大球盖菇麦粒菌种制作常见问题及解决对策
2022-06-14徐海娜滑帆狄继革寇凤仙
□文/徐海娜 滑帆 狄继革 寇凤仙
麦粒菌种作为谷粒菌种的一种,具有菌丝生长旺盛、浓密、营养物质丰富,接种简单,接种后发菌速度快等优点。它适合制作多数食用菌菌种培养基,如草菇、双孢菇、白灵菇、灵芝、平菇等。大球盖菇菌种制作技术已经成熟,但仍具有培养时间长、污染率高等的问题。从2020年至今我们连续做了几批麦粒种,现总结一些成功的经验与大家分享。
一、麦粒种制作流程
(一)原料选择
选择成熟的优质麦粒,要求籽粒饱满圆润,无破粒,无虫蛀,无霉变,无发芽,用同一品种小麦,另外需要一定量麦麸、石膏和轻质碳酸钙。
(二)制作过程
1.清洗、浸泡。将麦粒中的杂质、瘪粒等漂洗干净。如有劣质麦粒,在煮制过程中很容易煮烂,接种时就容易感染杂菌。麦粒通过浸泡,可以减少煮沸时间,节约能源,降低成本。冬季麦粒可浸泡20小时,夏季浸泡时加入0.5%的生石灰浸泡6~8小时,浸泡到麦粒无硬芯,避免浸泡过程发酸,隔夜浸泡需及时换水。将浸泡好的麦粒捞出后,用清水冲洗干净。
2.煮麦粒。将麦粒放锅中加水煮,水面距麦粒20厘米左右,加热到沸腾后关小火至微沸状态,煮沸过程中看到水分减少将要露出麦粒时要及时添水,防止烧干锅,最终煮到麦粒内无白芯即可。若经验不足时,宁愿夹生一点,也不要煮过头,以免感染杂菌。
3.拌料。将煮好的麦粒捞出沥干水分,倒在事先消毒干净的水泥地面上,晾凉后加入10%麸皮、0.5%~1%的轻质碳酸钙或石膏,搅拌均匀,pH自然,含水量控制在50%~55%。
4.装瓶。用750毫升耐高温高压聚丙烯瓶,每瓶装干料约200克左右,装至瓶肩,上下松紧一致,擦净瓶口和瓶身残余料,用配套封口盖或封口膜封口,等待灭菌。
5.灭菌、接种。高压灭菌需121℃维持2.5小时,常压灭菌需100℃维持6~8小时。灭菌后趁热把麦粒抖松,防止板结,冷却至25℃以下时在超净工作台上接种,18毫米×180毫米试管母种每支截5段,1段接一瓶麦粒原种,共接5瓶原种,严格无菌操作。
6.培养。接种后放在25℃下暗光培养,3天后开始每天进行检查,如有杂菌污染的瓶子及时挑出处理,不能使用。
7.摇瓶。菌丝长至1厘米后摇瓶一次,增加菌丝生长点,使菌龄一致,缩短菌丝满瓶时间。
8.长满及使用。大球盖菇满瓶时间在25~30天。麦粒种长满瓶后,再培养3~5天使用效果更好。
二、常见问题及解决对策
(一)污染问题
制作过程中个别瓶出现后期长势慢,吐黄水、真菌、细菌污染等情况,可能是由于麦粒蒸煮时间长,麦粒煮破皮爆花,后期培养过程中淀粉渗出造成麦粒黏结成团,菌丝难以长入麦粒内部造成细菌感染。出现绿霉污染可能是由于麦粒有硬芯,灭菌不彻底或者是瓶盖、封口膜质量有问题,瓶外空气进入瓶内带进杂菌污染所致。
(二)麦粒浸泡时间问题
若麦粒浸泡时间短,煮的时间又不足,达不到无白芯的要求,那么可能会导致灭菌不彻底,瓶内上层麦粒失水,含水量不足,接种后影响菌丝的萌发生长甚至出现污染情况。
(三)菌种上层老化问题
制作大球盖菇菌种,在麦粒中加入一定量辅料很重要,防止只用麦粒可能造成的菌丝未长满,上层菌种出现失水老化现象。辅料制作:加入5%~10%木屑或麸皮,目的是填充麦粒之间的空隙。木屑颗粒大小8毫米,应选阔叶树硬杂木,木屑需要提前预湿。麦粒种易老化,不能久存,菌丝长满瓶后应尽快使用,或放4℃储存几天。用隔年陈麦比当年新麦更好些,菌丝吃料快长势旺。
(四)灭菌问题
培养基应用高压灭菌,常压灭菌易产生灭菌不彻底,常会发生隐性污染。高压灭菌空气要排净,防止形成假压力,影响灭菌效果。
摇瓶时不要用力过猛,最好在无菌环境中摇瓶,防止用力过猛空气通过瓶口污染菌种。装麦粒的容器提前清洗,并控干水分,否则在灭菌过程中易蒸烂麦粒。
三、示例
我们2021年10月份选择了生产上常用的5个不同的大球盖菇品种进行麦粒种培养,并做了未摇瓶处理,方便对比。摇瓶麦粒种菌丝长满时间是25~30天,未摇瓶处理满瓶时间较摇瓶的晚6~7天。
图1是培养10天的菌丝长势情况,其中A和C瓶是摇瓶的,B、D、E瓶未摇瓶,B瓶李营1号经培养10天菌丝生长吃料为5厘米。满瓶后及时用于生产。摇瓶和不摇瓶对出菇产量和质量没有影响,但摇瓶可以缩短麦粒种培养周期。
图1 不同大球盖菇品种培养10天的菌丝长势