵表面线圈。患者取俯卧位，将患者两个乳房垂于空洞内。对患者进行T2 压脂，轴位TIWI、T2WI 序列，弥散加权成像（DWI）。T1WI 平扫、T2WI 平扫及脂肪抑制扫描层厚<1.5 mm，单次扫描时间不超过2 min。常规平扫+Gd⁃DTPA 试剂行增强扫描。扫描完后将图像进行后处理，绘制时间⁃信号强度曲线（TIC），TIC 的层面设定感兴趣区（ROI）选在强化最为显著且曲线性质最差的区域，按照Alonso 等［5］的研究标准分为流入型（Ⅰ型），平台型（Ⅱ型），流出型（Ⅲ型）。最后进行统计，得出最终诊断结果。MRI 图像由两名或两名以上经验丰富、高年资诊断医师采用双盲法在不知病理结果的情况进行阅片，重点观察肿瘤大小、分级、类型、淋巴结转移及强化形式等特征。

1.2.2 免疫组化学检测

兔抗人ER 免疫组化单克隆抗体、鼠抗人Her⁃2、Ki⁃67 单克隆抗体均由美国Epitomics 公司提供。链酶菌抗生物素蛋白⁃过氧化物酶连接（SP）免疫组化试剂盒、DAB 试剂盒均购自北京中杉金桥生物技术有限公司。

收集上述94 例患者术后癌组织（乳腺癌组）及距瘤体5 cm 以上的癌旁组织（癌旁组织组）。各组织标本均脱水，经10%甲醛固定，二甲苯脱蜡；常规石蜡包埋，5 μm 连续厚切片。根据S⁃P 免疫组化染色法对ER、Her⁃2、Ki⁃67 进行检测，检测过程严格按照说明书进行。一抗阴性对照使用PBS（磷酸盐缓冲液）进行代替。

结果判定［6］：采用双盲法对结果进行判定，即根据阳性细胞在全部组织细胞中占比及阳性细胞染色强度判定：①按显色细胞数计分，无阳性细胞数为0 分；阳性细胞<10%为1 分，10%～50%为2分；50%～75%为3 分；>75%为4 分。②按细胞着色程度计分，0 分为无色，1 分为淡黄色，2 分为棕黄色，3 分为黄褐色。每张切片取5 个高倍视野。两类分数相乘总分<3 分为阴性，≥3 分为阳性。

1.3 统计学方法

采用SPSS 22.0 统计软件进行统计分析，计量资料采用（）表示；计数资料采用n（%）表示，并采用χ2检验；采用双变量相关性分析乳腺癌MRI征象与ER、Her⁃2 及Ki⁃67 阳性表达的相关性；以P<0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 不同组织中ER、Her⁃2、Ki⁃67 表达情况

乳腺癌组ER、Her⁃2、Ki⁃67 阳性表达率显著高于癌旁组织组，差异有统计学意义（P<0.05）。见表1、图1。

图1 免疫组化图（SP，×400）Figure 1 Immunohistochemical map（SP，×400）

表1 不同组织中ER、Her⁃2、Ki⁃67 表达情况［n（%）］Table 1 Expression of ER，Her⁃2 and Ki⁃67 in different tissues［n（%）］

2.2 MRI 结果

94 例患者均为浸润型乳腺癌。MRI 检查显示肿瘤直径>2 cm 者52 例；形态不规则40 例；边缘不光整55 例，呈毛刺征；分叶征33 例；早期环形强化71 例；动态曲线分型：Ⅰ型8 例，Ⅱ型51 例，Ⅲ型35 例；内部坏死51 例。典型病例。见图2。

图2 乳腺癌MRI 图像Figure 2 Breast cancer MRI images

2.3 94 例乳腺癌MRI 征象与ER、Her⁃2、Ki⁃67 表达情况的关系

ER 阳性表达者形态不规则、毛刺征、早期环形强化占比明显高于ER 阴性表达者，差异有统计学意义（P<0.05）。Her⁃2 阳性表达者形态不规则，内部坏死占比高于Her⁃2 阴性表达者，差异有统计学意义（P<0.05）。Ki⁃67 阳性表达者毛刺征、分叶征占比高于Ki⁃67 阴性表达者，差异有统计学意义（P<0.05）。见表2。

