柊叶对急性酒精中毒小鼠解酒作用的研究

卢海啸. 黄青艳. 曹小华. 潘珍燕. 姚水莲. 莫小节

【关键词】柊叶;急性酒精中毒;解酒

中国具有悠久历史的酒文化，在如今社会经济快速发展的时代，因为应酬、婚宴、庆祝、节日等喝酒更是必不可少[1]。而过量饮酒可引起急性、慢性酒精中毒，给身体带来很多的危害。如：增加心脏负担、破坏肝细胞结构、引起消化系统、心血管系统以及神经系统在内等多个组织器官的病变和损伤，导致人体出现头昏、恶心、呕吐、动作迟缓、记忆力减退、昏迷等症状，严重时可导致死亡[2-4]。目前社会，因为社交，饮酒的人越来越多，解酒随着人们生活水平的提高，人们对健康也愈发重视。因此，人们对一种可以有效解酒的产品充满期待。

柊叶又名粽叶、粽粑叶，为竹芋科柊叶属草本植物，广泛分布于中国广东、广西、云南等地。柊叶不仅可用于加工民族传统食品——粽叶，其根、茎、叶、花还具有药用及解酒价值。据《中国民族药志要》[5]记载，柊叶的民族用药情况为仫佬药：根茎用于醒酒;瑶药：根茎治酒精中毒、风湿骨痛、腰痛;壮药：叶用于解酒毒，花用于治月经过多，失音。据《中国中药资源志要》记载，柊叶全草性味甘、淡、微寒;具有清热解毒、凉血止血、利尿的功效;根状茎可治肝肿大、痢疾、尿赤;叶清热解毒，治音哑、喉痛、口腔溃疡，醒酒等[6-7]。目前，柊叶仅用于粽子的加工，资源开发利用单一，综合利用率不高[8]。因此，本研究通过探讨柊叶的解酒作用，为柊叶的进一步开发利用奠定基础。

本研究通过建立动物模型，观察各组小鼠醉酒行为学指标，采用气相色谱法测定各组小鼠血清中乙醇浓度，进一步分析比较柊叶根、叶、花提取物的解酒效果，寻找柊叶最佳解酒部位，为能够开发全方位解酒毒且安全无毒副作用的解酒产品奠定基础。

1 材料

1.1 实验动物

清洁级KM雄性小鼠50只（SPF级），体重25～45 g、7～8 周龄，购于广西医科大学实验动物中心。生产许可号：SCXK（桂）2014-0002。

1.2 药物和试剂

柊叶Phrynium capitayum willd 于2019 年5 月采于广西灵山县那隆镇路司铺村，经玉林师范学院卢海啸教授鉴定为竹芋科柊叶属植物。阳性对照药海王金樽片（深圳市海王健康科技有限公司，批号20200601）;56度二锅头（北京红星二锅头有限公司）;0.9%氯化注射液（广西裕源药业有限公司，批号P19121302），无水乙醇（分析纯，成都市科隆化学品有限公司）。

1.3 主要仪器

旋转蒸发（上海亚荣生化仪器厂，RE-2000A）;循环水式真空泵（上海亚荣生化仪器厂，YR-PTB）;电子分析天平（奥豪斯仪器有限公司，AR224CN）;气相色谱仪（岛津公司，岛津GC-2030）;离心机（德国eppendorf 艾本德公司，5424R）。

2 方法

2.1 叶提取物的制备

称取柊叶叶、柊叶花、柊叶根原材料粉末各100 g，加入250 mL的蒸馏水热回流提取3 h，得柊叶叶、柊叶花、柊叶根提取液，重复三次，合并提取液，减压浓缩至浸膏，得到柊叶叶、柊叶花、柊叶根提取物。

2.2 急性酒精中毒小鼠模型的建立

小白鼠试验前，饲养7 d后禁食12 h。取小白鼠50只，分成模型对照组、阳性药对照组、柊叶叶组、柊叶花组、柊叶根组，每组10 只。灌胃给药后30 min后按0.1 mL/0.01 kg 再灌胃56 度二锅头酒。给药剂量：模型对照组0.1 mL/0.01 kg 0.9%生理盐水;阳性药对照组200 mg/kg 海王金樽;柊叶叶实验组200 mg/kg 柊叶叶提取物;柊叶花实验组200 mg/kg柊叶花提取物;柊叶根实验组200 mg/kg 柊叶根提取物。

2.3 小白鼠醉酒醒酒判断

观察小鼠活动情况，以小白鼠爬行不稳、后腹拖地、闭眼懒动为睡眠（ 醉酒） 指标，以行动自如、四肢灵活、精神恢复为苏醒（ 醒酒） 指标，记录各组小白鼠醉酒时间和醒酒时间，计算醉酒持续时间（ min，从醉酒到醒酒的时间）。

