喉三针对阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征患者血清miR-233表达的影响

魏妍荣,岳俊楠

(新疆医科大学附属中医医院,乌鲁木齐 830000)

阻塞性睡眠暂停呼吸暂停低通气(obstructive sleep apnea-hypopnea, OSAHS)患者越来越多,占成年人口的 4%～8%,其特征是睡眠期间上呼吸道完全或部分塌陷,导致间歇性缺氧和被动从睡眠中唤醒,以重新建立呼吸道通畅性[1]。OSAHS的严重程度主要通过呼吸暂停低通气指数来衡量[2]。长期患有 OSAHS的人可能会导致多个器官和系统受损,并且与代谢综合征相关的疾病(例如高血压、2型糖尿病和高脂血症)密切相关[3]。本病目前西医治疗多以无创呼吸机持续气道通气及手术治疗为主[4-5]。近年来,通过中药方剂[6-8]、针刺治疗[9-10]等中医疗法在改善 OSAHS患者临床症状上取得不错的临床疗效。本研究采用针刺喉三针治疗OSAHS患者,并观察其对血清miR-233表达的影响。

1 临床资料

1.1 一般资料

纳入2017年9月至2020年9月于新疆医科大学附属中医医院就诊的OSAHS患者98例,按照随机数字表法分为对照组和治疗组,每组49例。两组各有1例脱落,最终纳入的对照组48例和治疗组48例。对照组中男25例,女23例;年龄35～64岁,平均(49±7)岁;病程 4～10年,平均(6.58±1.83)年;身体质量指数(body mass index, BMI)为 23.78～33.61 kg/m2,平均(27.24±3.12)kg/m2;轻度14例,中度27例,重度7例。治疗组中男 24例,女 24例;年龄 35～65岁,平均(50±8)岁;病程 5～10 年,平均(6.85±1.47)年;BMI为 23.92～34.15 kg/m2,平均(26.97±3.44)kg/m2;轻度11例,中度31例,重度6例。两组一般资料比较,差异均无统计学意义(P＞0.05),具有可比性。本研究经新疆医科大学附属中医医院伦理委员会批准(伦理批号2021XE0162-1)。

1.2 诊断标准

西医诊断标准参照《阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征诊治指南(2011年修订版)》[11]中的相关标准制定。中医证型诊断标准参照《鼾症中医诊疗专家共识意见》[12]中痰瘀互结证的相关标准制定。睡眠中出现鼾声伴有气息堵塞不畅,严重者伴有呼吸停止,面色晦暗且咽中有堵塞感,舌体多胖大,舌苔白腻伴有瘀点,脉多濡滑。

1.3 纳入标准

①符合上述诊断标准;②入组前未接受其他外治治疗;③患者签署知情同意书。

1.4 排除标准

①严重心、肝、肾功能不全者;②有其他呼吸系统疾病如呼吸衰竭、呼吸道梗阻等者;③有恶性肿瘤及其严重并发症者;④有精神障碍或智力障碍者;⑤呼吸道存在解剖结构异常者。

1.5 脱落与剔除标准

①因自身因素主动退出治疗者;②出现严重晕针等不良反应者。

2 治疗方法

2.1 对照组

采用西医常规治疗。对患者进行宣教,戒烟酒,积极锻炼减轻体质量,改变睡眠体位,禁止使用镇静类药物并纠正引发 OSAHS的基础病;予持续气道正压通气治疗,选用S10 Autoset无创呼吸机(澳大利亚瑞思迈牌),根据患者耐受情况在4～20 cmH2O调整压力,调整范围以0.2 cmH2O进行调整,使患者的血氧饱和度维持在90%以上,每晚维持7 h。共治疗3个月。

2.2 治疗组

在对照组西医常规治疗基础上予喉三针针刺治疗。主穴取喉三针(廉泉、上廉泉和旁廉泉穴);配穴取哑门、丰隆(双)、阴陵泉(双)、列缺(双)、照海(双)、血海(双)、天枢(双)和中脘穴。用0.25 mm×25 mm针灸针,穴位局部皮肤常规消毒,廉泉、上廉泉及旁廉泉穴向舌根方向斜刺约 15～20 mm,针感扩散到舌根部,哑门穴向下颌和喉咙方向斜刺 15 mm,针感扩散到喉部,丰隆、阴陵泉、血海、天枢、中脘直刺20 mm,照海直刺15 mm,列缺平刺10 mm。所有穴位行提插泻法,以局部酸麻胀感为宜,留针 30 min。每日治疗 1次,每周治疗 5 d,共治疗3个月。

