正交试验优选复方痛风颗粒处方工艺*

唐勇琛 ，张亚洲 ，吕建伟

（1. 广西壮族自治区柳州市中医医院·柳州市壮医医院，广西 柳州 545000； 2. 贵州中医药大学药学院，贵州贵阳 550025； 3. 广西中医药大学第一附属医院，广西 南宁 530000）

复方痛风颗粒是在柳州市中医医院痛风经验方“健脾化浊汤”基础上拟研发的纯中药制剂，具有促进尿酸排泄作用，临床疗效较好［1-4］。方中白术益气健脾，燥湿利水，健运中焦，散精于肺，为君药；紫苏梗宽胸利膈，宽中和胃，解鱼蟹毒，加强中焦运化，为臣药；车前子、薏苡仁清热利尿，利湿化浊，助尿酸从膀胱排泄，为佐药；枇杷叶和胃降逆，肃降肺气，使精气得以正常运行，为使药；诸药合用，共奏健脾肃肺、利湿化浊之功效。临床原以汤剂入药，存在服用剂量大、患者顺应性差、易霉变酸臭、携带贮存不便等缺点。为优化临床对该方的使用，需将其开发为医疗机构中药制剂，同时兼顾到实际生产应用，拟将其研制成颗粒剂。因此，在前期研究的基础上，本研究中拟优化该制剂的最佳辅料及配比，考察不同辅料对颗粒成型性、吸湿性、溶化性和流动性的影响，同时采用正交试验法优化处方工艺，以期为该制剂的开发利用提供参考。现报道如下。

1 仪器与试药

1.1 仪器

GZX - DH500 - BS - Ⅱ型电热恒温干燥箱（苏州市莱顿科学仪器有限公司）；DZF-6090 型多功能真空干燥箱（上海胜卫电子科技有限公司）；AB135-S 型电子分析天平（瑞士Mettler Toledo 公司，精度为0.1 mg）；LK - 1000A 型摇摆式高速中药粉碎机（上海新诺仪器设备有限公司）。

1.2 试药

糊精（药用级，安徽淮南山河药用辅料有限公司，批号为20161106）；可溶性淀粉（药用级，西陇化工股份有限公司，批号为20160204）；蔗糖（食品级，广西凤糖生化股份有限公司，批号为20160408）；其余试剂均为分析纯。白术（批号为20160106）、紫苏梗（批号为20160201）、车前子（批号为20151128）、薏苡仁（批号为20151214）、枇杷叶（批号为20160217）饮片，均购自广西仙茱中药科技有限公司，经贵州中医药大学刘芃教授鉴定为正品，均符合2020 版《中国药典（一部）》要求［5］69，107，213，354，393。

2 方法与结果

2.1 浸膏粉制备

按处方比例称取各药材适量，加水浸泡30 min，提取 3 次，分别加12，10，10 倍量水，均提取45 min，滤过，合并滤液，减压浓缩得浸膏（相对密度1.26～1.30，80 ℃），60 ℃下减压干燥，粉碎，过60目筛，即得［6］。

2.2 辅料初筛

以吸湿率为评价指标，选择吸湿性相对较小且有助于成型、可溶性较好的辅料为处方辅料。分别称取一定量的糖粉、糊精、可溶性淀粉及其混合辅料，于30 ℃烘箱中恒重48 h，称取2 g，分别置已恒重的称量瓶，在底部将其铺开至约2 mm 厚度，将称量瓶盖打开，放入相对湿度为75%盛有氯化钠过饱和溶液的玻璃干燥器内，于25 ℃条件下恒温放置48 h，称量并计算吸湿率，共做2 组，取平均值。结果见表1。可见，各种辅料中，糖粉∶糊精（1∶1，m/m）的吸湿率最低，因此初步确定使用糖粉∶糊精（1∶1，m/m）混合辅料作为成型辅料。

表1 相对湿度75%下各辅料48 h的吸湿率（%）Tab.1 Moisture absorption rate of various excipients within 48 h at 75% RH（%）

2.3 辅料选择

采用湿法制粒，称取2.1 项下浸膏粉和2.2 项下辅料适量，充分混匀，以适量80%乙醇为润湿剂制软材，以达到“手握成团，捏之即散”的状态，以20 目筛制粒，60 ℃下减压干燥2 h，整粒即得，并进行综合评价［7］。

