高海拔地区孕妇血清妊娠相关血浆蛋白-A2、胰岛素样生长因子结合蛋白5水平与子痫前期的相关性

张丽萍, 张柱海, 李惠琴

(青海省西宁市第一人民医院 产科, 青海 西宁, 810000)

子痫前期是指妊娠20周以后出现的血压升高、24 h尿蛋白定量≥0.3 g或随机尿蛋白呈阳性，是妊娠期高血压的常见并发症，临床表现为头痛眼花、恶心呕吐、上腹不适等，严重者可伴抽搐甚至昏迷，严重威胁孕妇及胎儿健康。目前，子痫前期的发病机制尚不明确，但普遍认为可能与胎盘缺血缺氧有关[1-2]。妊娠相关血浆蛋白-A2(PAPP-A2)是一种新型胰岛素样生长因子结合蛋白5(IGFBP5)蛋白酶，研究[3-4]称PAPP-A2在子痫前期水平升高，其水平变化受胰岛素样生长因子结合蛋白(IGFBPs)和相关蛋白酶调节。IGFBP5是PAPP-A2的天然底物, PAPP-A2在Ser-143和Lys-144之间特异性裂解IGFBP5, 二者水平存在一定相关性[5]。研究[6]发现，受高海拔地区地理或环境因素的影响，机体长期处于低温缺氧状态，妊娠期妇女血液浓度增加，血管阻力增加，肾小球滤过率表现出一定程度的降低，使得血压有所升高，从而可能导致妊娠期高血压的发生。目前，血清PAPP-A2、IGFBP5水平与高海拔地区孕妇子痫前期的关系研究仍较少。本研究通过检测高海拔地区孕妇孕早期血清PAPP-A2、IGFBP5水平，分析其与子痫前期的相关性，现将结果报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2017年6月—2019年6月在本院分娩的子痫前期孕妇76例及正常妊娠孕妇70例为研究对象，本院所在地区海拔2 500～4 500 m。子痫前期组孕妇年龄21～32岁，平均(26.94±4.16)岁，平均孕周(35.17±1.02)周，新生儿体质量(2.47±0.82) kg; 居住地区海拔<3 500 m者35例，海拔≥3 500 m者41例。正常妊娠组孕妇年龄23～35岁，平均(27.35±3.92)岁，平均孕周(39.31±1.14)周，新生儿体质量(3.25±0.64) kg; 居住地区海拔<3 500 m者33例，海拔≥3 500 m者37例。纳入标准: ① 符合《妇科学(第8版)》中子痫前期临床诊断标准者; ② 单胎孕妇; ③ 具有早期检查至分娩的完整临床资料者; ④遵医嘱且能配合完成相关检查者。排除标准: ① 合并自身免疫疾病者; ② 合并慢性高血压病史、心脑血管疾病史、肿瘤疾病者; ③ 合并糖尿病、肾病等合并症者; ④ 多胎、胎儿畸形者。所有研究对象均知情同意，本研究获得本院伦理委员会批准。

1.2 方法

1.2.1 血样标本采集: 2组研究对象在未经任何治疗的情况下，于妊娠12～15周、32～35周抽取外周静脉血5 mL, 置于抗凝管中，静置30 min后，以2 000 转/min离心10 min, 分离血清置于干净EP管，置于-70 ℃冷冻冰箱保存。

1.2.2 血清PAPP-A2、IGFBP5水平检测: 采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清PAPP-A2、IGFBP5水平，试剂盒均购自美国Sigma公司，检测过程严格按照说明书的步骤进行，检测仪器为LD-96A型酶标仪，购自山东莱恩德智能科技有限公司。

1.3 统计学方法

2 结 果

2.1 2组孕妇一般资料比较

子痫前期组与正常妊娠组孕妇的年龄、体质量指数、初次分娩人数所占比率、居住地海拔高度以及孕12～15周时的收缩压、舒张压、24 h尿蛋白定量水平比较，差异均无统计学意义(P>0.05); 子痫前期组孕周、新生儿体质量低于正常妊娠组，孕32～35周时的收缩压、舒张压及24 h尿蛋白定量水平高于正常妊娠组，差异均有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 2组孕妇一般资料比较

2.2 2组孕妇不同孕期血清PAPP-A2、IGFBP5水平比较

孕12～15周、孕32～35周时，子痫前期组孕妇血清PAPP-A2、IGFBP5水平均高于正常妊娠组，差异有统计学意义(P<0.05), 见表2。

表2 2组孕妇不同孕期血清PAPP-A2、IGFBP5水平比较 ng/mL

2.3 孕早期孕妇血清PAPP-A2、IGFBP5水平对子痫前期的预测价值

ROC曲线结果显示，孕早期孕妇血清PAPP-A2、IGFBP5诊断子痫前期的曲线下面积(AUC)分别为0.749、0.873, 对应的灵敏度分别为76.32%、77.63%, 特异度分别为71.43%、85.71%; PAPP-A2联合IGFBP5诊断子痫前期的AUC为0.916, 灵敏度和特异度分别为88.16%、84.29%, 见表3、图1。

