醋和蛋白饮料中脱氢乙酸两种前处理方法的比较研究

2022-08-15陈丽娥董晓尉

粮食与食品工业 2022年4期

陈丽娥，董晓尉

金华市食品药品检验检测研究院 (金华 321015)

脱氢乙酸是一种广谱类防腐剂，对引起食品腐败的酵母菌、霉菌具有很好的抑制作用，是一种安全型食品防霉、防腐保鲜剂，广泛应用于食品中。作为食品添加剂，一般使用的是脱氢乙酸钠。赵伟亚[1]在大鼠凝血机制的研究中发现，高剂量的脱氢乙酸钠对大鼠凝血障碍发挥着重要调节作用；杨康妮[2]发现食品添加剂脱氢乙酸钠可以通过改变细菌的代谢状态进而诱导抗生素耐受性的形成；戴有金等[3]通过大小鼠的急性毒性实验，认为脱氢乙酸钠属于低毒级别。

我国对脱氢乙酸及其钠盐的使用范围和最大使用量都有明确规定，目前，常用的脱氢乙酸检测方法是GB 5009.121—2016[4]，标准中明确了适用的食品种类，其他食品可参考执行。醋和蛋白饮料并未在明确的适用食品类别中，因醋和蛋白饮料属于液体类，但基质复杂又含蛋白质，根据其特性，选择标准里气相色谱法中5.1.1果蔬汁、果蔬浆和5.1.3面包、糕点、烘烤食品馅料、复合调味料、预制肉制品及熟肉制品两种试样制备方法对加标样品进行测定，并进行分析比较，为醋和蛋白饮料中脱氢乙酸测定的前处理方法选择提供参考。

1 材料与方法

1.1 仪器、试剂与材料

7890B型气相色谱仪，配火焰离子化检测器(FID)，美国Agilent公司；2500TH型数控超声波清洗器，上海安谱实验科技股份有限公司；Multi reax型多管振荡器，德国Heidolph公司；Direct-Q?5UV型超纯水机，默克密理博；2-16KL型冷冻离心机，德国Sigma公司；ME204型电子天平，瑞士梅特勒公司；移液器，德国Eppendorf公司。

陈醋、红曲醋、2种白醋(大米、糯米)和4种蛋白饮料，均购于当地市场；脱氢乙酸标准品(纯度99.9%)，购于上海安谱实验科技股份有限公司；乙酸乙酯和正己烷(色谱纯)，购于德国默克股份两合公司；盐酸、氯化钠、氢氧化钠、硫酸锌和盐酸(分析纯)，购于国药集团化学试剂有限公司。

1.2 方法

1.2.1标准溶液的配制

标准储备液：准确称取100 mg脱氢乙酸标准品于容量瓶中，用乙酸乙酯溶解并定容至100 mL，配制成1.0 mg/mL的脱氢乙酸标准储备液，于0 ℃～4 ℃保存。

标准工作液：将脱氢乙酸储备液用乙酸乙酯稀释，配制成浓度为10、20、40、60、80、100 μg/mL的标准工作液，待测。

1.2.2试样制备

1.2.2.1 果蔬汁、果蔬浆(方法一)

称取样品5 g于50 mL离心管中，加10 mL水振摇1 min，加1 mL盐酸(1+1)酸化后，加入5 mL乙酸乙酯，振摇提取2 min，静置分层后取上清液测定，同时进行2水平3平行加标试验。

1.2.2.2 面包、糕点、烘烤食品馅料、复合调味料、预制肉制品及熟肉制品(方法二)

称取样品5 g于50 mL离心管中，加15 mL水、2.5 mL硫酸锌溶液(120 g/L)混匀，用氢氧化钠溶液(250 g/L)调pH至7.5，超声提取15 min，转移至25 mL容量瓶中并加水定容，样液加入5 mL正己烷，振摇1 min，静置分层后取下层水相于离心管中，离心，取10 mL上清液，加1 mL盐酸(1+1)酸化后，加入5 mL乙酸乙酯，振摇提取2 min，静置分层后取上清液测定，同时进行2水平3平行加标试验。

1.2.3色谱条件

色谱柱： HP-5柱(30 m×0.320 mm×0.25 μm，美国Agilent公司)；进样口温度250 ℃；检测器(FID)温度300 ℃；程序升温，初始温度为80 ℃，以20 ℃/min的速率升至200 ℃。进样模式为分流进样，分流比5∶1，分流流量9 mL/min；流速1.8 mL/min；进样量1 μL。

2 结果与讨论

2.1 线性范围

将脱氢乙酸储备液用乙酸乙酯稀释，配制成浓度为10、20、40、60、80、100 μg/mL的标准工作液，在1.2.3的色谱条件下进行检测，以峰面积对标准溶液中各组分的质量浓度绘制标准曲线。脱氢乙酸在10～100 μg/mL范围内线性关系良好，相关系数(r2)大于0.995(见表1)。

表1 脱氢乙酸的线性方程、相关系数

2.2 回收率、精密度试验

以陈醋、红曲醋、2种白醋(大米、糯米)和4种蛋白饮料作为研究对象，分别加入0.04、0.08 g/kg这2个不同浓度水平的脱氢乙酸标准溶液，按前处理方法进行处理分析，各浓度水平分别进行3次平行试验，各试样的平均回收率和相对标准偏差(RSD)见表2。

表2 样品中脱氢乙酸的平均加标回收率和相对标准偏差(n=3)

在醋和蛋白饮料基质中，方法一的平均回收率为115.8%～126.2%，相对标准偏差(RSD，n=3)为0.34%～1.44%；方法二的平均回收率为99.4%～106.2%，相对标准偏差(RSD，n=3)为0.31%～1.29%。方法一前处理中采用直接酸化提取，样品中存在一定的基质干扰，造成回收率偏高；醋的工艺及分类不同，其基质复杂且存在一定差异性，回收率也相差较大，不同蛋白饮料的基质干扰相差不大。方法二前处理中先加入硫酸锌和氢氧化钠，调pH至7.5，使脱氢乙酸转化成钠盐溶于水，沉淀蛋白及部分杂质，用正己烷去脂后再酸化提取，从结果看出，8种样品基质干扰均明显减少。考虑到食品样品基质的特殊性，每种样品的基质都不尽相同，基质匹配定量在日常检测的应用中会受到限制，本实验采用溶剂标准溶液进行定量。