拟穴青蟹软颗粒饲料的制备与应用

林国文

（福建省闽东水产研究所，福建 宁德 352100）

0 引言

拟穴青蟹(Scylla paramamosain)属甲壳纲，十足目，梭子蟹科，青蟹属，俗称“蟳”、青蟹、蝤蛑、黄甲蟹，主要分布于福建、广东、广西、浙江等沿海地区，其适应环境强、生长速度快、肉质鲜美、营养价值高，兼有滋补强身之功效，是中国海水养殖重要品种[1]。国内的一些科研机构及学者先后对拟穴青蟹的遗传多样性[1]、CYP302al基因的克隆及表达模式分析[2]、人工杂交技术[3]、室内高效人工育苗技术[4]、养殖技术[5]、养殖模式分析[6]、工厂化养殖[7-8]、“蟹公寓”养殖[9-10]开展了系列研究并取得一定成果。随着人们对拟穴青蟹需求的不断提高，对其进行规模化养殖探索就成为一种必然趋势。“蟹公寓”养殖，一蟹一盒避免互相残杀、病害相互感染，自然灾害可控，提高了青蟹养殖成活率，实现了立体式精养，同时工厂化专用育肥、育膏养殖设备的采用，提高了养殖效益，促进拟穴青蟹养殖业的发展。

软颗粒饲料，又称湿颗粒饲料，是以新鲜或冰冻的鲜杂鱼为主，按一定比例加入粉料、特定营养成分和粘合剂，通过搅拌混合，经软颗粒机挤压成型，可直接投喂或冷冻后投喂。其综合了鲜杂鱼等生物饵料和配合饲料的长处，操作灵活、诱食性好、易消化吸收，还可根据不同生长阶段调整营养成分，提高饲料利用率，减少残饵污染水质和病害发生，在大黄鱼[11]、真鲷[12]、军曹鱼[13]养殖中得到较广应用。国内外对拟穴青蟹饲料研发较少且起步较晚，养殖所用的饲料仍以小鱼虾、贝类等鲜料为主，它不易保存，易带致病菌，投喂后易腐烂败坏水质，造成病害流行，不利于拟穴青蟹养殖业可持续发展。目前，相关学者开展了青蟹营养需求及配合饲料研制[14]、锯缘青蟹系列配合饲料饲养[15]、营养需求及健康养殖[16]等研究，人工饵料主要集中在配合饲料，虽然营养成分较均衡，但是配合饲料在水中泡发后容易发生溶散，同时因其诱食性不佳，导致饲料摄食率不高，养殖效果不显著。目前仅见黄伟卿等[17]报道了软颗粒饲料对“红膏蟹”培育生长、存活和营养成分的影响报道。本试验采用“蟹公寓”对大规格拟穴青蟹进行育肥，探究软颗粒饲料对拟穴青蟹的生长、存活以及营养成分的影响，以期为育肥拟穴青蟹软颗粒饲料的制备及应用提供参考。

1 材料与方法

1.1 软颗粒饲料的制备

以70%冰鲜蓝圆鯵肉搅碎作为饲料基础，添加15%鳗粉、3%磷酸二氢钙、2%石花粉、以及10%鱼油，充分搅拌均匀，经软颗粒机挤压固定成型，再经过100℃蒸煮15 min制得软颗粒饲料。

1.2 软颗粒饲料溶散率测定

先称取一份未浸水的饲料，置105℃烘箱内烘干24 h至恒重，计算含水率X。试验共设10个试验组，每组设2个平行，称取M1重量的软颗粒饲料样品放入海水中浸泡，水温为24℃，分别于浸泡1、2、3、4、5、6、7、8、9、10 h后取出饲料，置于105℃烘箱内烘干24 h至恒重M2。饲料溶散率的计算见公式(1)。

式中，S为溶散率，%；X为含水率，%；M1为软颗粒饲料初始质量，g；M2为浸泡特定时间后烘干24 h至恒重的质量，g。

1.3 软颗粒饲料营养成分测定

缢蛏和试验组的软颗粒饲料委托福建省农业科学院农业质量标准与检测技术研究所，测定其粗蛋白、粗脂肪、粗灰分和水分。粗蛋白测定方法采用凯氏定氮法GB/T 6432—2018，粗脂肪测定方法采用GB/T 6433—2006，粗灰分测定方法采用GB/T 6438—2007，水分测定方法采用GB/T 6435—2014。