成型率测定：按2020 年版《中国药典（四部）》通则0982 粒度和粒度分布测定法（第二法筛分法）进行测定［5］6，146，485。能通过一号筛且不能通过五号筛的颗粒即为合格颗粒。成型率（%）=合格颗粒质量/颗粒总质量×100%。

吸湿率测定：按2020 年版《中国药典（四部）》通则9103 药物引湿性试验指导原则进行测定。取干燥的具塞玻璃称量瓶，试验前1 天置盛有氯化铵过饱和溶液的恒温干燥器中［温度为（25 ± 1）℃，相对湿度为（80± 2）%］，精密称定质量（m1）；取适量样品，均匀摊布于上述量瓶中（约2 mm厚），精密称定质量（m2）；在上述恒温恒湿条件下敞开称量瓶，并与瓶盖同时放置48 h，盖好称量瓶盖子，精密称定质量（m3），计算吸湿率。吸湿率（%）=（m3-m2）/（m2-m1）× 100%［5，8-9］。

溶解性测定：按2020 年版《中国药典（四部）》制剂通则0104 颗粒剂（可溶颗粒检查法）进行测定［5，10］。称取样品10 g，加70 ℃热水200 mL，磁力搅拌直至颗粒完全溶解或有轻微浑浊，记录所需时间。

流动性测定：采用固定漏斗法测定样品的休止角（α）［10-12］。将3 只漏斗串联固定于铁架台上，使其距离水平桌面上的坐标纸高度适宜，则最下方的漏斗下口端距离坐标纸的高度即为h。将样品沿最上方的漏斗壁缓慢倒入，直至坐标纸上的样品堆起并触碰到最下方的一只漏斗的下口端为止，测量圆锥体底部的直径2r。α=arctg（h/r）。

综合评分及结果分析：上述各指标权重系数依次为0.25，0.25，0.25，0.25，综合得分（%）= 粒度 / 最大粒度×0.25+最小吸湿率/吸湿率×0.25+最小溶解时间/ 溶解时间 × 0.25 + 最小休止角/ 休止角 ×0.25［8，13］。结果见表2。可见，糖粉∶糊精（1∶1，m/m）的综合评分最高，故以其为本制剂的成型辅料。

表2 综合评分结果Tab.2 Results of comprehensive scoring

2.4 正交试验优选处方工艺

以辅料用量（浸膏粉∶辅料，g/g，因素A），乙醇体积分数（%，因素B），料液比（浸膏粉∶乙醇，g/mL，因素C）为考察因素，以成型率（最大值）、吸湿率、溶解时间和α（最小值）所得的综合得分为考察指标，采用L9（34）正交试验法考察。因素与水平见表3，正交试验结果见表4，方差分析结果见表5。由表4 和表5 可见，各影响因素影响强度依次为A ＞B ＞C，且仅因素A 对结果有显著影响（P＜0.05）。同时结合直观分析，确定综合得分最高的即为最佳处方，即A3B1C3，具体为浸膏粉（g）∶辅料（g）=1∶1，乙醇体积分数为80%，料液比为6∶1。

表3 因素与水平Tab.3 Factors and their levels

表4 L9（34）正交试验设计与结果Tab.4 Design and results of the L9（34） orthogonal test

表5 方差分析结果Tab.5 Results of the ANOVA

2.5 验证试验

按优选的处方工艺制备3 批样品，并进行验证试验［12-15］。结果平均成型率为97.50%（RSD=0.56%），平均吸湿率为8.45%（RSD= 1.56%），平均溶解时间为41.62 s（RSD=1.53%），α均值为32.34 °（RSD=1.42%）。颗粒剂的外观性状、粒度、水分、溶解性、流动性等均符合2020年版《中国药典（四部）》制剂通则0104颗粒剂项下的要求，表明该处方工艺合理可行、稳定可靠。