表2 94 例乳腺癌MRI 征象与ER、Her⁃2、Ki⁃67 表达情况的关系［n（%）］Table 2 Relationship between MRI signs and expression of ER，Her⁃2 and Ki⁃67 in 94 cases of breast cancer［n（%）］

2.4 乳腺癌MRI 征象与ER、Her⁃2 及Ki⁃67 阳性表达的相关性分析

肿瘤形态、边缘、强化形式与ER 阳性表达呈正相关（P<0.05）；边缘与Ki⁃67 呈正相关（P<0.05）；内部坏死、形态与Her⁃2 阳性表达呈正相关（P<0.05）。见表3。

表3 乳腺癌MRI 征象与ER、Her⁃2 及Ki⁃67 阳性表达的相关性分析Table 3 Correlation analysis of breast cancer MRI signs and positive expression of ER，Her⁃2 and Ki⁃67

3 讨论

王月波等［7］研究发现，乳腺癌生物学行为与组织病理学改变是乳腺癌影像学表现的基础。ER、Her⁃2 及Ki⁃67 等生物学指标可一定程度上反映乳腺癌的生物学行为及患者预后。探讨乳腺癌影像学征象与分子生物学指标之间的关系，可有效预测乳腺癌的侵袭性，为患者临床治疗方案选择及预后评估提供可靠依据。

相关研究证实，ER 的表达与癌组织类型存在密切联系，若癌细胞的分化程度较高时，ER 阳性表达率会降低［8］。胡幸等［9］亦指出，在乳腺癌中，ER有无表达及表达程度可有效评估患者临床疗效及预后。Her⁃2 是人体表皮生长因子之一，主要参与细胞生长、增殖及分化等过程，可促使蛋白多度表达，进而导致细胞产生异型增生，与肿瘤进展情况有关，对肿瘤预后具有很好的预测作用［10］。Ki⁃67 是一种核抗原，目前病理学普遍将Ki⁃67 指数列为增殖标志物来评估肿瘤增殖能力，是公认的细胞增殖活性标志物。Ki⁃67 阳性表达率高者乳腺癌细胞恶性程度高，细胞增殖活跃，因此肿瘤生长速度快、侵袭性强，预后较差。本研究中，上述因子在乳腺癌组织中的阳性表达率显著高于癌旁组织，与Ramasamy等［11］报道结果相符，说明ER、Her⁃2 及Ki⁃67 在乳腺癌发生、发展中具有重要作用。

在乳腺癌MRI 检查中，乳腺癌肿瘤形态、边缘、强化特征是较为重要的诊断点［12］。本研究结果显示，ER 与肿瘤形态、边缘、强化形式具有显著相关性，形态不规则、边缘有毛刺、非环形强化者ER 阳性表达率较高。Ikink 等［13］报道指出，乳腺癌肿瘤形态不规则、边缘有毛刺征者，ER 阳性表达率高。边缘毛刺肿块通常被认为是恶性肿瘤，反映了肿瘤对周围的浸润，具有一定侵袭性。本研究发现，Ki⁃67 与肿瘤边缘亦存在显著相关性，与Schueler 等［14］报道结果一致。上述研究表明，Ki⁃67、ER 阳性表达可能提示肿瘤恶性程度高，患者预后较差。国内相关报道显示，乳腺癌MRI 征象除形态不规则、边缘毛刺征外，肿瘤内部还易出现坏死时，可提示肿瘤生长迅速，内部供血不全，具有侵袭性［15⁃16］。本研究中，MRI显示肿瘤内部有坏死者，Her⁃2 阳性表达率更高。进一步相关性分析显示，内部坏死与Her⁃2 阳性表达呈正相关。表明Her⁃2 阳性表达者，肿瘤内部出现坏死的几率可能更高，需引起重视。考虑其原因可能与Her⁃2 高表达的乳腺癌中，Her⁃2 抑制细胞凋亡、促进细胞增殖，肿瘤生长迅速，肿瘤内部易由于血供相对缺乏而出现营养不良性坏死有关［17］。

综上所述，乳腺癌患者MRI征象与ER、Her⁃2及Ki⁃67 阳性表达存在一定的相关性，MRI 征象与ER、Her⁃2 及Ki⁃67 水平在预测乳腺癌生物学特性中具有一定指导价值。