2.4 血液乙醇浓度的测定

取小白鼠50 只，分成模型对照组、阳性药对照组、柊叶叶组、柊叶花组、柊叶根组，每组10 只，小白鼠禁食不禁水12 h后。模型对照组：每只小白鼠按0.1 mL/0.01 kg（200 mg/kg）灌胃生理盐水，30 min后按0.1 mL/10 g再灌胃56度二锅头酒;海王金樽对照组、柊叶叶实验组、柊叶花实验组、柊叶根实验组：每只小白鼠按200 mg/kg灌胃柊叶提取物，30 min后按0.1 mL/10 g再灌胃56 度二锅头酒;30 min后摘除眼球取血，静置2 h，置离心机中3000 r/min离心10 min[9-12] ，气相色谱分析小白鼠血清中乙醇浓度。

2.5 统计学处理数据

所有数据均以（x—± s）表示，采用SPSS 19.0 软件进行统计分析，根据研究目的和數据类型采用单因素方差分析。

3 结果

3.1 各组小白鼠醉酒持续时间比较

与模型组小白鼠的醉酒持续时间相比，阳性对照组、柊叶叶组、柊叶花组、柊叶根组小白鼠的醉酒持续时间明显缩短，且柊叶花组、柊叶根组小白鼠的醉酒持续时间比阳性对照组小鼠的醉酒持续时间短。由此可见，柊叶能显著缩短小白鼠醉酒时长，醒酒效果明显。详见表1。

3.2 乙醇标椎曲线的建立

以乙醇峰面积为横坐标，以乙醇不同浓度含量为纵坐标，建立标椎曲线，计算得回归方程为，Y=3E-0.9×（R2=0.9999），结果显示乙醇在浓度含量在0%～50% 范围内呈良好的线性关系。

3.3 叶血清乙醇含量测定

与模型组小白鼠的血清乙醇含量相比，柊叶叶组、柊叶花组、柊叶根组小白鼠的血清乙醇含量显著降低，且柊叶叶组、柊叶花组、柊叶根组小白鼠的血清乙醇含量比阳性对照组小白鼠的血清乙醇含量低。其中，柊叶根、柊叶花的解酒效果最为显著。由此可见，柊叶能显著降低小白鼠血清乙醇含量，针对急性酒精中毒小白鼠的解酒效果明显。详见表2。

4 讨论

柊叶在中国产于南部及西南部，为广西传统民族食品和特色药材，在壮、瑶、仫佬族中常用于解酒毒。本研究通过建立小鼠急性酒精中毒模型[13-16]，采用气相色谱法测定各组小鼠血清中乙醇浓度，探讨柊叶的解酒效果，提高柊叶综合利用率。

据研究报道表明，枳椇子提取物、赶黄草的主要化学成分黄酮类能够促进乙醇代谢而降低小鼠灌酒后血清中乙醇浓度。葛根可通过影响白介素-6和抑制一氧化氮蛋白表达，来抑制酒精代谢产生的炎症变化。在人体细胞实验中，人们发现葛花茶中皂角苷类化合物有强大的保肝作用。姜黄中的姜黄素可通过减轻肝脏氧化应激和抑制内质网应激介导的炎症反应来降低酒精造成的肝损伤。山药多糖 [17]可通过促进乙醇代谢和脂质过氧化等多种途径产生肝细胞保护作用。玉郎伞多糖可降低肝脏中谷草转氨酶（AST）、谷丙转酶（ALT），提高乙醇脱氢酶（ADH）、超氧化物歧化酶（SOD）的活性从而达到加快乙醇分解的目的[18]。藤茶中主要成分为黄酮类的二氢杨梅素，二氢杨梅素的解酒护肝功效可通过抑制四氢化碳所致AST、ALT活性升高以及降低血清胆红素。

本研究结果发现，柊叶叶提取物、柊叶花提取物、柊叶根提取物可明显缩短小鼠的醉酒持续时间并有效降低小鼠的血清中乙醇浓度。由此可见，柊叶可显著缩短小鼠醉酒时长，降低小鼠血清乙醇浓度，解酒效果明显。其中，柊叶花组、柊叶根组解酒效果尤为明显。本研究初步证实，柊叶具有显著的解酒效果，柊叶最佳的解酒部位为柊叶花、根。本研究为柊叶解酒效果提供科学依据，奠定了相关解酒保健食品的研发基础。D800C85F-75EC-4D29-9045-8A2DF618967F