复方甘草酸苷干预肝硬化小鼠对肝功能的影响

摘要：目的：探讨复方甘草酸苷干预肝硬化小鼠对肝功能指标影响。方法：选取100只雄性小鼠，按照随机数字表法分为对照组、模型组、复方甘草酸苷低、中、高剂量组，每组20只小鼠。除对照组使用0.9% NaCl注射液外，其余小鼠进行每周2次的皮下注射CCl4（1.0mg/kg）构建肝硬化模型，2个月后，复方甘草酸苷低、中、高剂量组分别持续灌胃复方甘草酸苷5ml/kg、10ml/kg、15ml/kg，2次/d，持续1个月。记录所有小鼠肝功能指标。结果：谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）水平在模型组、复方甘草酸苷低剂量、中剂量、高剂量组、对照组依次降低（P<0.05）。白蛋白（ALB）、总胆红素（TBIL）水平，模型组、复方甘草酸苷低劑量、中剂量组的均高于对照组（P<0.05），复方甘草酸苷高剂量组低于复方甘草酸苷低剂量、中剂量组（P<0.05），复方甘草酸苷高剂量组和对照组以及模型组和复方甘草酸苷低剂量组差异不明显（P>0.05）。结论：高浓度的复方甘草酸苷能有效降低小鼠血清肝功能。

关键词：复方甘草酸苷;小鼠;肝硬化;肝功能

肝硬化是临床常见的慢性进行性肝病，由一种或多种病因长期或反复作用形成的疾病，具有弥漫性[1]。复方甘草酸苷是一种以甘草酸为主的药物，对花生四烯酸的代谢有一定抑制作用，具有良好的抗炎和护肝功能，早期被广泛应用于肝硬化治疗中[2-4]。目前，研究复方甘草酸苷对人类酒精性肝硬化肝功能和肝硬化影响较多，而关于小鼠的研究较少，本研究采用肝硬化小鼠为动物模型，检测不同浓度复方甘草酸苷对小鼠体内肝功能如谷丙转氨酶（Alanine transaminase，ALT）、谷草转氨酶（Aspartate transaminase，AST）、白蛋白（Albumin，ALB）、总胆红素（Total bilirubin，TBIL）等的影响。

1资料与方法

1.1实验材料

1.1.1药物及器材

复方甘草酸苷（国药准字H20080677，潍坊中狮制药有限公司），CCl4（批号20130329，成都市科龙化工试剂厂），NaCl注射液（货号：YJ-12259R，上海雅吉生物科技有限公司），全自动生化分析仪（货号：Selectra E Chemistry Analyzer，上海玉研科学仪器有限公司），HA小鼠酶联免疫试剂盒、LN小鼠酶联免疫试剂盒、PCⅢ小鼠酶联免疫试剂盒、CG小鼠酶联免疫试剂盒。

1.1.2实验动物及分组

Balb/c小鼠（货号：CS-004，辽宁长生生物技术股份有限公司）100只，均为雄性，体重（36.1±1.5）g，按照随机数字表法分为对照组、模型组、复方甘草酸苷低（5ml/kg）、中（10ml/kg）、高剂量组（15ml/kg），每组20只小鼠。由于CCl4毒性较大，可能致使小鼠死亡，最终每组均保留15只小鼠数据。

1.2模型建立及检测方法

1.2.1肝硬化小鼠模型建立

模型组、复方甘草酸苷低、中、高剂量组小鼠进行每周2次的皮下注射CCl4（1.0mg/kg）构建肝硬化模型，2个月后复方甘草酸苷低、中、高剂量组分别持续灌胃复方甘草酸苷5ml/kg、10ml/kg、15ml/kg，300μL，2次/d，持续1个月。期间对照组给予0.9% NaCl注射液，所有小鼠饮食自由。