1.4 拟穴青蟹的来源及试验设计

2018年10月从三都澳海区收购平均体质量为(261.44±24.62)g的海区拟穴青蟹，从中挑选出体格健壮、无病害、无损伤的健康雌蟹，运至宁德市鼎诚水产有限公司青蟹养殖基地。

试验共设1个试验组和1个对照组，每组设3个平行，每个平行10只拟穴青蟹，放置于工厂化养殖设施“蟹公寓”（每个蟹盒规格：长×宽×高=360 mm×260 mm×270 mm）进行养殖，每个养殖盒放养1只拟穴青蟹，试验组投喂软颗粒饲料，对照组投喂鲜活的缢蛏(Sinonovacula constricta)。日投喂饲料两次，投喂时间为6:00和18:00，投喂量为青蟹体质量的8%～10%；养殖用水采用流水方式，养殖条件：pH 7.8～8.2，水温24～28℃，且日温差不超过2℃，盐度18～24，溶解氧＞5 mg/L，氨氮＜0.2 mg/L；每日定时清除死蟹、残饵及排泄物并记录水质变化、活动及摄食等情况。

1.5 拟穴青蟹生长数据计算

养殖45天后，统计存活的拟穴青蟹数量，并用电子天平称重，计算成活率、增重率及特定增长率，见公式(2)～(4)。

式中，n为试验初青蟹数量，只；N为试验末青蟹数量，只；m1为试验初体质量，g；m2为试验末体质量，g；t为养殖时间，d。

1.6 拟穴青蟹营养成分测定

试验结束后，取拟穴青蟹生殖腺和肌肉，每个样品200 g，委托福建省农业科学院农业质量标准与检测技术研究所进行氨基酸和脂肪酸的测定。氨基酸和脂肪酸的测定方法分别采用GB 5009.124—2016和GB 5009.168—2016。

1.7 数据处理

数据统计分析采用SPSS 17.0软件处理，用单因素方差分析对结果进行显著性检验。

2 结果与分析

2.1 软颗粒饲料溶散率及营养组成

软颗粒饲料浸泡于养殖海水中，随着浸泡时间的增加，其饲料溶散率也随之增加。软颗粒饲料在1 h时，溶散率为0.41%，1～7 h溶散率稳步增加，从0.41%增加到13.22%；7～10 h溶散率相对比较稳定，维持在13%～14%之间，10 h溶散率为14.29%（见图1）。

图1 软颗粒饲料随时间变化的溶散率

软颗粒饲料在湿重状态下水分为51.6%，粗蛋白和粗脂肪含量分别为21.8%和0.84%，对照组鲜蛏的水分含量为85.6%，粗蛋白与粗脂肪含量分别为7.41%和0.71%。扣除水分，干重状态下缢蛏的粗蛋白和粗脂肪的含量分别为51.46%和4.93%，高于软颗粒饲料，分别为45.04%和1.74%（见表1）。

表1 不同饲料营养成分表

2.2 软颗粒饲料养殖拟穴青蟹效果

经过45天养殖，试验组成活率、增重率和特定增长率（分别为90.48%、34.62%和0.64%/d）均高于对照组（分别为71.43%、14.38%和0.29%/d）（见表2）。

表2 不同饲料对拟穴青蟹养殖效果的影响

2.3 软颗粒饲料对拟穴青蟹氨基酸和脂肪酸含量的影响

本试验拟穴青蟹共检测出17种氨基酸，包含除色氨酸以外的7种人体必需氨基酸(essential amino acid,EAA)和4种呈味氨基酸(delicious amino acid,DAA)。试验组青蟹肌肉和生殖腺各氨基酸含量均高于对照组（表3）。试验组青蟹氨基酸总量(total amino acid,TAA)、必须氨基酸含量和呈味氨基酸含量（肌肉：分别为9.19%、2.9%和3.96%；生殖腺：分别为6.87%、2.39%和2.63%）高于对照组（肌肉：分别为7.58%、2.53%和3.27%；生殖腺：分别为5.30%、1.80%和2.14%）。必需氨基酸中，均以赖氨酸与亮氨酸含量最高，甲硫氨酸含量最低；呈味氨基酸均以谷氨酸含量最高，天冬氨酸含量次之，苏氨酸含量最低。试验组与对照组青蟹肌肉和生殖腺中EAA/TAA和DAA/TAA比值差异不明显。详见表3。

