MSI检测在结直肠癌病人免疫治疗中的应用研究

黄科峰

【关键词】MSI;结直肠癌;免疫治疗

【中图分类号】R574.63 【文献标识码】A 【文章编号】2026-5328（2022）03--01

结直肠癌（CRC）是癌细胞出现在结肠和直肠部位的肿瘤，对于人们的身体健康有着较大的危害，严重影响患者的生活质量，根据恶性肿瘤发病率统计数据我国居民中CRC的发病率为第三名[1]。随着时代的发展，CRC患病年龄呈低龄化趋势，而患病人数逐年上涨。对于CRC的早发现，早诊断与及时治疗非常重要。微卫星不稳定（Microsatellite instability，MSI）是CRC发生的一个重要的因素，DNA 错配修复（MMR）、基因突变及表观遗传沉默综合作用的结果是MSI出现的原因，出现MSI导致细胞基因调控被扰乱进而成为肿瘤细胞。MSI一般分为三种状态：分别是高度微卫星不稳定性（MSI-H），低度微卫星不稳定性（MSI-L）和微卫星稳定性（MSS）[2]。本文通过检测病人组织的MSI状态来确定MSI在结直肠癌病人免疫治疗中作用。

1 材料与方法

1.1样本收集

收集2021年1月至12月手术切除的结肠腺癌标本120例，其中男性75例（62.5%），女性45例（37.5%）;患者的年龄范围是27～85岁，平均年龄为57.1±16.3岁。依据UICC分期委员会提出的TNM分期标准，Ⅰ期30例;Ⅱ期45例;Ⅲ期28例;Ⅳ期17例。此次研究所有病例都是原发性肿瘤，手术前都没有进行治疗，而且排除非肿瘤性死亡病例。本次研究获得病人的知情同意。

1.2多重荧光PCR毛细管电泳检测微卫星稳定状况

取用5张白片放置在乙醇中浸泡5分钟，用水冲洗后晾干，使用刀片刮下组织至EP管内，提取DNA，检测6个单核核苷酸重复标记物（BAT-25、BAT-26、NR-21、NR-24、NR-27、 Mono-27），2个五核苷酸重复标记物（Penta C与Peta D）和性别位点（Amel），PCR扩增反应后，在一代测序仪进行毛细管电泳检测，分析数据。

1.3结果判定

大于等于2个单核苷酸位点的片段大小发生改变为微卫星高度不稳定（ microsatellite instablehigh，MSI-H），1个单核苷酸位点的片段大小发生改变为微卫星低度不稳定（ microsatellite instable-low，MSI-L），没有单核苷酸位点的片段大小发生改变为MSS。

1.4免疫治疗

对选取的病人采用特瑞普利单抗免疫治疗，治疗方案240 mg，1次/3周，治疗周期5次，观察记录病人的症状，每次治疗后进行检查，，参照实体瘤近期疗效评价（ RECIST） 对患者近期疗效进行评估，可以分为：完全缓解（CR），部分缓解（PR），稳定（SD），进展（PD），计算客观缓解率（ORR）与疾病控制率（DCR），计算方式ORR=（CR+PR）/总例数×100%;DCR=（CR+PR+SD）/总例数×100%。

1.5统计学方法

使用SPSS 25.0统计学软件对收集到的数據进行统计学分析，计数资料以n/百分数（%）表示，使用χ2 检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1MSI检测状态分析

通过对120例样本进行检测，MSI-H有28例（23.3%），MSI-L有20例（16.7%），MSS有72例（60%）。

2.2免疫治疗效果分析

对病人进行治疗后，MSI不同状态的ORR和DCR差异较大，MSI-H的病人使用免疫治疗后ORR和DCR显著高于MSI-L/MSS的病人，差异具有统计意义（P<0.05），MSI-H的病人经过治疗后没有出现明显不良反应，生活质量良好，安全耐受性高。

3 讨论

随着科技的不断发展，人们的饮食方式也在变化，外卖，奶茶的流行，造成结直肠癌的发病率越来越高，且呈现年轻化趋势。近年来随着基因检测的广泛应用，越来越多的病理科使用分子诊断进行肿瘤的筛查与诊断，为临床的治疗提供依据。1993年最早发现人体内存在MSI现象。随着研究的进行，2017年FDA批准帕博丽珠单抗用于治疗CRC患者，开启免疫治疗时代。随后国内也相继获批很多款用于免疫治疗的单抗药物。有研究表明使用PD-1单抗治疗MSI-H的CRC患者的ORR比MSI-L/MSS要好[3]，张杰等人研究使用免疫治疗1例MSI-H的CRC患者，使用单抗药物治疗五周后观察各项指标满足全完缓解的标准，说明对于MSI-H的CRC患者使用免疫治疗很有效[4]，Manz等人研究发现对于MSI-H的CRC患者，使用免疫检查点药物能够提高病人的治疗效果[5]。本研究检测120例CRC患者的样本，MSI-H的CRC患者比例为23.3%，使用免疫治疗后的ORR为78.6%，DCR为92.9%，结果表明对于MSI-H的CRC患者使用免疫治疗效果很好，提示MSI检测的状态能够作为免疫治疗的一个生物标志物。

综上所述，对于CRC病人应该进行MSI状态检测，根据MSI状态进行后续治疗方案的选择，国内外多个指南（NCCN，ESMO，CSCO）都有推荐MSI检测作为CRC患者的必检项目，基于之前的研究和本次研究的结果，MSI-H可以作为结直肠癌病人免疫治疗的潜在生物标志物。

参考文献：

[1] 郑荣寿，孙可欣，张思维，等.2015 年中国恶性肿瘤流行情况分析[J]. 中华肿瘤杂志，2019，41（1）：19-28.

[2] 王晓迎，由继君，张永大，等. 结直肠癌中肿瘤浸润性淋巴细胞与微卫星不稳定的相关性分析及预后价值评估[J]. 解剖科学进展，2022， 28（1）： 96-99.

[3] Idos GE， Kwok J， Bonthala N， et al. The prognostic implications of tumor infiltrating lymphocytes in colorectal cancer： A systematic review and meta-analysis [J]. Sci Rep， 2020， 10（1）： 3360.

[4] 张杰，甘露，张涛. 微卫星高度不稳定局部晚期直肠癌免疫治疗1例报道[J]. 肿瘤综合治疗，2022，8（1）：117-120.

[5] Manz SM， Losam， Fritsch R， et al. Efficacy and side effects of immune checkpoint inhibitors in the treatment of colorectal cancer[J]. Therap Adv Gastroenterol， 2021， 14： 17562848211002018.