鸡传染性贫血病免疫程序的合理制定与评估

张鹏 张承新 丁斌 王怀娜 包丹丹 赵清华 王雨婷 郭龙宗 李玉燕

摘 要：鸡传染性贫血病（CIA）是危害养禽业发展的重要病毒病之一，是一种免疫抑制性疾病。CIA常会与其他病毒、细菌病共感染，加重疾病进程，从而给养殖业造成巨大经济损失。目前养殖场主要通过疫苗免疫来预防CIA的感染，免疫程序的合理制定与调整评估都是根据鸡群抗体的变化规律来制定。本试验选取2个祖代哈伯德肉种鸡群和2个父母代哈伯德肉种鸡群进行CIA抗体的检测，以期评估CIA免疫程序的合理性。

关键词：鸡传染性贫血病;免疫抑制性疾病;免疫程序;抗体监测

中图分类号：S852.6 文献标识码：B 文章编号：1673-1085（2022）06-0059-03

鸡传染性贫血病（CIA）是一种免疫抑制病，能够对机体的免疫系统造成损害，从而使机体抵抗病原微生物感染的能力下降。育成鸡群发病表现生长迟缓，体重下降明显，免疫抑制造成其它病种免疫失败;若产蛋鸡群在开产初期感染CIA，会导致产蛋率上升慢，而且无产蛋高峰;在高峰期发病则导致产蛋率下降10%～25%，严重影响经济效益，同时种鸡感染引起垂直传播，使其后代雏鸡死亡率增加，导致下游客户养殖难度加大;若商品鸡群感染，引起饲料转化率下降、料肉比增加。最关键的是CIA常与其它病原混合感染，从而发生严重免疫抑制，甚至加重其它病情，增加养殖业对疾病的控制难度。近年来为了应对CIA频发带来的经济损失，加强免疫是重要的手段之一，因此对CIA疫苗免疫效果的评估是必不可少的。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 血清样本采集 本试验选取胶东某养殖集团的2个祖代肉种鸡场和2个父母代肉种鸡场的鸡群，分别在1～10周和13、16、19、26、34、42、52周等不同周龄采集血清，每个周龄各采集40份样品，连续跟踪检测CIA抗体。

1.1.2 种鸡场鸡传染性贫血病免疫程序 50日龄首次免疫鸡传染性贫血病活疫苗，免疫方式为刺种;132日龄加强免疫鸡传染性贫血病冻干活疫苗，免疫方式为将传染性贫血病疫苗加入到新支法关四联油苗，进行肌肉注射。

1.1.3 试验试剂 鸡传染性贫血病病毒ELISA抗体检测试剂盒购自美国IDEXX公司，批号为KT515，有效期为2023年8月3日。

1.1.4 试验仪器 MK3酶标仪（美国ThermoFisher公司）、洗板机（TECAN公司）、移液器、2.5 mL一次性无菌注射器等。

1.2 方法

1.2.1 鸡传染性贫血病抗体检测试验方法和依据 鸡传染性贫血病抗体检测方法为酶联免疫吸附试验（ELISA），检测依据为鸡传染性贫血病诊断技术NY/T 1187-2019。所有试剂使用前需要恢复至室温2 h，血清样本解冻后要充分混匀，标记好孔位和样本信息进行100倍稀释。ELISA具体的试验操作按照《IDEXX鸡传染性贫血病试剂盒说明书》进行。

1.2.2 血清样品的准备 首先制定详细的采血计划，按照计划随机抽样，采集4个鸡群的血清，每周龄采集40只鸡。血清自然析出后，转移至离心管中-20 ℃冻存，血清样本禁止反复冻融。待4个种鸡群的血清全部采集完成后集中检测，以减少因试剂盒批号不同、实验条件差异、操作人员差异而产生误差。

1.2.3 ELISA试验结果判读 试验终止后用酶标仪读取每一份样品的OD650数值，通过公式S/N值=样品OD650/阴性对照平均值和Log10滴度=（S/N-2.72）/-0.64，计算S/N值和滴度值，或通过IDEXX分析软件进行计算。试剂盒判定标准：S/N值≤0.6为阳性，或抗体滴度>999为阳性。