表3 不同饲料投喂的拟穴青蟹氨基酸含量（鲜样）

拟穴青蟹肌肉和生殖腺的脂肪酸检测结果详见表4。对照组饱和脂肪酸(saturated fatty acids,SFA)含量（肌肉54.0%，生殖腺45.5%）高于试验组（肌肉33.1%，生殖腺33.2%），对照组饱和脂肪酸以C16:0为主，试验组青蟹肌肉以C15:0比例最高；试验组不饱和脂肪酸(unsaturated fatty acids,UFA)肌肉和生殖腺含量分别为55.2%和44.4%，高于对照组，分别为34.3%与35.7%，试验组单不饱和脂肪酸(monounsaturated fatty acid,MUFA)、多不饱和脂肪酸(polyunsaturated fatty acid,PUFA)以及多不饱和脂肪酸中的ω-3系列含量均高于对照组。试验组青蟹的肌肉和生殖腺EPA+DHA含量分别为22.1%和14.1%，高于对照组，分别为8.2%和4.8%。

表4 不同饲料投喂的拟穴青蟹脂肪酸组成

3 讨论

3.1 软颗粒饲料的特点及养殖拟穴青蟹的可行性分析

工厂化养殖拟穴青蟹新模式，需要解决饵料投喂污染水体及影响拟穴青蟹摄食效果等问题，王兴春[18]、林建斌[19]和林旋等[20]的研究结果证实，养殖过程中投喂软颗粒饲料的残饵较投喂杂鱼的为少，投饵后水体中的总氮、总磷和COD也显著小于投喂杂鱼的，起到保护养殖环境、提高养殖成活率的作用。本试验制作的软颗粒饲料养殖拟穴青蟹，其成活率、生长速度和营养评价均优于对照组，说明制作的软颗粒饲料是可行的。

青蟹的摄食方式是依靠触角上的嗅觉找寻食物，用鳌足钳住递交给第三步足，由第三步足传递至大颚至口边，由大颚将食物切断磨碎，最后食物经食道进入胃部的特点，这对软颗粒饲料的大小、形状要求高，本试验配制的软颗粒饲料为直径不小于20 mm圆球，适口性好，且溶散率低，浸泡1 h和10 h时溶散率分别为0.41%与14.29%，低于市场上大黄鱼软颗粒饲料1 h和10 h溶散率（分别为4.64%～5.63%和42.04%～47.74%）[20]，说明本试验制作的软颗粒饲料适口性和稳定性良好。

水产饲料的优劣还在于其诱食性和饲料营养成分的均衡。本试验制作的软颗粒饲料营养成分均衡，蛋白质与脂质主要来源于蓝圆鯵肉、鳗粉和鱼油，同时添加磷酸二氢钙以满足拟穴青蟹对钙的需求，并使用石花粉粘合，质地柔软，诱食性好。通过营养成分测定，发现干重状态下本试验制备的软颗粒饲料粗蛋白与粗脂肪分别约为45.04%和1.74%。与董兰芳等[21]研究的青蟹从溞状幼体5期到成蟹，配合饲料中蛋白质含量为38.0%～45.9%、脂肪含量为6.0%～10.0%能满足其生长结果相似；与王悦等[22]得出的青蟹饲料最适蛋白质和脂肪要求分别为42%～46%和6%～8%这一结论基本一致，与黄莹等[23]研究表明的采用粗蛋白含量41.33%的膨化配合饲料进行拟穴青蟹育肥，成活率达76.6%显著高于天然饲料，结果相同。说明本试验制备的软颗粒饲料可满足拟穴青蟹对蛋白质和粗脂肪的营养需求。

