无托槽隐形矫治患者与固定矫治患者龈沟液中白细胞介素变化的对比研究

骆厚卓 方世殊 刘倩 党薇 王艳丽

1.空军军医大学口腔医院正畸科，西安 710032；2.西安交通大学口腔医院修复科，西安 710004；3.西安市中心医院口腔科，西安 710004

1 材料和方法

1.1 临床资料

选取2019年1月—2020年1月在空军军医大学第三附属医院（口腔医院）正畸科接受无托槽隐形矫治的67 例患者作为观察组（observation group），接受固定矫治的40 例患者作为对照组（control group），收集患者临床资料及龈沟液样本进行研究。选取的患者符合以下标准：1）患者无牙龈肿胀或出血、无牙周袋形成、无牙槽骨吸收、无牙齿松动及移位、无探诊出血等情况；2）患者不存在牙列拥挤或牙列拥挤程度＜4 mm；3）2 个月内未服用抗生素或可能引起牙龈增生的药物；4）接受正畸治疗前未接受过细胞因子治疗；5）接受正畸治疗前血常规检验及凝血功能检验正常；6）未感染过乙型肝炎病毒（hepatitis B virus，HBV）、丙型肝炎病毒（hepatitis C virus，HCV）、艾滋病病毒（human immunodeficiency virus，HIV）、巨细胞病毒（cytomegalovirus，CMV）等，2 个月内未有发热或细菌感染；7）不合并任何形式的肿瘤；8）不合并有严重的心、脑、肺、肝、肾等脏器疾病；9）依从性良好，能按时进行复诊。龈沟液样本由同一医师在患者的第一恒磨牙远中龈沟内采集并冻存以备后续实验。龈沟液的采集不会影响患者正常就诊活动，且该样本仅用于科研用途，患者及家属均知情同意。

1.2 正畸治疗及复诊要求

患者正畸治疗前3 d 进行口腔卫生宣教，指导患者正确使用正畸牙刷、牙线保持口腔卫生，并收集龈沟液样本检测相关IL 水平作为基线资料。记录接受正畸治疗当日的就诊结束时间，并作为起始时间，要求患者分别于治疗后24 h 和12 个月来院复诊检查正畸治疗效果，并于治疗后24 h 和12个月收集龈沟液样本用于相关IL水平检测。

1.3 Luminex液相芯片检测IL

定制检测IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10、IL-16 和IL-18的Luminex Assay Human Premixed Multi-Analyte Kit（R&D systems）试剂盒。在实验滴定板中加入Assay Buffer 预湿，封闭振荡10 min 后充分移除Assay Buffer 并干燥滴定板。在适当孔位滴加样本、标准品及质量控制样本各20 μL，加入20 μL Assay Buffer 等比稀释。加入预混的抗体标记微球并封闭孵育过夜，用Wash Buffer 清洗2 次后加入鞘液充分悬浮微球，在Luminex 200 仪器上进行检测。

1.4 统计学处理

所得数据通过SPSS 23.0 统计软件和Graph Pad Prism 8 软件进行统计学处理、分析及绘图。一般资料采用描述性分析，计量资料用均数±标准差表示。计量资料比较采用独立样本t检验，计数资料采用卡方检验。P＜0.05 表示差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 2组患者正畸治疗前基线资料的比较

2 组患者正畸治疗前基线资料的比较见表1。结果表明，2组患者的年龄、性别、探诊深度及龈沟液中IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10、IL-16、IL-18的表达水平差异均无统计学意义（P＞0.05）。

表1 2组患者正畸治疗前基线资料的比较Tab 1 Comparison of basic characteristic of patients before orthodontics treatment between two groups

2.2 2 组患者正畸治疗24 h 后龈沟液中IL 水平的比较

2 组患者正畸治疗24 h 后龈沟液中IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10、IL-16 和IL-18 表达水平的比较见表2。统计分析结果表明，2 组患者正畸治疗24 h后龈沟液中IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10 和IL-18 表达水平均升高（P＜0.05），IL-16 则均无明显变化（P＞0.05），但所有IL 因子表达水平在2 组间差异均无统计学意义（P＞0.05）。