2 结果

2.1 1～8周的血清CIA抗体检测

根据4个种鸡群1～8周的血清CIA抗体检测结果，发现：母源抗体在一周内迅速下降，在14日龄基本完全消失（表1）。

2.2 9～52周的血清CIA抗体检测

根据4个种鸡群9～52周的血清CIA抗体检测结果显示：种鸡群在50日龄首免CIA活疫苗后2周开始产生抗体，免疫后3周抗体可达到理想的水平，从而使种鸡在育成期得到很好的保护;种鸡群在19周加强免疫CIA活疫苗后，可使整个产蛋期的抗体维持较高水平，也给后代雏鸡提供较好的母源抗体保护（表2）。

2.3 结果分析

根据IDEXX的分析数据可知：鸡群CIA抗体在1 000～2 460范围内可以阻止母鸡排毒，降低水平传播的风险;鸡群抗体高于2 460可以阻止垂直传播。

根据各周龄CIA免疫后的抗体检测结果，得出：本试验4个种鸡群的CIA免疫程序及免疫方式比较合理，可以保护种鸡群在育成期和开产前获得高阳性率和高抗体滴度，保护种鸡群不受CIA病毒威胁，同时可提供给后代雏鸡足够的母源抗体。父母代A、B组和祖代A、B组1～52周CIA抗体趋势见图1。

3 讨论

种鸡群CIA免疫的保护性抗体水平、最佳免疫时间以及免疫频率都需要依据抗体变化规律来制定。通过实验室监测免疫鸡群的CAI抗体水平，既可有效地评估不同种类CIA疫苗的免疫效果，也可以评估鸡群的免疫合格率，从而根据免疫效果和免疫合格率选择合适的疫苗、制定合理的免疫程序。有研究表明鸡传染性贫血病病毒抗体从种鸡到后代的传递效率在50%～60%，因此为了保证种鸡在整个产蛋期有足够的抗体传递给后代雏鸡，种鸡群需在开产前获得高抗体滴度和高阳性率，以保证后代雏鸡有足够的母源抗体，这是预防鸡传染性贫血病的关键。根据检测数据表明，种鸡在开产前100%的抗体滴度应在6 500以上;产蛋中期（38～42周）90%的抗体滴度应在6 500以上，10%的抗体滴度应在5 000以上;淘汰前80%抗体滴度应在6 500以上，没有低于2 460的抗体滴度。达到以上抗体滴度水平，种鸡群可不受CIA病毒的威胁，同时可向后代雏鸡提供有效的母源抗体保护。

从表1的检测数据显示：无论是种鸡还是商品鸡，母源抗体在14日龄完全消失，如果此时有CIA病毒攻击鸡群，很容易造成鸡群感染。CIA活疫苗的免疫时间不可早于50日龄，易引起免疫抑制，免疫后产生抗体需要2周的时间。因此，种鸡群在14～64日龄、商品鸡在14日龄到出栏的时间存在免疫空档期，在这段时期除了加强饲养管理、做好生物安全措施外，还应考虑增加一次油苗免疫来提高CIA抗体水平，以防止CIA病毒的感染。

*基金项目：“财政部和农业农村部：国家现代农业产业技术体系资助”（CARS-41）;山东省重点研发计划，项目编号：2021CXGC010805。

作者簡介：张鹏（1980—），女，本科，主要从事规模化种鸡场禽病预防研究，E-mail：zhangpeng80815@163.com;

并列第一作者：张承新（1985—），男，本科，主要从事父母代种鸡场综合管理与研究，E-mail：zcxysgf@163.com。

**通信作者：郭龙宗（1981—），男，硕士，高级兽医师，主要从事规模化种鸡场实验室管理，E-mail：guolongzong1981@163.com;

并列通信作者：李玉燕（1982—），女，硕士，高级兽医师，主要从事规模化养殖场疾病预防研究，E-mail：lyuyan918@163.com。