表3 孕早期孕妇血清PAPP-A2、IGFBP5水平对子痫前期的诊断效能

图1 孕早期孕妇血清PAPP-A2、IGFBP5水平诊断子痫前期的ROC曲线

2.4 影响子痫前期发生的多因素Logistic分析

以子痫前期是否发生为因变量，以孕早期24 h尿蛋白定量水平及血清PAPP-A2、IGFBP5水平为自变量，进行多因素Logistic回归分析，结果显示孕早期血清PAPP-A2(OR=1.528, 95%CI为1.141～2.046)、IGFBP5(OR=1.892, 95%CI为1.246～2.872)是子痫前期发生的影响因素，见表4。

表4 影响子痫前期发生的多因素Logistic分析

3 讨 论

关于子痫前期的发病机制，普遍认为与血管内皮细胞激活和损坏有关，主要分为2个阶段，第1个阶段的特征为胎盘灌注减少，第2个阶段的特征为孕产妇全身血管内皮细胞广泛激活、损伤，具体作用机制尚不明确[7]。高海拔地区的地理环境具有特殊性，对妊娠期高血压孕妇的影响表现出一定的季节性特点。根据既往研究[8]结合实际病例发现，秋冬季节时子痫前期患者发病呈上升趋势，可能是因长期处于低温低氧状态下，患者血清中某些细胞因子水平发生改变，差异性表达导致机体血压升高。

PAPP-A2是新型的妊娠相关血浆蛋白，与妊娠相关血浆蛋白A(PAPP-A)具有同源性[9]。PAPP-A2是一种金属蛋白酶，可特异性水解IGFBP-5, 通过调控胰岛素样生长因子(IGFs)发挥作用。IGFs在胎盘发育中起关键作用，受IGFBPs的调节，而IGFs主要通过蛋白酶裂解IGFBPs释放[10-11]。PAPP-A2主要在分化的滋养层细胞和胎儿内皮细胞中表达，胎盘发生异常时，滋养层细胞侵袭性减弱，使子宫内膜浸润不足，导致胎盘绒毛不易着床，致使子宫螺旋动脉发生重塑障碍，胎盘未得到足够的血液供应而长期处于缺血缺氧状态，这可能是造成PAPP-A2表达上调的原因之一[12]。研究[13]认为IGFBP-5可能在细胞衰老和细胞炎症中起决定性作用，在肿瘤抑制因子p53诱导下, IGFBP-5表达上调，从而介导不依赖IGF-Ⅰ和IGF-Ⅱ的人内皮细胞复制性衰老。研究[14]还报道, IGFBP-5位于妊娠早期胎盘绒毛的合体滋养层，可通过减弱IGF-Ⅰ和IGF-Ⅱ促进滋养层细胞迁移。本研究结果显示，孕12～15周、孕32～35周时，子痫前期组孕妇血清PAPP-A2、IGFBP5水平均显著高于正常妊娠组，表明子痫前期孕妇胎盘发育出现异常，滋养层细胞功能发生改变，早期检测血清指标可能对预测子痫前期的发生具有积极意义。

高海拔地区受气候环境的影响，妊娠期高血压孕妇的病情控制较难，极大概率会出现子痫[6]。高原地区海拔高、气压低、温度低，空气较平原地区稀薄，长期处于缺氧状态，子痫前期孕妇全身细小动脉痉挛收缩，引起各器官血液灌注减少，引发慢性缺血缺氧，从而造成器官功能损害[15]。LAMALE-SMITH L M等[11]研究称，居住在高海拔地区的孕妇出现子痫前期的概率增高, PAPP-A2水平在伴有子宫胎盘缺血多普勒指数的早发子痫前期时升高，且在高海拔时升高趋势较低海拔时更显著。本研究ROC曲线显示，当孕早期血清PAPP-A2>5.04 ng/mL、IGFBP5>7.56 ng/mL时，发生子痫前期的概率会升高，且二者联合对子痫前期的预测效能更高，提示检测孕妇孕早期血清PAPP-A2、IGFBP5水平对预测子痫前期有一定帮助。本研究多因素Logistic分析结果显示，孕12～15周时的血清PAPP-A2、IGFBP5水平较高是影响子痫前期发生的危险因素，提示PAPP-A2、IGFBP5有望作为预测子痫前期的早期生物标志物，应对孕早期血清PAPP-A2、IGFBP5水平高于界值的孕妇加强监测，以实现早发现、早治疗，保障孕产妇及胎儿生命安全。

本研究的不足: ① 孕妇血清中的多种指标均与子痫前期的发生相关，如胎盘生长因子，后续研究中可探讨PAPP-A2、IGFBP5及胎盘生长因子与高海拔地区孕妇子痫前期发生的关系; ② 本研究仅对高海拔地区子痫前期孕妇和正常妊娠孕妇血清指标进行了检测，结果具有一定的局限性，未来应开展更大样本量、多中心的前瞻性研究，对高海拔和低海拔地区、不同种族间的子痫前期孕妇进行深入研究。

综上所述，子痫前期孕妇血清PAPP-A2、IGFBP5水平表达上调，孕早期血清PAPP-A2、IGFBP5对子痫前期具有一定的预测价值，提示血清PAPP-A2、IGFBP5或可作为预测子痫前期发生的潜在生物标志物，其具体作用机制仍有待进一步研究。