3.2 软颗粒饲料对拟穴青蟹生长和存活的影响

拟穴青蟹养殖过程中，饵料投喂不当，容易造成水质恶化，为病菌的滋生提供环境，引起弧菌病、甲壳溃疡病、霉菌病等细菌和霉菌性疾病的发生，造成养殖拟穴青蟹的大量死亡[24-25]。本试验结果显示试验组的拟穴青蟹成活率和特定增长率分别为90.48%和0.64%/d，高于缢蛏饲养的对照组成活率71.43%和特定增长率0.29%/d。表明试验所用软颗粒饲料可以有效提高拟穴青蟹的成活率和生长性能。相比鲜活饵料，软颗粒饲料在制作过程中，经过高温煮熟杀菌，能更有效的防止病菌感染，从而提高了拟穴青蟹养殖成活率。同时，对比鲜活饵料，软颗粒饲料营养成分更全面，蛋白质含量与脂肪含量配比更合理，且软颗粒饲料易消化吸收，有助于拟穴青蟹吸收利用，所以投喂软颗粒饲料的试验组拟穴青蟹特定增长率显著高于(P＜0.05)对照组。

3.3 软颗粒饲料对拟穴青蟹氨基酸和脂肪酸的影响

蛋白质的营养价值高低主要取决于其所含必需氨基酸的种类、数量和组成比例；呈味氨基酸的高低，也直接决定了食物的鲜美程度和被消费者的接受程度[26]。由于采用盐酸水解蛋白，导致色氨酸被降解，故本试验青蟹共检测出17种常见氨基酸（包含7种EAA和4种DAA），与刘晓等[27]和黄爱霞等[28]检测出17种常见氨基酸结果一致；黄爱霞等[28]研究表明野生拟穴青蟹硬壳蟹呈味氨基酸总量显著低于养殖拟穴青蟹，与本试验结论相同，但必需氨基酸比例野生的显著高于养殖的拟穴青蟹，与本试验得出的结果相反，这可能与其研究的养殖拟穴青蟹来源、养殖方式、养殖饲料等因素有关，有待进一步探讨。总之，试验组拟穴青蟹肌肉和生殖腺EAA和DAA含量（肌肉：2.9%和3.96%；生殖腺：2.39%和2.63%）均高于对照组（肌肉：2.53%和3.27%；生殖腺：1.80%和2.14%），说明软颗粒饲料饲喂的拟穴青蟹营养价值和鲜味优于缢蛏饲喂的拟穴青蟹。

脂肪酸的组成在一定条件下可以反映肌体的健康水平、摄食情况和营养水平[29]。饱和脂肪酸SFA摄入量过高会导致胆固醇升高，继发引起动脉管腔狭窄，形成动脉粥样硬化，增加患冠心病的风险[30]。本试验结果显示软颗粒饲料试验组拟穴青蟹肌肉和生殖腺中饱和脂肪酸SFA含量（肌肉：33.1%；生殖腺：37.2%）均低于对照组（肌肉：54.0%；生殖腺：45.5%），说明软颗粒饲喂的拟穴青蟹更有利于人体健康。研究表明不饱和脂肪酸中的MUFA有降低胆固醇的作用，而PUFA是维持细胞膜结构和机能完整性的重要成分，对于多种疾病具有较好的免疫调节作用[31–32]。PUFA主要分为ω-3系列和ω-6系列，ω-3系列又以EPA和DHA为主，具有抗炎症、抗血栓形成、降低心脑血管等疾病，同时对婴幼儿脑部发育起到极其重要的作用，本试验试验组拟穴青蟹的MUFA、EPA+DHA含量（肌肉：18.5%和22.1%；生殖腺：20.5%和14.1%）均比相应对照组高（肌肉：15.4%和8.2%；生殖腺：17.7%和4.8%），说明本试验所制作的软颗粒饲料较缢蛏更优，具有改善拟穴青蟹脂肪酸品质的效果。

4 结论

本试验制作的软颗粒饲料，无论在诱食性、稳定性，还是在饲养成活率和特定生长率上均有显著优势。饲喂软颗粒饲料的拟穴青蟹在总氨基酸、必需氨基酸和呈味氨基酸含量上均高于鲜料投喂的对照组，不仅如此，投喂软颗粒饲料组的拟穴青蟹在不饱和脂肪酸含量上也显著高于对照组，说明本试验所制作的软颗粒饲料可以有效代替鲜料，为拟穴青蟹软颗粒饲料的研发提供了参考。