妊娠期HPV感染孕妇CD4+、CD8+和CD4+CD8+水平与母婴结局的关系

梁雪静 黄金 蔡贞玉

人乳头瘤病毒（Human papillomavirus，HPV）是以人类为唯一宿主的DNA 病毒，传播途径以性接触传播为主，具有极强的传染性，可导致生殖器尖锐湿疣、诱发宫颈癌等［1⁃2］。HPV 感染多好发于育龄期女性，近年来，HPV 引发的感染尤其是在孕妇生殖道感染的发病率呈逐渐上升趋势［3］。相关报道显示，随着女性年龄增长，免疫功能、内分泌功能逐渐衰退，对HPV 的清除与抵御能力亦随之变弱，加之生殖道微生态环境紊乱，可能导致HPV持续感染［4］。HPV 感染及其进展过程与可能人体免疫功能下降存在密切联系。淋巴细胞是人体重要免疫细胞之一，本研究通过检测妊娠期HPV 感染孕妇的T 淋巴细胞亚群水平，旨在分析其T 淋巴细胞亚群水平变化情况及与母婴结局的关系。

1 资料与方法

1.1 一般资料

收集2018年10月至2020年10月航空总医院收治的96 例HPV 感染孕妇纳入HPV 组，平均年龄（30.85±3.88）岁。纳入标准：①17 种高危型人HPV核酸检测阳性者；②具有完整资料者；③在本院建卡、按规定进行产检并随访至分娩；④分娩孕周≥28周，单胎妊娠；排除标准：①意识、沟通障碍者；②合并心、肝、肺等脏器恶性疾病者；③合并阴道出血、多囊卵巢综合征等；④伴有各种急慢性疾病、免疫性疾病者。另选取同期76 例HPV 阴性的正常孕妇作为对照组，平均年龄（29.67±2.47）岁。两组一般资料比较差异无统计学意义（P>0.05）。本研究经院医学伦理委员会批准通过，受试者均签署知情同意书。

1.2 方法

1.2.1 T 淋巴细胞亚群检测

抽取两组孕妇清晨空腹静脉血3 mL，置入肝素钠抗凝管内，颠倒混匀3 次，标本鉴定合格后，编管；随后在试管中加入标准抗体，同时加入标准量的抗凝全血至管底，振荡混匀，阴暗处放置15～20 min；加入溶血素，溶解红细胞；避光室温至完全溶血，24 h内检测T 淋巴细胞亚群。采用贝克曼流式细胞仪检测患者外周血T 淋巴细胞亚群，详细操作按配套试剂盒进行检测。参考范围［5］：CD4+<35%为降低；CD8+>20%为增高；CD4+CD8+<1.4 为降低。

1.2.2 母婴结局

根据母婴结局情况将HPV 组分为不良妊娠组与正常妊娠组。不良妊娠结局：早产、胎膜早破、胎儿生长受限、新生儿呼吸窘迫综合征、产后出血、产褥感染、死胎等［6］。

1.3 统计学方法

采用SPSS 22.0 统计软件进行统计分析，计量资料以（）表示，采用t检验；计数资料以n（%）表示，行χ2检验；采用ROC 曲线分析CD4+、CD8+、CD4+CD8+对HPV 感染孕妇母婴结局的预测价值；采用多元Logistic 回归分析影响HPV 感染孕妇母婴结局的独立危险因素，以P<0.05 为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 两组CD4+、CD8+、CD4+CD8+水平比较

HPV 组CD4+、CD4+CD8+水平均低于对照组，CD8+明显高于对照组，差异均有统计学意义（P<0.05）。见表1。

表1 两组CD4+、CD8+、CD4+CD8+水平比较（±s）Table 1 Comparison of CD4+，CD8+，CD4+CD8+levels between the two groups（±s）

表1 两组CD4+、CD8+、CD4+CD8+水平比较（±s）Table 1 Comparison of CD4+，CD8+，CD4+CD8+levels between the two groups（±s）

组别HPV 组对照组t 值P 值n 96 76 CD4+（%）23.41±4.14 31.25±7.32 8.860<0.001 CD8+（%）30.41±6.15 22.34±3.62 10.131<0.001 CD4+CD8+（%）0.51±0.32 1.78±0.24 28.774<0.001

2.2 HPV 感染孕妇母婴结局情况及其单因素分析

96 例HPV 感染孕妇中，不良妊娠结局发生率为20.83%（20/96），其中早产3 例，胎膜早破6 例，胎儿生长受限5 例，新生儿呼吸窘迫综合征6 例。单因素分析显示，不良妊娠组妊娠年龄、高危型HPV 感染、CD4+、CD8+、CD4+CD8+水平与正常妊娠组比较具有统计学意义（P<0.05）。见表2。

