外周血miR-92a、miR-424、miR-145在食管癌中的表达及意义

徐 孟，肖航宇，张 曜，蒲小兵

食管癌好发于中老年人，大部分患者确诊时已为中晚期，5年生存率≤30%，故尽早确诊非常重要[1]。近年发现微小核糖核酸(miR)表达失调与肿瘤发生发展密切相关[2]。据功能miR可分为抑癌miR及致癌miR，其中miR-92a在结直肠癌等消化道肿瘤中呈致癌效应[3]，miR-424在肝细胞癌、食管鳞癌中也呈致癌效应[4]，miR-145则在结直肠、食管、肺等肿瘤中呈抑癌效应[5]。基于此，本研究分析外周血miR-92a、miR-424、miR-145水平与食管癌发生发展的关系。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2018年1月—2020年12月我院68例食管癌作为食管癌组。纳入标准：经手术病理诊断食管癌；临床病理、实验室等检查资料完整。排除标准：术前行放化疗等抗肿瘤治疗；术中死亡；有恶性肿瘤病史及治疗史；有药物或乙醇滥用史；伴心肾等器官功能障碍；妊娠期妇女。另纳入68例体检健康者作为对照组。2组一般资料比较差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。

1.2研究方法 食管癌组在入院次日清晨抽取空腹外周静脉血4 ml，对照组取体检当日空腹外周静脉血样4 ml；3000 r/min离心5 min，弃上清，加入等体积磷酸盐及淋巴细胞分离液，2000 r/min离心30 min后，取乳白色层与细胞洗涤液混合，12 000 r/min离心5 min，获得沉淀为外周血单个核细胞；加入Trizol提取液抽提总RNA，经试剂盒逆转录，采用荧光定量聚合酶链式反应检测miR-92a、miR-424、miR-145；扩增条件：95 ℃预热10 min，95 ℃变性15 s，60 ℃退火60 s，45个循环，最后72 ℃延伸5 min；利用紫外光凝胶成像系统摄像观察，采用2-ΔΔCt法以目的基因与内参U6比值作为目的基因mRNA相对表达量。

2 结果

2.12组外周血miR-92a、miR-424、miR-145相对表达量 食管癌组外周血miR-92a、miR-424相对表达量显著高于对照组，miR-145相对表达量低于对照组(P<0.01)，见表1。

表1 食管癌患者和体检健康者外周血miR-92a、miR-424、miR-145相对表达量比较

2.2外周血miR-92a、miR-424、miR-145相对表达量对食管癌的诊断价值 ROC曲线分析发现，外周血miR-92a、miR-424、miR-145相对表达量均对食管癌有较高的诊断价值，见表2。

表2 外周血miR-92a、miR-424、miR-145相对表达量对食管癌的诊断价值分析

2.3不同临床病理特征食管癌患者外周血miR-92a、miR-424、miR-145相对表达量 TNM分期Ⅲ期者外周血miR-92a、miR-424相对表达量显著高于Ⅰ～Ⅱ期者，miR-145相对表达量显著低于Ⅰ～Ⅱ期者(P<0.05，P<0.01)；淋巴结转移者外周血miR-92a、miR-424相对表达量显著高于非淋巴结转移者，miR-145相对表达量显著低于非淋巴结转移者(P<0.01)。见表3。

2.4食管癌临床病理特征与外周血miR-92a、miR-424、miR-145相对表达量的相关性 食管癌TNM分期及淋巴结转移与外周血miR-92a、miR-424相对表达量呈正相关(r=0.692、0.511、0.496、0.404，P<0.05)，与miR-145相对表达量呈负相关(r=-0.475、-0.382，P<0.05)。

3 讨论

PENG等[6]指出miR-92a可辅助诊断早期结直肠癌，且有望成为新型抗肿瘤药物的作用靶点。ALCANTARA和GARCIA[7]还指出，miR-92a可通过调控神经纤维瘤Ⅱ型表达，参与结直肠、肺等肿瘤的发生发展。近年FASSAN等[8]发现，血液miR-92a可用于诊断Barrett食管，有望成为预测食管癌发生风险的生物学标志物。本研究中，食管癌组外周血miR-92a相对表达量显著高于对照组，且经ROC曲线分析，外周血miR-92a相对表达量对食管癌诊断有利，提示外周血miR-92a过表达可能参与了食管癌的发生。不仅如此，TNM分期及淋巴结转移与外周血miR-92a相对表达量呈正相关，提示miR-92a发挥致癌效应，还可调控食管癌细胞侵袭及迁移。体外实验发现，miR-92a可通过调节细胞因子信号传导抑制蛋白及信号传导与转录激活因子表达，增强细胞致癌能力[9]。

表3 不同临床病理特征食管癌患者外周血miR-92a、miR-424、miR-145相对表达量比较

miR-424与人体血管生成及血管重建功能有关，在脑缺血性疾病中，miR-424过表达可保护脑损伤[10]。本研究也发现，TNM分期及淋巴结转移与外周血miR-424相对表达量呈正相关，提示miR-424表达增强对提升食管癌细胞侵袭迁移能力有利。

miR-145在宫颈、肺、食管等肿瘤中表达下调，并通过多种信号途径调控靶基因表达，发挥抑癌基因作用。本研究中，食管癌组外周血miR-145相对表达量低于对照组，且其相对表达量对食管癌诊断有利，提示miR-145可能发挥抑癌效应。本研究也发现，TNM分期及淋巴结转移与外周血miR-145相对表达量呈负相关，提示miR-145可能通过调控靶基因表达，抑制食管癌细胞的侵袭及迁移能力。

综上，食管癌患者外周血miR-92a、miR-424表达升高，miR-145表达下降，上述miR与食管癌的发生发展有关，有望成为食管癌诊疗的新靶点。