1.2.2检测方法及标准

肝功能指标检测：肝硬化小鼠模型建立并给药完成，第3个月后取小鼠血液离心后的血浆，使用全自动生化分析仪检测小鼠肝功能指标ALT、AST、ALB、TBIL的变化，严格按照操作说明进行。

1.3统计学方法

采用SPSS 23.0进行数据分析。计量资料采用（x¯±s）表示，行t检验。以P<0.05为差异有统计学意义。

2结果

2.1各组小鼠肝功能指标比较

模型组、复方甘草酸苷低剂量、中剂量、高剂量组的ALT、AST均高于对照组，复方甘草酸苷低剂量、中剂量、高剂量组低于模型组，复方甘草酸苷高剂量组低于复方甘草酸苷低剂量、中剂量组，差异有统计学意义（P<0.05）。模型组、复方甘草酸苷低剂量、中剂量组的ALB、TBIL均高于对照组，差异有统计学意义（P<0.05），复方甘草酸苷高剂量组和对照组差异无统计学意义（P>0.05），模型组和复方甘草酸苷低剂量组差异无统计学意义（P>0.05），复方甘草酸苷高剂量组低于复方甘草酸苷低剂量、中剂量组，差异有统计学意义（P<0.05）。见表1。

3讨论

病理组织学上有广泛的肝细胞坏死、残存肝细胞结节性再生，结缔组织增生与纤维隔形成，导致肝小叶结构破坏和假小叶形成，肝脏逐渐变形，变硬而发展为肝硬化[5]。肝硬化不仅导致肝功能异常，影响人类正常代谢，而且严重影响肝脏微循环，使门脉阻力增加[1]。因此，治疗肝硬化重点在于抗纤维化治疗、改善肝脏功能[6，7]。

复方甘草酸苷由甘草根茎中提取，主要成分有甘草酸、半胱氨酸以及甘氨酸，不仅通过抑制磷酸酯酶 A2以及炎性因子的活性发挥抗炎作用[2，8]，还可通过调节花生四烯酸代谢过程，使磷脂酶激活，增强糖皮质激素的抑制作用发挥抗炎作用，调节T淋巴细胞抑制病毒增殖，达到保护肝细胞膜作用[9，10] 。本研究显示，ALT、AST水平在模型组、复方甘草酸苷低剂量、中剂量、高剂量组、对照组依次降低，且有明显差异，表明复方甘草酸苷可保护小鼠肝功能，剂量越高效果越好。综上所述，高浓度的复方甘草酸苷能有效降低小鼠血清ALT、AST、TBIL水平，有效治疗小鼠肝硬化。

参考文献：

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[5]段少琼，杜娜，周天彤，等.化肝解毒汤联合复方甘草酸苷治疗慢性乙型病毒性肝炎疗效观察[J].现代中西医结合杂志，2020，29（27）：3021-3024.

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[7]王大秀，韩继武.成纤维细胞生长因子21对小鼠肝纤维化的作用及其机制[J].临床肝胆病杂志， 2018， 34（6）：78-82.

[8]袁元，李静.复方甘草酸苷联合替诺福韦酯对慢性乙型肝炎患者的临床疗效[J].中成药， 2019， 41（10）：2544-2546.

[9]高海丽，杨道坤，梁海军，等.苦参素对乙型肝炎患者免疫及纤维化状态的治疗研究[J].中华医院感染学杂志，2016，26（5）：985-987.

[10]叶泉忠，王霞，徐正才， 等.复方甘草酸苷联合阿托伐他汀治疗NAFLD的疗效及对肝纤维化和胰岛素抵抗指标的影响[J].浙江医学，2020，42（12）：1268-1272.

第一作者：王剑，（1984--）男，汉族，陕西渭南人，硕士，讲师，渭南职业技术学院，主要从事生理、药理教学工作。

课题名称：陕西省教育厅专项科研计划项目（复方甘草酸苷对肝硬化患者治疗作用的临床研究）

课题编号：19JK0303