3 治疗效果

3.1 观察指标

3.1.1 多导睡眠监测(polysomnography, PSG)指标

包括呼吸暂停低通气指数(apnea-hypopnea index, AHI)、呼吸暂停指数(apnea index, AI),低通气指数(hypopnea index, HI)。

3.1.2 血清miR-233水平、炎性因子水平、氧化应激指标和血管内皮功能相关指标的水平

治疗前后分别采集患者清晨空腹静脉血10 mL,以3 000 r/min的速度离心15 min,留取血清待测。用酶联免疫吸附法测定炎性因子指标[肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor, TNF)-α和白细胞介素(interleukin, IL)-8]、氧化应激指标[超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD]和血管内皮功能指标[血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)]水平,用硝酸还原法测定血管内皮功能指标[一氧化氮(NO)]水平,用荧光定量聚合酶链反应检测血清miR-223表达水平。

3.2 统计学方法

采用SPSS26.0统计软件进行数据处理分析。符合正态分布的计量资料以均数±标准差表示,组间比较用独立样本t检验,组内比较采用配对样本t检验;不符合正态分布的计量资料比较采用非参数秩和检验。以P＜0.05表示差异有统计学意义。

3.3 治疗结果

3.3.1 两组治疗前后PSG指标比较

治疗前,两组 PSG指标比较,差异无统计学意义(P＞0.05)。治疗后,两组PSG指标较同组治疗前均显著降低(P＜0.05);且治疗组治疗后PSG指标低于对照组(P＜0.05)。详见表1。

表1 两组治疗前后PSG指标比较 (x ±s,次/h)

3.3.2 两组治疗前后血清miR-233表达水平比较

治疗前,两组血清miR-233表达水平比较,差异无统计学意义(P＞0.05)。治疗后,两组血清miR-233表达水平均较同组治疗前升高(P＜0.05),且治疗组高于对照组(P＜0.05)。详见表2。

表2 两组治疗前后血清miR-233表达水平比较 (±s)

表2 两组治疗前后血清miR-233表达水平比较 (±s)

注:与同组治疗前比较1)P＜0.05;与对照组比较2)P＜0.05

组别 例数 时间 miR-233相对表达量治疗后 1.67±0.521)2)对照组 48 治疗前 0.46±0.13治疗组 48 治疗前 0.42±0.17治疗后 0.88±0.291)

3.3.3 两组治疗前后氧化应激及血管内皮功能水平比较

治疗前,两组血清SOD、NO、VEGF水平比较,差异无统计学意义(P＞0.05)。与治疗前比较,两组治疗后血清SOD、NO、VEGF水平明显升高(P＜0.05),且治疗组治疗后优于对照组(P＜0.05)。详见表3。

表3 两组治疗前后氧化应激及血管内皮功能水平比较 (±s)

表3 两组治疗前后氧化应激及血管内皮功能水平比较 (±s)

注:与同组治疗前比较1)P＜0.05;与对照组比较2)P＜0.05

组别 例数 时间 SOD(µmol/mL) NO(µmol/L) VEFG(pg/mL)治疗组 48 治疗前 98.72±9.42 62.93±11.78 279.37±38.39治疗后 124.58±13.661)2) 94.69±14.231)2) 473.04±31.541)2)对照组 48 治疗前 99.15±10.41 63.27±11.43 282.44±36.58治疗后 111.92±12.751) 83.87±14.781) 407.59±29.461)

3.3.4 两组治疗前后炎性因子水平比较

治疗前,两组血清炎性因子比较,差异无统计学意义(P＞0.05)。治疗后,两组血清炎性因子水平明显降低(P＜0.05),治疗组低于对照组(P＜0.05)。详见表4。

表4 两组治疗前后血清炎性因子水平比较(±s, ng/L)

表4 两组治疗前后血清炎性因子水平比较(±s, ng/L)

注:与同组治疗前比较1)P＜0.05;与对照组比较2)P＜0.05

组别 例数 时间 IL-8 TNF-α治疗组 48 治疗前 7.84±2.45 57.47±7.98治疗后 3.79±1.821)2) 29.69±5.871)2)对照组 48 治疗前 7.92±2.33 59.81±7.39治疗后 5.84±1.761) 38.44±5.691)