表2 2 组患者正畸治疗24 h 后龈沟液中IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10、IL-16和IL-18表达水平的比较Tab 2 Comparison of expression levels of IL-1β，IL-6，IL-8，IL-10，IL-16 and IL-18 after 24 hours treatment between two groups pg·mL-1

2.3 2 组患者正畸治疗12 个月后龈沟液中IL 水平的比较

2 组患者正畸治疗12 个月后龈沟液中IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10、IL-16和IL-18表达水平的比较见表3。统计分析结果表明，正畸治疗12 个月后，观察组龈沟液中IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10和IL-18的表达水平低于对照组（P＜0.05），但IL-16 表达水平2组间差异均无统计学意义（P＞0.05）。

表3 2组患者正畸治疗12个月后龈沟液中IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10、IL-16和IL-18表达水平的比较Tab 3 Comparison of expression levels of IL-1β，IL-6，IL-8，IL-10，IL-16 and IL-18 after 12 months treatment between two groups pg·mL-1

3 讨论

在正畸治疗的过程中，往往会伴随有炎症反应的发生，其中IL 作为一类炎症相关因子发挥了重要影响。探究这类细胞因子在正畸治疗后的变化趋势对于了解患者机体状态及免疫功能水平有重要意义。IL 发挥的作用广泛，根据其主要性质分为IL-1、IL-2、趋化因子、IL-10、IL-12以及IL-17 等亚族，其中与免疫激活、炎症相关性较大的有IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10、IL-16 和IL-18。IL-1β 是一种重要的炎症细胞因子，主要由外周血单核细胞和巨噬细胞分泌产生，以往研究[9]表明其与细胞凋亡具有密切联系。在炎症、感染等刺激下往往会诱导IL-1β 水平升高，如在牙周炎患者龈沟液中，IL-1β 的表达水平较健康人会明显升高[10]。IL-6 是一种促炎细胞因子，参与调节多种生理过程，特别是在急性炎症反应和从急性炎症向慢性炎症的转变中起关键作用[11]，也有研究[12]表明，在牙周炎症患者龈沟液中IL-6 水平会有所增加，进而促进生成急性反应期蛋白，加重对牙槽骨的损伤作用。IL-8 是一种淋巴细胞趋化因子，同时可促进中性粒细胞的聚集。作为CD4 的天然可溶性配体，具有促炎症和免疫调节特性，对CD4+T 细胞、单核细胞和嗜酸性粒细胞也具有趋化作用[13]。有研究[14]表明，IL-8可提高氧化物的释放，从而加重口腔局部炎症反应。IL-10 被认为是可以由多种类型的免疫细胞产生的Th2型细胞因子，具有间接抑制Th1 反应的能力。IL-10 可以直接作用于抗原提呈细胞，减少刺激分子的表达，阻止初始T细胞的成熟，或直接作用于T细胞以限制其增殖、功能分化，通过调节T细胞免疫功能进而影响局部或全身炎症水平[5]。IL-18 是一种促炎症、促凋亡和致动脉粥样硬化的细胞因子，属于IL-1 细胞因子家族。有研究[7]认为，IL-18 通过诱导嗜碱性粒细胞和肥大细胞产生IL-4、IL-5等Th2型细胞因子，间接诱导口腔局部炎症的发生，但其具体作用机制仍有待研究。

本研究对67 例无托槽隐形矫治患者和40 例固定矫治患者治疗前及治疗后不同时间节点龈沟液中IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10、IL-16 和IL-18 表达水平进行检测，比较患者接受不同形式正畸治疗前后龈沟液中IL表达水平的差异。研究结果表明，不论哪种矫治方式，IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10 和IL-18 在治疗24 h 后表达水平均显著升高，且组间无统计学差异。这可能是由于在正畸治疗过程中正畸力对牙周组织的影响，进而诱发局限性急性炎症反应。本研究对不同矫治方式患者治疗12 个月后龈沟液中IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10、IL-16 和IL-18 表达水平进行比较，发现无托槽隐形矫治患者龈沟液中IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10 和IL-18 的表达水平更低。结果表明，相比于传统固定矫治，无托槽隐形矫治对患者造成的口腔炎症水平更低，更有利于患者口腔微环境的恢复。

利益冲突声明：作者声明本文无利益冲突。