重庆地区健康成人血清铁蛋白参考区间的建立

李德涛 侯玉磊

血清铁蛋白是机体内一种贮存铁的可溶组织蛋白,作为铁的贮存形式,其在血清中的浓度与体内贮存的铁呈正比,可用于监测体内铁代谢［1］。血清铁蛋白在急性髓性白血病中会上升,随着病情的好转而降低［2］。妊娠期糖尿病患者一般血清铁蛋白会升高［3］。有分析表明血清铁蛋白水平同糖尿病患者急性冠状动脉综合征的冠脉病变程度相关［4］,另外,铁蛋白在乳腺癌、食管癌和肺癌等肿瘤疾病中出现不同程度的升高,且与其他肿瘤标志物联合检测,可大大提高肿瘤的检出率,可以作为肿瘤疗效的评估指标［5-7］。目前,国内临床将血清铁蛋白用于预测机体内铁含量和恶性肿瘤的实验室诊断,但大部分实验室的血清铁蛋白仍采用试剂说明书提供的参考区间,随着生活水平的改善,健康成人血清铁蛋白的浓度亦有可能会发生改变,经调查本院2016 年下半年2843 例健康体检者血清铁蛋白浓度在参考区间以外的比例为22%,因此,若医生将血清铁蛋白应用于肿瘤的诊断中容易误诊,进而造成患者恐慌。因此,作者希望通过研究重庆地区健康人群血清铁蛋白水平,期望建立基于罗氏Cobas e602 检测系统的适合本地区、本人群的血清铁蛋白参考区间。

1 资料与方法

1.1 一般资料 2017 年1～12 月来自重庆医科大学附属第一医院健康体检中心的成年健康体检者2000 例：按照性别分为男性和女性,各1000 例。男性患者年龄22～85 岁,平均年龄45 岁。女性患者年龄19～78 岁,平均年龄42 岁。男性和女性患者的一般资料比较差异无统计学意义(P＞0.05),具有可比性。患者再根据年龄分为18～30 岁、31～40 岁、41～50 岁、51～60 岁、≥61 岁。纳入标准：①1 个月内无急性病感染史；②B 超提示无肝硬化、脂肪肝及其他肝病；③无炎症、感染、肾脏和肺部疾病；④半年内无手术史和输血史；⑤女性不在妊娠期或哺乳期；⑥调查前1 个月内无献血；⑦无肿瘤疾病史。

1.2 研究方法

1.2.1 样本采集 严格按照科室静脉采血操作规程采集空腹静脉血2 ml,室温放置5 min,待血液凝固后,3500 r/min,离心10 min,排除黄疸、溶血、脂血标本,分离血清后待检,8 h 内完成检测。

1.2.2 仪器与试剂 德国罗氏Cobas e602 全自动电化学发光分析仪,铁蛋白检测试剂盒(批号：307544)、校准品(批号：330886)及质控品(批号：237198)均由罗氏公司提供。

1.2.3 质量控制 按照标准操作规程在实验前分别检测罗氏配套低水平和高水平质控,确定质控在控的前提下进行样本测定,本年度Cobas e602 全自动电化学分析仪铁蛋白性能评价的批间平均变异系数分别为2.5%和2.8%,不精密度可接受。同时查阅2017 年卫生部门临检中心铁蛋白室间质评,成绩满意,正确度得到保障。

1.3 统计学方法 使用SPSS13.0 统计软件对数据进行统计分析。按照CLSI C28-A3［8］文件判断离群值并剔除,偏态分布资料参考区间采用百分位数法表示,以非参数排序取P2.5～P97.5作为参考区间,组间比较采用秩和检验。P＜0.01 表示差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 男女两组铁蛋白水平比较 对所有数据进行离群分析,采用Dixon 法剔除离群值,998 例健康成年男性和998 例健康成年女性清铁蛋白测定结果纳入下一步统计分析。对所有数据按性别进行分组统计发现：健康成年男性和健康成年女性血清铁蛋白测定结果均为偏态分布,应当采用百分位数法进行进一步分析(图1,图2)。经秩和检验分析,健康成年男性血清铁蛋白浓度明显高于健康成年女性,差异具有统计学意义［334.50(225.40,488.70)ng/ml VS 79.17(39.88,133.10)ng/ml,P＜0.01］。见图3。

图1 998 例健康男性血清铁蛋白浓度(ng/ml)

图2 998 例健康女性血清铁蛋白浓度(ng/ml)

图3 不同性别血清铁蛋白浓度(ng/ml)