4 讨论

阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)被认为是容易诱发多疾病的独立危险因素,其潜在发病机制与血管内皮功能损伤,血压和压力反射敏感性增加,炎症反应增加,脑血流减少引发缺氧反应以及脑自动调节受损有关[13]。OSAHS患者因气道受阻最易诱发缺氧状态,长期间断性缺氧状态会引发机体出现氧化应激反应,体内氧化与抗氧化反应失衡,引发中性粒细胞浸润进而产生炎症反应,而 SOD是作用于超氧阴离子自由基的专一歧化反应催化剂,有较强的抗氧化反应,可抑制炎症反应的发生[14]。OSAHS患者不及时治疗,引发长期氧化应激与炎症反应,导致血管内皮功能受损,NO可引发血管平滑肌的松弛,增加回脑血流量,改善机体的缺氧状态,同时可修复血管内皮保持血管弹性[15],VEGF作为内皮细胞生长因子,可以增加血管通透性,促进血管内皮增生,促进血管再生[16]。本研究结果发现,针刺可改善 OSAHS患者氧化应激状态,提高SOD活性,降低炎症反应,恢复血管内皮功能。

多导睡眠检测最为主要的指标为AI、HI和AHI。AI代表每小时睡眠呼吸暂停的次数,HI则为每小时低通气量次数,AHI是AI与HI的总和,在睡眠呼吸暂停综合征的诊断中起到重要作用。AHI指数越低则病越轻。本研究结果显示,在西医常规治疗基础上联合喉三针针刺治疗可显著降低患者的AI、HI、AHI指数。

miR-223是一种抗血管生成和缺氧相关的miRNA,靶向影响血管重塑和缺氧诱导的 PH的多种成分。miR-223的表达升高抑制了牵张应力增强的增殖,并阻止了血管平滑肌细胞中胰岛素样生长因子1受体功能和下游 PI3K-AKT信号的激活,进一步降低 IL-8、TNF-α炎症因子,促进VEGF表达[17]。miR-223在OSAHS患者中表达上调以直接抑制聚合酶-1(PARP-1),改善炎症及氧化应激反应,miR-223表达的上调可能促进细胞增殖与凋亡过程,减轻炎症反应[18]。研究[19-20]发现,miR-233可通过抑制LRP3等多个信号通路活性,参与 OSAHS炎性疾病的发生和进展,OSAHS的发生与miR-223水平的降低密切相关。加强miR-223表达可下调 Irak1等信号通路,进一步减轻巨噬细胞的炎症反应[21]。本研究结果显示,针刺治疗可显著提高患者血清miR-233表达水平,进一步减轻机体炎症反应。

中医学认为本病病位在咽喉,因痰瘀互结引发气道不利,故针刺选穴以咽喉局部取穴为主,遵循循经取穴、对症取穴的原则进行治疗。咽喉处取穴以廉泉、上廉泉及旁廉泉的喉三针为主,解剖位置处于舌下神经分支,通过针刺可通利咽喉、通达气机、减轻症状,同时针刺舌下神经可支配颏舌肌收缩完成舌外伸动作,可开放气道,减轻缺氧状态。脾经连舌本、散舌下,肾经连咽喉、夹舌本,选取脾经的阴陵泉和血海穴及肾经的照海穴,发挥循经取穴的作用。依据对症取穴原则,取天枢、中脘可健脾化湿,加之丰隆可祛痰湿。列缺穴为治疗头项诸疾的要穴,可调畅气机。周洪波等[22]通过针刺廉泉、迎香等可改善患者的夜间氧饱和度及呼吸低通气指数,改善患者睡眠情况。余平波等[23]通过针药并用治疗 OSAHS,选穴以迎香、印堂、廉泉为主,可改善患者的夜间氧饱和度及AHI指数,疗效显著。梁瑞珑等[24]研究针刺对 OSAHS患者睡眠呼吸的调节作用,发现针刺廉泉、风府等穴位可改善多导睡眠检测指标,减轻鼾声及嗜睡症状,提高睡眠质量及生存质量。本研究结果发现,通过针刺喉三针治疗可降低呼吸暂停低通气指数、呼吸低通气指数及呼吸暂停指数,疗效显著;其作用机制可能与增加血清 miR-233表达,降低炎症反应,进一步改善氧化应激及血管内皮功能有关。

综上,在西医常规治疗基础上,喉三针可有效改善阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征患者的睡眠质量,可能与提高血清miR-233表达,改善氧化应激状态,降低炎症反应,进而恢复血管内皮功能有关。