2.6 颗粒剂临界相对湿度测定

取干燥至恒重的样品2 g，精密称定，置恒重的敞口称量瓶，共7 份，分别置放有氯化锂（LiCl，相对湿度11.05%）、氯化镁（MgCl2，相对湿度33.00%）、碳酸钾（K2CO3，相对湿度42.76%）、溴化钠（NaBr，相对湿度57.70%）、氯化钠（NaCl，相对湿度75.28%）、氯化钾（KCl，相对湿度 84.26%）、硝酸钾（KNO3，相对湿度92.48%）的过饱和盐溶液的玻璃干燥器中，于25 ℃条件下放置7 d，取出并称定质量，计算吸湿率［9，16-19］。结果见表6。以相对湿度（%）为横坐标（X）、吸湿率（%）为纵坐标（Y）绘制吸湿曲线，沿曲线两端作切线，得2条切线的线性方程分别为Y1= 0.025 96X1+ 0.703 33 和Y2=1.064 48X2-76.882 82，此2条切线交点所对应的横坐标值即为临界相对湿度。结果见图1。根据切线方程计算可得，样品的临界相对湿度为74.71%，即在整个生产及贮存过程中，周围环境相对湿度须低于74.71%。

表6 不同相对湿度下样品的吸湿率（%）Tab.6 Moisture absorption rate of samples at different RH（%）

图1 样品吸湿曲线图Fig.1 Moisture absorption curve of sample

3 讨论

目前，国家药品监督管理局（NMPA）及药品审评中心（CDE）对于医疗机构中药制剂均有相关的工艺制备指导原则或指导规范。如NMPA《中药注册分类及申报资料要求》［20］中制剂成型工艺部分内容规定，应提供中间体、辅料研究及制剂处方筛选研究资料，明确所用辅料的种类、级别、用量等；提供成型工艺方法、主要工艺参数的确定依据等。CDE《中药复方制剂生产工艺研究技术指导原则（试行）》［21］和《中药新药研究各阶段药学研究技术指导原则（试行）》［22］的成型研究部分内容规定，中药复方制剂成型研究应根据制剂成型所用原料的性质和用量，结合用药经验、适应证等，选择适宜的剂型、辅料、生产工艺及设备，明确所用辅料、成型工艺及其主要工艺参数等。因此，在传统中医药理论的指导下，本研究中以NMPA 及CDE 发布的相关指导原则和技术要求为蓝本，结合现代制剂研究开发技术，对该临床经验方进行二次开发，重点考察成型工艺所用原辅料的种类、性质、用量及其配比，不同辅料对颗粒成型性、吸湿性、溶化性和流动性的影响；同时还优选其处方工艺条件，考察辅料用量、乙醇体积分数及料液比等参数及其临界相对湿度，最终将传统汤剂研制成颗粒剂。

本研究中制备所得的中药浸膏粉吸湿性较强，口感较苦，难以直接制粒和服用。尽管乳糖、甘露醇等辅料吸湿性小、溶解性好，但价格昂贵，且乳糖还易出现不耐受的症状［23］，不利于实际大生产和患者服用，因而不予考虑。为了改善口感和降低吸湿性，考虑以经济易得的蔗糖为基础辅料，同时辅以糊精、可溶性淀粉等吸湿性较小，成型性、流动性较好的其他辅料来改善其黏合和吸湿等情况。

预试验中发现，浸膏相对密度在1.10～1.25（80 ℃）时，制粒所需辅料的量较多（超过浸膏的5 倍）；相对密度高于1.30（80 ℃）时，则浸膏过于黏稠，搅拌时，浸膏与辅料不易混匀且易粘壁；相对密度在1.26～1.30（80 ℃）时，制粒所需辅料的量和软材软硬均适中，且较易过筛成型。故本试验中选择浸膏的相对密度为1.26～1.30（80 ℃）。

预试验中还对各因素水平进行了单因素考察。因素A，由于提取物出膏率约为25%，每次服用的生药材量为30 g，故每次服用浸膏粉量约为7.5 g，而颗粒剂的口服单剂量一般为每包10～15 g，故加入辅料量约为2.5～7.5 g。故选择浸膏粉与辅料的配比水平为3∶1，2∶1，1∶1。因素B，选择50%，60%，70%，80%，90%的乙醇进行考察，当加入50%，60%，70%的乙醇时细粉较多，不易成团；加入80%，90%乙醇时，制得的软材适中，可手握成团，捏之即散，故选择水平为80%，85%，90%。因素C，选择80%乙醇作润湿剂，浸膏粉∶辅料（1∶1，m/m）时，发现料液比为10∶1，8∶1，6∶1 时较易制得软材，故选择这3个水平。

综上所述，该处方工艺稳定可靠、简便可行，所选辅料合理，所制得颗粒成型性高、吸湿性低、溶解性好、流动性好，符合2020 年版《中国药典（四部）》制剂通则0104 颗粒剂项下检查要求，可为该制剂的中试及大生产提供理论依据。