猪瘟免疫效果试验

李建中

(海盐县西塘桥街道农业农村办公室，浙江 海盐 314305)

猪瘟(Classical swine fever, CSF)，是由猪瘟病毒(Classical swine fever virus, CSFV)引起猪的一种以高热稽留、出血、梗死、坏死和高死亡率为主要特征的高度接触性传染病[1]，是国家现有强制免疫病种。因地制宜，制定生猪免疫程序，并定期进行免疫抗体监测，及时了解本地的CSF免疫情况，提高猪瘟抗体免疫合格率，是职责所在，为此，开展了猪瘟免疫效果试验。

1 试验仪器与材料

1.1试验动物 海盐县饲养管理水平较好的10个规模化养殖场(户)，存栏数均大于500头，每个场点选择30日龄左右断奶仔猪30头，共计300头。

1.2试验疫苗 猪瘟疫苗均为政府采购组织苗，分别由齐鲁动保、中牧实业、杭州荐量三家公司生产。疫苗生产批号依次为： 11090116-1、 1202007和1110107。

1.3试验试剂 猪瘟正向间接血凝试验抗原、猪瘟阴性对照血清、猪瘟阳性对照血清及猪瘟正向间接血凝试验稀释液均为中国农业科学院兰州兽医研究所生产，抗原两个批次批号为：20120516和20120728。

2 试验方法及过程

2.1实验动物分组 将10个场点的300头猪按照场点分为10个小组，每个场点随机选取一头生猪血样送检，猪瘟抗原均呈阴性。10个场点分别编号为A、B、C、D、E、F、G、H、I和J共10个小组。每个小组又分为Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组试验组和对照组，试验组每组8头猪，对照组每组6头猪。

2.2实验过程

2.2.1首免接种 试验组在30日龄左右(28日龄至35日龄)分别颈部肌肉接种齐鲁动保、中牧实业、杭州荐量三个不同厂家生产的猪瘟组织苗1头份/头，对照组均接种灭菌注射用水1 mL/头。接种过程由助手保定，尽量减少仔猪因追赶和固定产生应激。接种后1～2 d观察试验组和对照组仔猪精神状况，注射部位有无肿胀，采食量和饮水量有无增减，是否有体温变化，有无肌肉震颤、可视黏膜充血、呕吐、鼻孔出血等不良反应。

2.2.2血清抗体检测 首免28 d后前腔静脉采集所有试验组和对照组猪血样，分离血清，根据农业部《猪瘟诊断技术规程》(NY/SY156-2000)进行猪瘟抗体检测，结果判定参考农业部《2012年国家动物疫病监测计划》(农医发〔2012〕2号)。

根据农业部相关文件要求，接种猪瘟疫苗的猪群免疫抗体效价达到1∶32(25)凝集判为合格。

2.2.3二免接种 首免28 d后，在采集血样的同时进行二次免疫接种，接种方法同首免，试验组猪瘟疫苗接种剂量为2头份/头，对照组灭菌生理盐水接种剂量仍然为1 mL/头，接种后1～2 d观察精神状况、体温变化等。

2.2.4二免血清抗体检测 待二免结束后28 d开始采集血样，分离血清，并进行血清抗体检测，方法及判定依据等同2.2.2。

3 试验结果

3.1首免应激 首次免疫后1～2天试验组和对照组大多数整体精神状况良好，无拉稀症状，采食量和饮水量无明显变化，呼吸正常，无可视粘膜充血、呕吐等现象，体重变化不明显，没有应激死亡现象。试验组两个试验场点的6头出现注射部位肿胀，约占试验组总数的2.50%，且为不同厂家的疫苗；出现体温一过性升高的约占体温测量统计数量20头的10%；试验组和对照组均有两个场点出现扎堆现象；对照组有2头注射部位有轻微肿胀，约占对照组3.33%。

3.2首免抗体检测结果 详见表1和图1。由表1可见，首次免疫后试验组10个场点的240份三个厂家疫苗的抗体整体合格率分别为41.25%、38.75%和40.00%，仅有1个场点的1个厂家的疫苗抗体合格率达到了70%(国家规定标准为70%以上为合格)以上，其余均低于70%，试验组10个场点抗体总合格率为40%。据图1可见，抗体效价大多分布于1∶8～1∶128之间，占试验组总数73%以上。三个厂家均有抗体效价达到1∶512的血清样品，抗体效价均无达到1∶1024及以上样品。对照组没有1份血样抗体合格，其中抗体效价最高的为1∶16且只有6份，约占对照组的10%。

表1 首次免疫后试验组和对照组猪瘟抗体检测合格率

3.3二免应激 二免后1～2 d试验组和对照组均无明显变化，但是70日龄后试验组和对照组均出现死亡现象，其中试验组1头，对照组2头(为1个场点)。死亡多以拉稀和呼吸道疾病为主，剖检发现，试验组死亡猪呈现肺脏病变，肺脏出血肿大，且伴有肺间质增宽，一侧肺间质充满胶冻样物质，可以排除猪瘟感染；对照组2头均为拉稀导致脱水而死亡，经检测PEDV和TGEV均呈现阴性，具体原因不祥。其余均无异常现象。

3.4二免抗体检测结果 详见表2和图2。由表2可见，二次免疫后猪瘟抗体整体合格率得到了极大的提升，由40%提高到96.23%，增加了56个百分点以上，且三个厂家的猪瘟疫苗抗体整体合格率均达到95%以上(远高于国家要求的70%标准)。由图2可以看出，通过二次免疫后猪瘟抗体效价明显升高，效价介于1∶32至1∶256的占试验组总数(239头)的近90%，更有甚者抗体效价达到1∶1024及以上。其中效价低于1∶16的共计9份，占试验各组总数的3.77%。对照组58份样品抗体合格率为零，且效价均小于1∶8。

表2 二免后试验组和对照组猪瘟抗体检测合格率

4 结果分析

根据上述试验结果，可以发现猪只首免后只有极少数抗体合格，绝大多数抗体效价偏低，很难有保护力，存在发生猪瘟疫病的风险，不利于猪瘟疫病防控。而经过二次免疫后抗体整体保护力得到极大的提升，达到有效防控猪瘟的目的。对照组抗体在60日龄时抗体效价均低于1∶32，说明此时猪只完全处于免疫空白期，需要尽快免疫消除潜在隐患。因此，为有效防控猪瘟疫病的发生，商品育肥猪必须通过至少两次猪瘟疫苗免疫接种方能达到有效保护水平。此试验结果与国家动物疫病预防控制中心、疫苗生产厂家等有关机构(单位)数据基本相似，为海盐县猪瘟疫病防控提供了参考。