表2 HPV 感染孕妇母婴结局情况及其单因素分析［n（%）］Table 2 Maternal and infant outcomes of pregnant women infected with HPV and its univariate analysis［n（%）］

2.3 影响HPV 感染孕妇母婴结局的多因素logis⁃tic 回归分析

经非条件多因素logistic 回归模型分析得，年龄>35 岁、高危型HPV 感染、CD4+降低、CD8+增高、CD4+CD8+降低是导致HPV 感染孕妇母婴不良结局的独立危险因素（P<0.05）。见表3。

表3 影响HPV 感染孕妇母婴结局的多因素logistic 回归分析Table 3 Multivariate logistic regression analysis of the maternal and infant outcomes of pregnant women with HPV infection

2.4 CD4+、CD8+、CD4+CD8+对HPV 感染孕妇母婴结局的预测价值

ROC 曲线显示，CD4+、CD8+及CD4+CD8+联合检测曲线下面积（AUC）、敏感度、特异度均高于各项指标单独检测（P<0.05）。见表4、图1。

表4 CD4+、CD8+、CD4+CD8+对HPV 感染孕妇母婴结局的预测价值Table 4 The predictive value of CD4+，CD8+，CD4+CD8+on the maternal and infant outcome of HPV⁃infected pregnant women

图1 ROC 曲线分析Figure 1 The ROC curve

3 讨论

女性HPV 感染在妇科临床较为常见，尤其是妊娠期女性。妊娠期是女性的特殊时期，母体机体免疫功能尤其是细胞介导的免疫功能受到抑制，大大降低了机体抗病毒的能力；其次妊娠期盆腔血供丰富，体内雌孕激素水平增高，机体免疫功能下降，使得病毒、细菌易感性增高［7］。据相关资料显示，我国女性HPV 感染率约为25%左右，孕妇HPV 感染率约为16.8%［8］。国内外报道认为，细胞免疫是抗病毒免疫的主要方式，而淋巴细胞是细胞免疫系统的主要细胞［9⁃10］。T 淋巴细胞是一组免疫细胞，参与机体细胞免疫反应并起主导调节作用。

HPV 病毒感染会激发机体的特异性免疫，细胞免疫在控制HPV 的激活与消退中起主要调节作。Donmez 等［11］认为，对HPV 病毒清除起较大作用的是T 淋巴细胞亚群。CD4+细胞是T 淋巴细胞亚群之一，可通过直接或分泌肿瘤坏死因子、干扰素等细胞因子，抑制病毒复制。当机体发生免疫病理改变时，CD4+细胞数量会明显减少、细胞功能受损。李琦等［12］亦发现，与正常对照组比较，HPV感染组CD4+明显降低。此外，机体异常免疫改变还表现在CD8+细胞表达增高。CD8+细胞具有很好的监控和杀伤功能。在HPV 感染早期，CD8+表达常高于正常人，且患者免疫功能亦会出现异常［13］。CD4+/CD8+比值则是重要的免疫状态的检测指标，其比例的降低与免疫系统损伤的程度相关［14］。在正常人群中CD4+/CD8+比值为0.7～2.8，当<0.20 时，HPV 感染者机会性感染率会明显增高，且随病情进展同时发生多种机会性感染的风险会大大增高［15］。本研究中，与正常孕妇相比，HPV 组孕妇CD4+、CD4+CD8+均降低，CD8+明显增高，与上述文献报道相符。说明HPV 感染孕妇的免疫平衡遭到破坏，容易出现免疫紊乱情况。

由于妊娠期生殖系统功能的特殊性，导致生殖道HPV 感染不仅会对母体造成影响，还可能通过垂直传播的方式造成胎儿及新生儿感染，进而诱发不良妊娠结局［16⁃17］。符剑花等［18］发现，HPV感染孕妇不良妊娠结局发生率为25%左右。本研究略低于上述报道，推测可能与纳入样本量、孕妇自身差异等因素有关。进一步logistic 回归模型分析发现，T 细胞淋巴亚群CD4+、CD8+、CD4+CD8+是导致HPV 感染孕妇发生不良妊娠结局的危险因素。推测其原因可能是由于相关蛋白酶释放失衡、免疫系统功能紊乱导致细胞外基质降解，破坏宫颈完整性，导致其软化并扩张，发生胎膜早破、早产等，且免疫平衡的破坏对妊娠的建立及维持均有不利影响［19⁃20］。ROC曲线分析结果显示，CD4+、CD8+、CD4+CD8+均可有效预测HPV 感染孕妇母婴结局，且联合检测预测效能更佳。

综上所述，妊娠期HPV 感染孕妇CD4+、CD8+、CD4+CD8+水平存在异常表达，免疫功能紊乱，三者可作为预测HPV 感染孕妇母婴结局的辅助指标。