2.2 不同性别健康成年各年龄段血清铁蛋白浓度比较 将同性别血清铁蛋白浓度按年龄分段并同上一年龄段进行比较,≥61 岁健康成年男性的血清铁蛋白浓度低于51～60 岁男性,差异具有统计学意义(P＜0.01)。51～60 岁健康成年女性的血清铁蛋白浓度高于41～50 岁女性,差异具有统计学意义(P＜0.01)。见图4。女性各年龄段的血清铁蛋白浓度均明显低于男性,差异具有统计学意义(P＜0.01)。见表1。

表1 不同性别健康成年各年龄段血清铁蛋白浓度比较［M(P25,P75),ng/ml］

图4 不同性别及年龄段血清铁蛋白浓度(ng/ml)

2.3 建立重庆地区男女血清铁蛋白参考区间 重庆地区健康成年不同性别的血清铁蛋白浓度有差异,相同性别不同年龄段的血清铁蛋白浓度也有差异,所以重庆地区健康成年参考区间应针对不同性别和年龄段来进行设置。将无统计学意义的年龄段进行合并,得出血清铁蛋白不同性别及年龄段参考区间：男性：18～60 岁 为88.93～1139.35 ng/ml,≥61 岁 为34.10～854.42 ng/ml；女性：18～50 岁为6.17～260.73 ng/ml,≥51 岁为30.59～500.45 ng/ml。见表2。

2.4 重庆地区血清铁蛋白参考区间与其他地区血清铁蛋白参考区间比较 统计文献可知,血清铁蛋白在不同地区,不论检测方法是否相同,其参考区间并不一致。见表2。

表2 不同区域的血清铁蛋白参考区间

2.5 参考区间验证 选取2018 年1 月～2019 年3 月在健康体检中心体检的体检人员进行参考区间验证,按照CLSIC28-A3 文件剔除离群值。根据CLSIC28-A3文件,制定判断标准为：男性和女性血清铁蛋白浓度在参考区间以外的人数占总人数的10%以下,认为则验证通过。经验证,本次血清铁蛋白参考区间通过验证。见表3。

表3 2018 年1 月～2019 年3 月健康体检血清铁蛋白参考区间验证

3 讨论

铁蛋白作为人体细胞内最重要的储铁蛋白,主要功能是储存并调节血清铁水平。同时作为一种急性时相反应蛋白,其能够调节造血和免疫系统［12］,血清铁蛋白的降低常与缺铁性贫血相关,由此可见,血清铁蛋白的异常升高或降低都有临床意义。随着经济的发展,人们的生活方式和饮食结构发生了改变,体内血清铁贮存量也有明显的改变。有研究发现很多因素影响血清铁蛋白参考区间的建立,主要包括研究人群(性别、生活习惯和水平等)和检测方法两个方面,另外有研究证实,年龄、运动、饮酒等因素均会影响血清铁蛋白浓度［13,14］。

本次研究显示,女性各年龄段的血清铁蛋白浓度均明显低于男性,差异具有统计学意义(P＜0.01)。根据文献报道,这可能与女性饮食较少,且月经失血有关［15］。男性血清铁蛋白在成年后逐渐增加,在30～60 岁相对稳定,在60 岁后开始下降,这可能与老年人饮食结构改变和铁吸收能力有关。女性50 岁以后血清铁蛋白浓度明显升高,这可能与女性绝经相关。这提示,血清铁蛋白参考区间建立应该根据性别进行划分,并且按年龄段进行统计分析。

参考区间又称正常值范围,是医生判断患者健康与否的重要标准之一,这就要求临床实验室提供正确适用的参考区间,否则会导致误诊、引起患者的恐慌,甚至错误的诊疗。因此建立适合本地区人群的血清铁蛋白参考区间,以给临床医生提供正确可靠的诊断提示就显得至关重要。本次建立重庆地区血清铁蛋白参考区间时发现应当按性别和年龄段进行划分,同其他地区采用相同检测方法或不同检测方法的参考区间也不一致［9-11］,基于电化学检测方法的血清铁蛋白参考区间上限高于基于免疫比浊和化学发光方法的血清铁蛋白参考区间,这可能与血清铁蛋白的检测方法有关,但需要进一步研究；其次可能与不同地区的人群的生活方式以及饮食结构不同有关。本研究也仅是基于罗氏电化学方法的检测,且＞60 岁健康成年男性较少。鉴于血清铁蛋白在肿瘤疾病诊断的重要性,本次调查发现不同检测方法的血清铁蛋白参考范围不一致,对于同一标本,应用不同检测方法可能会出现不一致的结果,这就需要根据实验方法建立相应人群的参考范围,对于重庆地区不同检测方法间的血清铁蛋白比对需要在下一步的工作中进行调查研究。

综上所述,本研究建立了重庆地区以罗氏电化学发光法测定的血清铁蛋白参考区间,初步为临床提供了适用于重庆地区基于电化学检测方法的血清铁蛋白参考区间。